广东省自然科学基金(5001680)
- 作品数：4 被引量：33H指数：3
- 相关作者：杨燕华胡承恒何小洪伍贵富杜志民更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院深圳市孙逸仙心血管医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐血单个核细胞移植对大鼠急性心肌梗死后血管再生的作用被引量：4
- 2006年
- 【目的】探讨人脐血单个核细胞移植对急性心肌梗死后血管再生的作用。【方法】雄性Wistar大鼠60只随机分为对照组(心肌梗死)和移植组(心肌梗死+细胞移植)各30只。结扎冠状动脉左前降支制作大鼠急性心肌梗死模型,以羟乙基淀粉沉淀加密度梯度离心的方法制备人脐血单个核细胞,并以5-溴脱氧尿核苷(BrdU)标记细胞。移植组大鼠模型制作成功后即在梗死区周边注射经分离并标记的人脐血单个核细胞混悬液(2×105/μL),在对照组相同位置注入等量达尔伯克必需培养基(DMEM)。移植4周后用左心导管检测血流动力学改变,并取心脏组织行抗第Ⅷ因子(vWF)和BrdU免疫组化染色,观察毛细血管密度、移植细胞成活情况。并分别在移植后第4天、第7天、第14天、第28天取梗死周边区组织作血管内皮生长因子(VEGF)RT-PCR的半定量研究。【结果】移植组移植的单个核细胞可在梗死心肌内存活。移植组比对照组心功能明显改善,左心室舒张末压(LVEDP)明显降低(21.08±8.10)mmHgvs(30.82±9.59)mmHg,P<0.05;左心室内压力最大上升速率(+dp/dtmax)明显增快(4.29±1.27)mmHg/msvs(3.24±0.75)mmHg/ms,P<0.05;最大下降速率(-dp/dtmax)亦显著提高(3.71±0.79)mmHg/msvs(3.00±0.49)mmHg/ms,P<0.05。移植组梗死区周边毛细血管数显著增加(5.7±0.3)/HPvs(2.3±0.4)/HP,P<0.01。VEGFmRNA表达在移植组于第7天明显增加,并持续至第28天,对照组于第4天及第7天可见少量表达,第14天与第28天明显减弱,两组差异有统计学意义(P<0.01)。【结论】人脐血干细胞在未使用免疫抑制剂的条件下可成功移植到大鼠急性心肌梗死区,改善急性心肌梗死大鼠心功能,促进新生血管形成。
- 胡承恒杨燕华王小庆伍贵富杜志民何小洪
- 关键词：心肌梗死脐带血细胞移植
- 人脐血单个核细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究被引量：18
- 2006年
- 目的探讨人脐血单个核细胞(HUCBC)移植治疗急性心肌梗死(AMI)的可行性及疗效。方法雄性Wistar大鼠45只随机分为:心肌梗死(MI)对照组、MI+细胞移植组和正常组(每组各15只)。结扎冠状动脉左前降支制作大鼠AMI模型,以HES沉淀加Ficoll密度梯度离心的方法制备HUCBC,并以BrdU标记细胞。移植组大鼠模型制作成功后即刻在梗死区周边注射经分离并标记的HUCBC混悬液,在MI对照组相同位置注入等量DMEM培养液,正常组不做任何处理。移植4周后用超声评价心功能和左心导管检测血流动力学改变,并取心脏组织行HE染色、抗血管性血友病因子(vWF)和BrdU组化染色,观察心肌病理改变、毛细血管增生及移植细胞成活情况。结果在移植组显示移植的单个核细胞可在梗死心肌内存活并参与梗死心肌修复。超声心动图见移植组各项心功能指标改善。血流动力学检查显示移植组与MI对照组相比,左心室舒张末压明显降低[LNEDP (21．08±8．10)mm Hg(1 mm Hg=0．133 kPa)比(30．82±9．59)mm Hg,P<0．05],左心室内压力最大上升速率明显增快[+dp／dtmax(4．29±1．27)mm Hg／ms比(3．24±0．75)mm Hg／ms,P< 0．05],最大下降速率亦显著提高[-dp／dtmax(3．71±0．79)mm Hg／ms比(3．00±0．49)mm Hg／ms, P<0．05]。免疫组化染色发现移植组梗死区周边毛细血管数显著增加(P<0．01)。结论HUCBC在未使用免疫抑制剂的条件下可成功移植到大鼠MI区,并提示能改善MI大鼠心功能,促进新生血管形成。
