国家自然科学基金(30371619)
- 作品数:23 被引量:54H指数:5
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- 相关机构:重庆医科大学附属第二医院重庆大学四川大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省自然科学基金美国中华医学基金会项目更多>>
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- 能量可控陡脉冲治疗兔移植性肿瘤的安全性探讨被引量:7
- 2006年
- 目的:研究能量可控陡脉冲(ECSP)治疗兔移植性肿瘤的安全性。方法:建立20只新西兰大白兔VX2移植性乳腺癌模型,给予ECSP处理,比较其处理前和处理后1、7天的肝肾功能、血象和心电图(ECG)的变化。建立10只新西兰大白兔VX2移植性肝癌模型,给予ECSP处理后取其周边正常组织,行DNA片段化分析。结果:ECSP处理后动物的肝肾功能、血象和ECG与处理前比较,差异无显著性(P>0·05)。ECSP处理后对周边正常组织的DNA电泳为一完整条带,表明无DNA损伤。结论:ECSP治疗兔移植性肿瘤安全有效。
- 董晓静胡丽娜孙才新朱赟珊洪川李聪罗小东米彦
- 关键词:能量可控陡脉冲VX2肿瘤安全性
- 活体兔肝中脉冲电场分布模型的定性实验研究被引量:4
- 2005年
- 通过观察频率、脉宽固定,电压峰值递增的脉冲电场对30只新西兰大白兔正常肝脏的杀伤效应,探讨在兔正常肝组织中建立脉冲电场分布模型的可行性,为临床电化学或电转基因治疗提供重要参考。采用重复实验及自身对照,脉冲处理3d后取材HE染色,光镜下见低脉冲剂量时两电极周围呈同心圆形坏死、界限清晰;剂量增大则同心圆形坏死区亦增大,且渐变成椭圆梭形,两电极中点处肝细胞出现核固缩、碎裂、溶解样改变,最后两椭圆梭形坏死相互重叠融合成不规则坏死,处理区尚见肝细胞的空化效应及肝组织缺血现象,实验所见与理论模拟的电场分布能较好吻合。因此,兔肝组织可作为脉冲电场生物组织杀伤效应研究中电场建模的有用载体,电脉冲在有效杀伤靶区组织的同时对周边正常组织是安全的。
- 杨孝军胡丽娜李均孙才新姚陈果熊兰王士彬
- 关键词:动物实验电脉冲肝脏电穿孔技术
- 能量可控陡脉冲抑制乳腺癌细胞增殖活性的机制初探
- 2009年
- 观察能量可控陡脉冲对乳腺癌细胞增殖抑制作用以及相关基因表达的影响,探讨能量可控陡脉冲抑制肿瘤细胞增殖的可能机制。能量可控陡脉冲作用于人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,于作用后24h应用TUNEL法观察肿瘤细胞凋亡,RT-RCR方法测定处理组和对照组中Rb基因及转录调节因子E2F1基因表达的改变。陡脉冲对乳腺癌细胞的增殖有明显抑制作用,与对照组相比处理组细胞数目明显减少,TUNEL阳性细胞显著增多,处理组Rb基因mRNA表达明显升高、E2F1mRNA表达明显下降。能量可控陡脉冲具有抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡的作用,Rb基因、EF基因可能参与了能量可控陡脉冲抑制恶性肿瘤细胞增殖的过程。
- 朱赟珊胡丽娜董晓静罗小东孙才新
- 关键词:能量可控陡脉冲乳腺癌增殖
- 能量可控陡脉冲对人卵巢癌细胞细胞骨架作用的实验研究
- 2009年
