国家自然科学基金(30470719)
- 作品数：16 被引量：71H指数：5
- 相关作者：廖端芳朱炳阳许灿新庹勤慧罗迪贤更多>>
- 相关机构：南华大学中南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省教育厅科研基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 细胞外信号调节激酶1/2在压应力诱导血管平滑肌细胞增殖中的作用被引量：2
- 2006年
- 目的探讨压应力对血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制。方法用自行研制的压力培养箱加不同压力(大气压0 mmHg、正常血压120 mmHg、高血压180 mmHg和高血压危象血压240 mmHg)处理原代血管平滑肌细胞24 h。用MTT法和细胞计数法观察压应力对血管平滑肌细胞增殖的影响;用免疫印迹法检测细胞外信号调节激酶1/2的含量。结果与大气压组比较,正常血压压力组和高血压压力组的血管平滑肌细胞增殖速度和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2的含量都明显增高(P<0.01),其中正常血压压力的作用又比高血压压力要明显(P<0.05);而高血压危象血压压力没有促增殖效应(P>0.05)。结论在一定范围内,压应力可通过细胞外信号调节激酶1/2途径促进血管平滑肌细胞增殖。
- 罗迪贤匡双玉朱炳阳梁磊许灿新庹勤慧何淑雅廖端芳
- 关键词：压应力血管平滑肌细胞增殖细胞外信号调节激酶
- Daxx过表达对氧化应激诱导的肝肿瘤细胞凋亡的影响(英文)被引量：4
- 2008年
- 死亡结构域相关蛋白Daxx可以敏化多种肿瘤细胞的凋亡过程,但对于肝肿瘤细胞株HepG2的影响未见报道.为了研究Daxx增加肝HepG2细胞对药物敏感性的影响及机制,为开发药物新的药理作用提供理论依据,分别转染pEGFP-C1和pEGFP-C1-Daxx这两个载体到HepG2细胞.实验分组如下:(1)正常对照组(未转染细胞组);(2)pEGFP-C1空载体转染组(HepG2/GFP细胞);(3)pEGFP-C1-Daxx表达载体转染组(HepG2/GFP-Daxx细胞).筛选稳定细胞株,用逆转录聚合酶链反应检测mRNA的表达;用过氧化氢孵育24h诱导细胞凋亡,采用MTT法和流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测蛋白质的表达.经G418筛选稳定的细胞运用RT-PCR技术分析其mRNA,结果显示,转染绿色荧光蛋白Daxx表达载体的细胞Daxx的mRNA明显上调;用荧光显微镜观察到Daxx蛋白主要定位于细胞核.用过氧化氢诱导HepG2细胞凋亡,观察到过氧化氢呈浓度依赖性地抑制HepG2细胞活性.正常对照细胞、HepG2/GFP、HepG2/GFP-Daxx 3组细胞的IC50值分别是0.72、0.76、0.49mmol/L.并且运用流式细胞仪检测到HepG2/GFP-Daxx组细胞凋亡率明显高于转染空载体质粒组与未转染组((42.9±8.42)vs(27.3±6.38)or(28.5±4.71)).提示HepG2/GFP-Daxx细胞对过氧化氢的反应性较未转染细胞和HepG2/GFP敏感.还运用Western-blot检测到活化的caspase3在Daxx转染组细胞表达最强,达到(204.66±19.68)%,而未转染和HepG2/GFP组细胞分别是(100±3.1)%、(107.39±20.1)%,进一步说明了Daxx可以增加HepG2细胞对于过氧化氢的敏感性.同时,观察到过氧化氢处理24h后,Daxx转染组细胞磷酸化的JNK表达明显高于空载体转染组和未转染细胞组.上述结果表明:a.Daxx可以增加肝HepG2细胞对过氧化氢诱导的细胞凋亡敏感性;b.Daxx蛋白敏化过氧化氢诱导的HepG2细胞凋亡可能与协同增加JNK活性有关.
- 庹勤慧熊国祚朱炳阳曹建国廖端芳
- 关键词：DAXXHEPG2细胞细胞凋亡过氧化氢
- Daxx及相关蛋白在介导ox-LDL诱导巨噬细胞凋亡中的作用
- 目的探讨Daxx及相关蛋白在介导ox-LDL诱导巨噬细胞凋亡中的作用。方法通过MTT比色法检测ox-LDL对RAW264.7细胞生长的影响;用AO/EB染色、流式细胞术和DNA断裂片段分析研究ox-LDL诱导的细胞凋亡;...
