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浙江省科技厅项目(2007F10033)
作品数:
4
被引量:4
H指数:1
相关作者:
石君帆
泮结超
宋广忠
漏磊君
李召东
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相关机构:
浙江省医学科学院
杭州市红十字会医院
科罗拉多大学
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发文基金:
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相关领域:
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医药卫生
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融合基因
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噬菌体
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重组蛋白
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细胞定位
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细菌
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细菌噬菌体
机构
5篇
浙江省医学科...
2篇
杭州市红十字...
2篇
科罗拉多大学
作者
5篇
石君帆
3篇
漏磊君
3篇
宋广忠
3篇
泮结超
2篇
杨明瑾
2篇
李召东
1篇
泮洁超
传媒
2篇
国际流行病学...
1篇
浙江省医学科...
1篇
中华生物医学...
年份
3篇
2011
1篇
2010
1篇
2009
共
4
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结核分枝杆菌rESAT-6-CFP-10融合蛋白的制备及其血清学诊断价值
被引量:4
2010年
目的 表达、纯化结核分枝杆菌rESAT-6-CFP-10(rEC)融合蛋白,评价其在结核病血清学诊断方面的应用价值.方法 用镍离子螯合亲和层析柱纯化融合蛋白,用ELISA法检测血清样本中的抗结核抗体,以37例PPD阴性患者正常血清A492+2s为正常限值,评价rEC诊断的特异性及灵敏度.结果 rEC融合蛋白在大肠埃希菌中以可溶性非包涵体形式表达,表达浓度为0.19 mg/mL.rFC检测抗结核抗体在PPD阳性健康人群中的特异性为100%(30/30),在痰涂片或细菌培养阳性和两法均阴性的结核病患者中灵敏度分别为75.56%(34/45)和67.3]%(35/52).结论 结核分枝杆菌rEC融合蛋白以可溶性形式高效表达,具有较强的免疫反应性和较高的血清学诊断价值.
石君帆
宋广忠
泮结超
漏磊君
杨明瑾
李召东
关键词:
血清学诊断
结核分支杆菌重组蛋白rCFP-10的表达、纯化及免疫反应性分析
2009年
目的表达、纯化结核分支杆菌H37Rv株重组蛋白rCFP—10,评价其免疫反应性,为结核病血清学诊断价值研究及亚单位疫苗研制提供物质基础。方法重组质粒pET23b—CFP-10转化E.coli表达菌株BL21(DE3)pLysE,IPTG诱导重组蛋白rCFP-10表达。经SDS—PAGE电泳和Westernblotting鉴定后,优化表达条件用镍离子鳌合亲和层析柱HisTrap^TMHP纯化重组蛋白,最后用斑点金免疫渗滤法初步评价纯化蛋白的免疫反应性。结果成功构建了重组质粒pET23b—CFP-10并且重组蛋白rCFP-10以可溶性形式高效表达,表达量约占菌体总蛋白的10%。经亲和层析后得到高纯度有免疫反应性的重组蛋白(纯度约为98.5%)。结论高纯度有免疫反应性的重组蛋白rGFP-10为新型亚单位疫苗的研发及其结核病血清学诊断价值研究奠定了基础。
宋广忠
石君帆
泮结超
杨明瑾
漏磊君
John T. Belisle
关键词:
CFP-10
血清学诊断
亚单位疫苗
结核
噬菌体展示抗体库技术及其应用
2011年
噬菌体抗体库技术的出现为人源性抗体的制备提供了良好的技术平台,并且逐渐成为目前获得人源性抗体的主要手段之一。噬菌体抗体库技术是20世纪90年代初期抗体工程领域的一项重大进展,它是噬菌体展示和抗体文库两种技术的集成,目前广泛应用于生物医学领域。此文对该技术的构建、亲和筛选方法及其应用价值进行了综述。
泮洁超
石君帆
关键词:
细菌噬菌体
抗体库
结核分枝杆菌rPstS1-HspX融合蛋白的表达、纯化及其免疫反应性分析
被引量:1
2011年
目的构建结核分枝杆菌rpstS1-hspX(rph)融合基因及其原核表达载体pET-23b(+)-rpstS1-hspX[pET-23b(+)-rph],表达、纯化rPstS1-HspX(rPH)融合蛋白,并分析其免疫反应性。方法采用基因拼接技术将PstS1和HspX编码基因通过多肽接头(GSGSG)的DNA序列进行连接,构建融合基因rph。将融合基因定向克隆人原核表达载体pET.23b(+),构建重组原核表达质粒pET-23b(+)-rph。将重组质粒转化大肠杆菌E-coli BL21(DE3)pLysE感受态细胞,IPTG诱导融合蛋白表达。SDS—PAGE和Western印迹法鉴定其表达情况。用镍离子鳌合亲和层析柱纯化融合蛋白,Western印迹法初步评价融合蛋白的免疫反应性。结果融合基因rph及其原核表达载体pET-23b(+)-rph构建成功。融合蛋白rPH主要以可溶性非包涵体形式表达,相对分子质量为51000,表达量约占菌体总蛋白的23%。经亲和层析后得到了纯度达92%的融合蛋白。Western印迹证实融合蛋白能与结核病阳性血清发生特异性免疫反应。结论成功构建了原核表达载体pET-23b(+)-rph,获得了rPH融合蛋白,为rPH融合蛋白在结核病诊断中的应用提供了依据。
宋广忠
石君帆
泮结超
漏磊君
李召东
关键词:
结核分枝杆菌
融合基因
融合蛋白
纯化
免疫反应性
结核杆菌H37Rv株重组PstS1蛋白的表达纯化研究
目的表达纯化结核杆菌H37Rv株重组PstS1(简称rPstS1)蛋白,为结核病血清学诊断价值研究及亚单位疫苗研制提供物质基础。方法:重组质粒pET15b-PstS1转化大肠埃希菌表达菌株BL21(DE3)plysE,I...
石君帆
宋广忠
泮结超
漏磊君
John T.Belisle
关键词:
亚细胞定位
结核
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