- 探讨能量可控陡脉冲(Energy controllable steep pulses,ECSP)对人卵巢癌细胞SKOV3(Human ovarian cancer cells,SKOV3)细胞骨架的影响。将SKOV3分成5组,A组用假电击处理作为阴性对照组,B、C、D组用不同参数的能量可控陡脉冲处理,E组用秋水仙碱处理的SKOV3细胞作为阳性对照组。以罗丹明-鬼笔环肽直接标记微丝,以免疫荧光法标记微管,用激光共聚焦显微镜观察。制作电镜标本,用电子显微镜观察细胞骨架的超微结构。结果显示能量可控陡脉冲作用的SKOV3细胞微丝明显解聚、骨架蛋白弥散分布、细胞骨架的网络结构消失;微管解聚,伪足减少且其中的微丝明显解聚,排列紊乱,结构消失。而且这一作用与剂量呈正相关。
- 林安平胡丽娜唐瑶孙才新米彦姚陈果
- 关键词:细胞骨架卵巢癌
- 陡脉冲治疗卵巢癌中组织因子的变化
- 2008年
- 电脉冲因其微创,靶向性强,无明显禁忌而逐渐成为肿瘤治疗研究的热点。其对肿瘤治疗的有效性研究已取得一系列肯定的结果,但其治疗机制仍旧没有得到完全的研究证实。为明确陡脉冲对肿瘤的治疗机制,本实验采用能量可控陡脉冲(Energy controllable steep pulse,ECSP)治疗荷瘤裸鼠,检测既是凝血系统重要启动因子、又是肿瘤浸润和转移指标——组织因子(Tissue factor,TF)在ECSP治疗前后的变化,分析ECSP,肿瘤凝血状态及肿瘤浸润、转移之间的相互作用,浅析ECSP对肿瘤的治疗机理。实验中将裸鼠卵巢癌皮下移植瘤完全随机分为治疗组和未治疗组,ECSP对治疗组作用后,光镜从形态学观察血栓形成,免疫组织化学SP法、RT-PCR对TF进行定位和定量检测。结果显示,ECSP作用后肿瘤血栓明显形成,TF在肿瘤治疗组表达明显降低。结果表明,ECSP促血栓形成,消耗TF,改变肿瘤组织高凝状态;同时TF在卵巢癌组织表达减少,提示ECSP与卵巢癌的侵袭和转移受抑制有关。
- 李聪胡丽娜王萍玲董晓静朱赟珊姚陈果米彦
- 关键词:卵巢癌能量可控陡脉冲血栓形成
- 淋巴管与肿瘤转移被引量:5
- 2004年
- 肿瘤转移中淋巴转移是其最常见、最基本的途径,在肿瘤生长、侵袭和转移过程中,肿瘤血管和淋巴管的生成是重要的影响因素。随着对血管内皮生长因子(VEGF)家族的深入研究,逐渐发现其在肿瘤淋巴管的生成中起重要调控作用。现综述与肿瘤转移相关的淋巴管解剖特征、肿瘤淋巴管生成、转移中的分子调控机制及治疗策略等。
- 李均杨孝军胡丽娜
- 关键词:内皮淋巴管肿瘤转移内皮生长因子
- 高强度电脉冲诱导卵巢癌线粒体凋亡及其机制被引量:1
- 2008年
- 目的通过对调控线粒体凋亡信号通路上相关分子表达的检测,了解高强度电脉冲诱导卵巢癌组织凋亡可能的线粒体途径。方法人卵巢囊腺癌SKOV3细胞接种于裸鼠皮下建立肿瘤模型,待成瘤直径达1cm,将20只裸鼠用随机数字表法分为实验组和对照组,每组10只,能量可控脉冲治疗仪用于实验组卵巢癌移植瘤,免疫荧光法检测电压依赖阴离子通道(voltage dependent anion channel,VDAC)的变化,Fluo-3/AM探针标记后激光共聚焦显微镜定位细胞内外Ca2+分布及其含量,RT-PCR测定Bcl-2的mRNA水平。结果高强度电脉冲作用后,实验组卵巢癌细胞VDAC表达与对照组相比显著下降(P=0.025);Ca2+向线粒体流动,其含量比对照组明显增加(P=0.042);Bcl-2在高强度电脉冲作用后mRNA显著低于对照组(P=0.038)。结论高强度电脉冲作为一种强的外界刺激信号,作用于线粒体外膜VDAC,使凋亡信号的细胞传导和发生效应增强,从而导致卵巢癌组织凋亡。
