北京市优秀人才培养资助(2011A003034000032)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：何峰刘哲伟姚海兰肖宗慧黄丽颖更多>>
- 相关机构：首都儿科研究所中国航天科工集团七三一医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠外周血心肌特异性microRNAs的变化与病毒性心肌炎相关关系初探被引量：3
- 2012年
- 目的:通过识别病毒性心肌炎小鼠和正常小鼠血浆中miR-1,miR-133,miR-206表达量的差异,分析外周血中心肌特异性microRNAs的变化与病毒性心肌炎相关关系,为探索miRNAs作为病毒性心肌炎诊断的生物标志物提供可行性的研究资料。方法:在小鼠病毒性心肌炎模型的基础上,采用荧光定量PCR方法,检测病毒性心肌炎急性期小鼠组和正常小鼠组血浆中相关miRNAs含量,并进行统计学分析。再于病毒注射后1d,3d,5d,7d,9d,11d,分别处死病毒小鼠,观察血浆miRNAs的动态变化规律。同时用Elisa检测心肌肌钙蛋白的变化,对目的 miRNAs与心肌肌钙蛋白进行相关性分析。结果:急性期时三种miRNAs血浆含量显著上调。病毒注射后3d开始上升明显,并持续保持在较高水平到7d,于9d时开始下降。发病期间,血浆miRNAs含量与心肌肌钙蛋白呈现良好的正相关性。结论:小鼠外周血中心肌特异性microRNAs在病毒性心肌炎发病过程中的呈现明显上调并与病程和相应指标存在相关关系,为miRNAs作为病毒性心肌炎诊断的生物标志物提供了重要线索。
- 黄丽颖肖宗慧姚海兰何峰张庆华刘哲伟
- 关键词：病毒性心肌炎血浆MIRNAS实时定量PCR
- 干扰Itk表达抑制CVB3感染小鼠的炎症反应
- 2012年
- 目的研究在病毒性心肌炎小鼠模型上敲减Itk蛋白的表达对小鼠炎症反应的影响。方法BALB／c小鼠尾静脉注射表达Itk-shRNA的质粒后感染CVB3，第4天后观察Itk基因的抑制情况、小鼠存活率，PBMC增殖率及部分炎症性细胞因子的分泌水平。结果Itk．shRNA转染至小鼠体内后脾细胞中Itk基因的mRNA水平与空白对照组及转染shRNAnon的对照组相比，敲减率约40％（P〈0．05）。与转染shRNAnon组相比，Itk-shRNA组中Itk基因表达的抑制导致小鼠PBMC增殖活性降低约41％，小鼠的存活率提高（P〈0．05）。Itk—shRNA组血清中细胞因子水平降低。结论抑制Itk表达能有效降低小鼠PBMC的增殖，同时减少炎症相关细胞因子的分泌，提高小鼠的存活率。
- 姚海兰韩继生何峰肖宗慧刘哲伟
- 关键词：蛋白质酪氨酸激酶RNA心肌炎
- RNA干扰在柯萨奇病毒致心肌炎小鼠模型中的抗病毒研究被引量：1
- 2012年
- 为了研究慢病毒介导的shRNA(Short hairpin RNA,shRNA)在柯萨奇B组3型病毒(Coxsackievirus B3,CVB3)导致的心肌炎小鼠模型中的抗病毒作用,合成针对CVB3基因组3753～3771区域的慢病毒Lenti-sh3753,感染HeLa细胞后感染CVB3病毒,通过荧光显微镜观测shRNA的表达和病毒致细胞病变效应,并测定培养上清中的病毒滴度,将慢病毒Lenti-sh3753感染BALB/c小鼠后感染CVB3病毒,观察小鼠的存活率,心脏组织中的病毒滴度和病理变化。结果发现Lenti-sh3753能在HeLa细胞中表达shRNA,并能有效抑制细胞中病毒RNA的复制。在小鼠模型上,Lenti-sh3753能提高小鼠的存活率,降低心脏中的病毒含量,从而减轻病理反应。这些结果提示,Lenti-sh3753在细胞和动物模型中能针对性地降解CVB3病毒RNA,明显降低病毒滴度,有效控制病毒感染。
- 姚海兰何峰肖宗慧刘哲伟
- 关键词：RNAI柯萨奇B3病毒