- 胡承恒伍贵富王小庆杨燕华何小洪杜志民
- 关键词：干细胞心肌梗塞
- 人脐血单个核细胞移植对急性心肌梗死大鼠心功能及左室重构的影响被引量：1
- 2008年
- 背景:以往心肌梗死后心肌修复实验多集中于骨髓干细胞,甚少报道涉及富含造血干细胞、间充质干细胞及内皮祖细胞的脐血干细胞,而以其作为种子细胞的可行性及安全性尚未确定。目的:探讨人脐血单个核细胞移植对急性心肌梗死大鼠心功能和左室重构的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-11/2007-09在中山大学动物试验中心完成。材料:脐血来源于足月分娩的健康产妇,由中山大学附属第一医院产科提供。Wistar雄性大鼠45只,随机分为假手术组、模型组、细胞移植组,15只/组。方法:采用羟乙基淀粉沉淀联合ficoll-paque密度梯度离心法体外分离培养人脐血单个核细胞,移植前细胞行BrdU标记。模型组、细胞移植组大鼠结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型,造模成功后,细胞移植组在梗死区周边注射脐血单个核细胞悬液,模型组注射DMEM培养基,培养4周。假手术组仅开胸并在左前降支下过线。主要观察指标:通过超声心动图评价心脏结构,以左心导管检测血流动力学改变,采用苏木精-伊红染色、Masson染色和BrdU免疫组化染色观察心肌组织病理学变化、心肌胶原含量变化及移植细胞存活情况。结果:与模型组比较,细胞移植组左室壁厚度增加,室壁活动度明显改善,左室舒张末期内径缩小,球形指数增大,左室舒张末压显著下降,左室内压最大上升/下降速率明显增快,差异均有显著性意义(P<0.05)。假手术组心肌细胞间仅见少量胶原纤维,呈条索状与心肌纤维平行排列;与模型组比较,细胞移植组心肌细胞肿胀程度及排列情况均有所改善,细胞移植组胶原容积分数明显降低(t=3.81,P=0.001)。模型组梗死区及其周边和假手术组均未检测到BrdU阳性细胞,细胞移植组胞核呈BrdU阳性的细胞散在分布于梗死区,部分阳性细胞参与到血管壁的组成。结论:在未使用免疫抑制
- 王小庆胡承恒伍贵富杨燕华何小洪杜志民刘东红
- 关键词：脐血单个核细胞心肌梗死心功能
- 人脐血单个核细胞移植在心肌梗死大鼠的促新生血管作用及其机制探讨
- 目的探讨人脐血单个核细胞(HUCBC)移植对急性心肌梗死(AMI)后血管再生的作用。方法雄性 Wistar大鼠60只随机分为心肌梗死(MI)对照组、MI+细胞移植组各30只。结扎冠状动脉左前降支制作大鼠AMI模型,以HE...
- 胡承恒杨燕华王小庆伍贵富杜志民何小洪
- 文献传递
- 降低大鼠心肌梗死模型死亡率的方法被引量：11
- 2007年
- 目的探讨降低大鼠心肌梗死模型死亡率的影响因素。方法结扎180只Wistar雄性大鼠左冠状动脉前降支制备心肌梗死模型,分析麻醉药品、气管插管方法、结扎部位的高低及术后护理等因素对大鼠死亡率的影响,并取心脏组织行HE染色、氯化四唑(tetrazolium chloride,TTC)染色确认模型成功建立。结果水合氯醛麻醉死亡率15%,戊巴比妥钠麻醉死亡率35%,差异有统计学意义(P<0.05);经口气管插管大鼠死亡率10%,经气管切开插管死亡率29.4%,差异有统计学意义(P<0.05);有术后护理大鼠死亡率5.9%,无术后护理大鼠死亡率22.2%,差异有统计学意义(P<0.01)。而结扎部位的不同对大鼠手术死亡率及手术成功率亦有明显的影响。结论本研究显示麻醉药品、气管插管方法、结扎部位的高低及术后护理等因素均对梗死模型的死亡率有影响,选择合适的麻醉药品和剂量以及气管插管方法,正确的结扎部位及适当的术后护理等可明显降低制作大鼠心肌梗死模型死亡率。
- 王小庆胡承恒伍贵富杨燕华何小洪杜志民
- 关键词：心肌梗死动物模型死亡率
