安徽省高校省级自然科学研究项目(2005kj048zd) 作品数:4 被引量:5 H指数:2 相关作者: 朱文元 张汝芝 薛东章 马佳 汪学龙 更多>> 相关机构: 蚌埠医学院 江苏省人民医院 蚌埠医学院第一附属医院 更多>> 发文基金: 安徽省高校省级自然科学研究项目 宝洁美尚科技研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人表皮黑素细胞培养条件的探讨 被引量:3 2006年 目的:比较培养基添加成分不同对体外培养黑素细胞生长的影响。方法:包皮取自小儿,采用分离酶和胰酶两步消化,加不同的添加成分的培养基,逐日观察黑素细胞增殖速度和树突伸展状态。结果:来自小儿包皮的黑素细胞易存活,增殖很快。胰酶和分离酶消化的标本,成纤维细胞较少,差胰酶处理去除角质形成细胞后为纯净的黑素细胞。采用添加人黑素细胞生长成分(HMGS)的254培养基,细胞增殖快,黑素细胞树突数目和分级增多。结论:小儿包皮用分离酶结合胰酶消化,以含HMGS的254培养基孵育可获得大量纯净的表皮黑素细胞。 张汝芝 朱文元 马佳关键词:黑素细胞 培养基 免疫组织化学 色素调节剂对体外培养的人表皮黑素细胞的影响 被引量:2 2009年 目的观察几种色素调节剂对体外培养的人表皮黑素细胞形态及功能的影响。方法体外培养正常表皮黑素细胞,分别加入合适浓度的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、氢醌(HQ)、烟酰胺(NAA)、α-黑素细胞刺激素(α-MSH)和维生素C磷酸酯镁(AP-Mg)干预细胞72h,测定酪氨酸酶活性和黑素生成量。用黑素体相关蛋白单克隆抗体(NKI-beteb)染色鉴定黑素细胞,观察并摄片。结果3mmol/LEGCG,0.5mmol/L HQ,6mmol/L AP-Mg与黑素细胞共同孵育72h后,其细胞酪氨酸酶活性及黑素生成受到抑制,但只有EGCG组细胞形态发生变化;50nmol/Lα-MSH干预后,细胞酪氨酸酶活性及黑素生成显著增加,形态改变较显著。lmg/mL NAA组细胞酪氨酸酶活性无改变,而黑素生成减少,细胞异形化。结论EGCG,HQ,NAA,AP-Mg和α-MSH对黑素细胞都有显著的影响,虽然作用于黑素细胞的机制有所不同,但也有一些相似的地方,其具体机理有待于进一步研究。 薛东章 张汝芝 朱文元关键词:酪氨酸酶 黑素生成 表没食子儿茶素没食子酸酯 高危型人乳头状瘤病毒在子宫颈癌组织和外周血表达的意义 2007年 目的:分别检测子宫颈癌组织和外周血标本中人乳头状瘤病毒(HPV)(16型,18型),探讨HPV感染与子宫颈癌的关联性以及在肿瘤微转移中的表达.方法:采用荧光定量PCR(FQ-PCR)和逆转录PCR(RT-PCR)技术检测24份子宫颈癌组织及其治疗前后48份外周血标本,慢性子宫颈炎组织及其外周血标本各20份.结果:24份子宫颈癌组织(Ⅰ~Ⅱb期)中HPV DNA 16型阳性率为66.7%,HPV DNA 18型阳性率为29.2%,两型均阳性的阳性率为8.3%;48份外周血标本HPV mRNA 16型阳性率为2.1%;20份慢性子宫颈炎组织HPV DNA 16型阳性率为15.0%,HPV18型为阴性,其外周血均为阴性.子宫颈癌HPV DNA 16型组与慢性子宫颈炎HPV DNA 16型组比较差异有统计学意义(P<0.005~P<0.05).结论:高危型HPV感染与子宫颈癌发生高度相关.外周血HPV检出率低,临床价值有待进一步研究. 郑宏波 汪学龙关键词:子宫颈肿瘤 人乳头状瘤病毒 荧光定量聚合酶链反应 微转移 细菌基序对黑素细胞及前列腺素E_2的影响 2008年 目的:研究细菌基序(CpG-ODN)对黑素细胞形态、黑素生成及前列腺素E2(PGE2)的影响。方法:用CpG-ODN处理体外培养的B16黑素瘤细胞和melan-α黑素细胞,分别用MTT法、多巴氧化法、NaOH裂解法和ELISA法检测B16细胞活力、酪氨酸酶活性、黑素含量以及上清中PGE2的水平,另外,观察CpG-ODN干预后melan-α细胞形态的变化。结果:干预24h后,5μg/mlCpG-ODN促进B16细胞增殖,10μg/ml对细胞增殖的影响与空白对照组无差异,而15μg/mlCpG-ODN则抑制细胞增殖。48h后,不同浓度CpG-ODN组的细胞增殖率趋于稳定,与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。10μg/mlCpG-ODN提高酪氨酸酶活性和黑素生成,作用近似于α-MSH(P>0.05)。另外,此浓度CpG-ODN作用48h后的细胞上清液中PGE2含量也有所升高,但与对照组差异无统计学意义(P>0.05),推测为检测时间滞后所致。10μg/mlCpG-ODN作用于melan-α细胞24h后,细胞树突数目增加,并有二级以致三级树突出现。结论:CpG-ODN作用于鼠黑素细胞的适宜浓度为10μg/ml,此浓度对黑素细胞的作用有时间依赖性。该实验为CpG-ODN作用于正常人黑素细胞的研究奠定了基础。 薛东章 张汝芝 江从军 朱文元关键词:黑素细胞 黑素生成 前列腺素E2