- 李聪胡丽娜董晓静孙才新米彦
- 关键词:电脉冲卵巢癌凋亡线粒体离子通道
- 逆转录病毒介导的siRNA对宫颈癌细胞CXCR4表达的抑制及对侵袭能力的影响被引量:1
- 2008年
- 目的:观察逆转录病毒介导RNA干扰抑制宫颈癌Caski细胞CXCR4基因表达的效率。方法:人工合成CXCR4特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段,装入带有绿色荧光蛋白(GFP)的逆转录病毒载体pSOS,先转染PT67细胞包装成病毒,收获病毒上清,再将其转染Caski细胞,采用实时定量PCR和Western blotting观察CXCR4表达受抑的情况,并通过Transwells小室检测对肿瘤细胞侵袭能力的影响。结果:成功构建pSOS-CXCR4载体,并发现在24h,48h和72h,CXCR4mRNA的抑制率分别为29.9%,56.8%和62.8%,CXCR4蛋白的抑制率分别为43.6%,49.6%和62.9%。pSOS-CXCR4对Caski细胞的侵袭能力的抑制率为57.91%。结论:逆转录病毒介导RNA干扰能有效抑制宫颈癌细胞CXCR4表达并能降低癌细胞的侵润能力。
- 康楷朱元方董晓静胡丽娜
- 关键词:CXCR4逆转录病毒宫颈癌
- 低能陡脉冲致人卵巢癌SKOV-3细胞核DNA链断裂损伤的实验研究被引量:6
- 2004年
- 目的 :研究低能陡脉冲对肿瘤细胞核DNA的损伤及诱导凋亡作用 ,分析其可能的机制及对电化学治疗潜在的影响。方法 :观察频率、脉宽、电压峰值固定 ,上升时间递增的低能陡脉冲对人卵巢癌细胞SKOV 3的损伤效应 ,用彗星试验检测细胞核DNA的损伤 ,计算拖尾率及拖尾长度以评估DNA损伤的程度 ,联合DNA片段化分析检测染色体断裂情况及电镜观察超微结构的改变。结果 :细胞核DNA拖尾率及拖尾长度与外加脉冲的上升时间有一定的量 效关系 ,DNA损伤、片断化程度随外加脉冲上升时间的增加而加重 ,电镜下出现典型的凋亡样改变。结论 :低能陡脉冲对瘤细胞核DNA有确切的损伤效应 ,可诱导瘤细胞凋亡。
- 杨孝军胡丽娜李均孙才新熊兰姚陈果王士彬
- 关键词:彗星试验DNA损伤凋亡
- 能量可控陡脉冲联合H-ras干扰性RNA治疗卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的实验研究被引量:4
- 2005年
- 目的 利用陡脉冲电场的可逆性电穿孔电转基因,观察陡脉冲治疗仪联合基因治疗对肿瘤生长的影响。方 法 构建抗H- ras基因表达的小发夹状RNA重组质粒载体(pshRNA H- ras);建立卵巢癌荷瘤裸鼠模型,光、电镜观察陡脉 冲对肿瘤组织的病理学改变,荧光报告质粒观察陡脉冲电场的可逆性电穿孔;实验分为4组:对照组、陡脉冲治疗组、陡脉 冲加基因单次干扰治疗组和加基因重复干扰治疗组,记录治疗后21d各荷瘤鼠肿瘤的体积和体质量。结果 陡脉冲对肿 瘤组织有明显的破坏作用,肿瘤边缘残存有活性的癌细胞;各治疗组肿瘤体积与体质量明显低于对照组,差异具有极显著 性(P<0.01),其中,陡脉冲加基因重复干扰治疗组肿瘤体积和重量显著低于仅用陡脉冲治疗组(P<0.01)。结论 陡脉 冲是一种新型有效的治癌工具,联合基因治疗能更有效地抑制肿瘤生长。
- 王萍玲胡丽娜李聪孙才新米彦王士彬姚成果
- 关键词:能量可控陡脉冲RNAI卵巢肿瘤肿瘤