- 贺庆芝廖端芳
- 文献传递
- 抗人血栓调节蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2006年
- 为了制备特异性抗人血栓调节蛋白(human thrombomodulin,hTM)的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),利用脂质体Lipofectamine 2000将包含hTM全长cDNA序列的重组表达质粒pThr402转染CHO细胞,经G418筛选及相关鉴定后获得高效稳定表达hTM的CHO-TM5细胞株。将CHO-TM5细胞直接免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术,通过细胞ELISA (cellular enzyme-linked immunoabsorbent assay,CELISA)筛选出阳性克隆后,将杂交瘤细胞株腹腔注射Balb/c小鼠诱生腹水。用CELISA、流式细胞术、免疫组织化学染色法及免疫印迹法对所获McAb的特异性进行鉴定。我们获得了1株可稳定分泌抗hTM的McAb的杂交瘤细胞株NH-1,其亚型为IgGl,McAb腹水效价为1×10^(-6),腹水抗体含量为20 mg/ml。NH-1对相应抗原具有较高的组织特异性,在体内与正常组织的交叉反应少,对人脐静脉内皮细胞、CHO-TM5有特异性结合反应,说明NH-1可特异性识别天然的hTM分子,为进一步应用此McAb进行hTM生物学功能及临床意义研究提供了基础。
- 郭紫芬何淑雅朱炳阳严鹏科李斌元廖端芳
- 关键词：血栓调节蛋白单克隆抗体
- 依泽替米贝对泡沫细胞胆固醇转运的影响被引量：1
- 2006年
- 目的：建立一种新的诱导巨噬细胞泡沫化的模型,并用这个模型探讨依泽替米贝对泡沫细胞胆固醇转运的影响.方法：用不同浓度（0,5,10,15,25,35,45和55μg/mL）的Chol：MβCD孵育巨噬细胞株RAW264.7细胞72 h;并选用45μg/mLChol：MβCD孵育RAW264.7细胞0,12,24,48,60,72 h.进一步在加入Chol：MβCD的同时加入ezetimibe和阳性对照药物lovastatin孵育.用HPLC检测细胞内游离胆固醇和总胆固醇含量,油红O染色观察细胞荷脂情况,用Western印迹法检测SREBP-1和caveolin-1蛋白的表达.结果：细胞内游离胆固醇、总胆固醇含量随Chol：MβCD浓度的增加,孵育时间的延长,呈浓度和时间依赖性地升高,分别在45μg/mL和72 h时达到峰值.Chol：MβCD 45μg/mL处理RAW264.7细胞72 h和用经典方法50μg/mL ox-LDL处理48 h,比较二种方法细胞内游离胆固醇、总胆固醇含量以及油红O染色显示的细胞内荷脂的情况均无明显差别.在加入45μg/mL的Chol：MβCD处理RAW264.7细胞的同时加入不同浓度依泽替米贝（3,10,30μmol/L）以及阳性对照药lovastatin,结果显示依泽替米贝和lovastatin均能显著降低细胞内胆固醇水平,且依泽替米贝的这一作用有剂量依赖性.Western印迹结果显示,Chol：MβCD诱导的模型组SREBP-1和caveolin-1的表达增加,而依泽替米贝和lovastatin能够逆转这种效应,且依泽替米贝的这一作用呈剂量依赖性.结论：Chol：MβCD能诱导RAW264.7细胞转化成为泡沫细胞.依泽替米贝能抑制Chol：MβCD诱导RAW264.7细胞形成泡沫细胞,其机制可能与通过下调SREBP-1表达进而下调caveolin-1的表达,抑制胆固醇的摄取有关.
- 梁磊庹勤慧朱炳阳匡双玉罗迪贤许灿新廖端芳
- 关键词：依泽替米贝巨噬细胞泡沫细胞CAVEOLIN-1SREBP-1
- 高压培养调节E选择素表达及核因子κB信号通路被引量：3
- 2008年
- 目的观察高压培养对内皮细胞E选择素表达的影响及其可能的分子机制。方法在自制的可调压力培养箱中,用高于1个标准大气压的不同压力培养人脐静脉内皮细胞,运用间接免疫荧光技术、流式细胞术检测血管内皮细胞粘附分子E选择素蛋白的表达,Western blot检测核因子κB抑制因子α的表达,间接免疫荧光法观察核因子κB的表达分布。结果高压培养和大气压培养细胞形态无明显差异;高压培养E选择素表达明显增加,180 mmHg培养24 h E选择素的表达升高1.5倍;180 mmHg培养6 h和12 h核因子κB抑制因子α的表达降低2倍多;180 mmHg培养24 h激活核因子κB,使其转位于细胞核。结论高压培养促进E选择素表达,核因子κB信号通路参与调控。
- 许灿新王春朱炳阳颜涛罗迪贤梁磊李凯罗其富廖端芳
- 关键词：病理学与病理生理学E选择素核因子ΚB
- 调控荷脂细胞胆固醇外向转运的干预策略与Daxx/SREBP/Caveolin-1信号的作用
- ＜正＞将巨噬细胞中过多的胆固醇转移至HDL,最后回到肝脏中,进行再循环或以胆汁酸的形式排出体外的过程,称为胆固醇逆转运（Reverse Cholesterol Transport,RCT）。促进RCT对防止AS形成和促进...
- 廖端芳
- 文献传递
- 姜黄素对血管平滑肌细胞源性荷脂细胞胆固醇代谢及SREBP-1表达的影响被引量：7
- 2006年
- 目的观察姜黄素对血管平滑肌细胞源性荷脂细胞胆固醇代谢的影响,并初步探讨SREBP-1蛋白表达在其中的作用。方法以血管平滑肌细胞源性荷脂细胞为模型,不同浓度姜黄素(12.5、25.0、50.0μmol/L)作用于细胞24 h及25.0μmol/L姜黄素不同时间(0、6、12、24、48 h)作用于细胞,高效液相色谱分析法检测细胞内总胆固醇。游离胆固醇和胆固醇酯的含量。在SREBP-1蛋白抑制剂ALLN干预下,25.0μmol/L姜黄素处理平滑肌细胞源性荷脂细胞24 h,Western印迹法检测SREBP-1蛋白的表达。结果不同浓度姜黄素(12.5、25.0、50.0μmol/L)作用于血管平滑肌细胞源性荷脂细胞24 h及25.0μmol/L姜黄素不同时间(06、1、22、4、48 h)作用于血管平滑肌细胞源性荷脂细胞,细胞内总胆固醇,游离胆固醇和胆固醇酯含量呈现一定的剂量和时间依赖性下降趋势;在SREBP-1蛋白抑制剂ALLN干预下,25.0μmol/L姜黄素处理平滑肌细胞源性荷脂细胞24 h,SREBP-1表达下调,总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量无明显变化。结论姜黄素能引起血管平滑肌细胞源性荷脂细胞总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量下降,且这种作用跟SREBP-1蛋白的表达上调有一定关系。
- 匡双玉庹勤慧朱炳阳梁磊李熠罗迪贤许灿新廖端芳
- 关键词：姜黄素荷脂细胞胆固醇SREBP-1
- 普罗布考在抗ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡中对CD36、Caveolin-1表达的影响被引量：2
- 2007年
- 目的研究普罗布考(Probucol)在抗ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡中对CD36、Caveolin-1表达的影响。方法用流式细胞仪检测细胞凋亡;用RT-PCR、免疫荧光分别检测CD36、Caveolin-1mRNA水平和蛋白表达。结果普罗布考抗ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡;RT-PCR检测发现普罗布考组与ox-LDL组CD36、Caveolin-1mRNA表达无明显差异;免疫荧光检测结果显示普罗布考下调Caveolin-1蛋白表达,但对CD36蛋白的表达没有影响。结论普罗布考在抗ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡中下调Caveolin-1蛋白的表达。
- 苏波何慧罗其富朱炳阳廖端芳
- 关键词：CD36CAVEOLIN-1
- The effect of Daxx on the cholesterol homeostasis of hepatic cells
- ＜正＞ To evaluate the effects of Death - associated protein （Daxx） on the cellular cholesterol homeostasis,we tr...
- Tuo Qing - Hui
- 关键词：DAXXCHOLESTEROLSREBP
- 文献传递
