国家自然科学基金(30973568)
- 作品数：8 被引量：3H指数：1
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- 四嗪二甲酰胺诱导肺癌细胞株EBC-1凋亡的作用及其机制
- 2010年
- 目的 研究四嗪二甲酰胺（ZGDHu-1）诱导肺癌细胞株EBC-1凋亡的作用及分子机制.方法 将不同浓度的ZGDHu-1与EBC-1细胞在体外培养,采用5′-溴-2′脱氧尿苷（BrdU）-酶联免疫吸附法（ELISA）观察ZGDHu-1对EBC-1细胞的增殖抑制作用 采用Annexin V/PI双标记染色与ELISA法测定凋亡细胞核小体等技术检测ZGDHu-1诱导EBC-1细胞凋亡的作用 采用流式细胞术检测经ZGDHu-1作用后EBC-1细胞磷酸化p38MAPK和Stat3表达的变化 采用Western blot法检测Bcl-2、Bax、Fas、p53、caspase-3蛋白表达的变化.结果 ZGDHu-1能抑制EBC-1细胞增殖,并呈现作时间和剂量依赖性,作用24、48和72 h后的IC50分别为（295±25）ng/ml、（112±8）ng/ml和（23±2）ng/ml.经ZGDHu-1作用后,EBC-1细胞中的Annexin V＋/PI-细胞升高,细胞内核小体含量显著增加,二者均呈现剂量依赖性.EBC-1细胞与50、200和500 ng/ml的ZGDHu-1培养48 h后,磷酸化p38MAPK的表达率分别为67.4%、88.2%和91.1%,空白对照组为10.6% 而磷酸化Stat3的表达率分别为56.5%、43.6%和34.6%,空白对照组为89.1%.Western blot检测结果显示,随药物作用浓度的升高,Bax、Fas和p53蛋白的表达显著上调,Bcl-2的表达没有变化,caspase-3蛋白的表达则明显下调.结论 ZGDHu-1能显著抑制EBC-1细胞增殖,并诱导其凋亡.Fas介导的线粒体途径可能是ZGDHu-1诱导EBC-1细胞凋亡的通路之一,p38MAPK和Stat3激活也参与了ZGDHu-1诱导EBC-1细胞凋亡的过程.
- 周永列许武林王珍妮吕亚萍胡惟孝
- 关键词：四嗪二甲酰胺肺肿瘤增殖凋亡
- 四嗪二甲酰胺诱导肺癌细胞株EBC-1凋亡及作用机制的研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)诱导肺癌细胞株EBC-1凋亡及分子机制。方法将不同浓度的ZGDHu-1与EBC-1细胞在体外培养,用5′-溴-2′脱氧尿苷(Brdu)-ELISA法观察ZGDHu-1抑制EBC-细胞增殖作用;用Annexin-V/PI双标记和ELISA法测定凋亡细胞核小体等技术观察ZGDHu-1诱导EBC-细胞凋亡率。用流式细胞术检测经ZGDHu-1作用后EBC-1细胞P38MAPK和Stat3磷酸化表达的变化,同时用Western blot法检测bcl-2、bax、P53、Fas、Caspase-3等蛋白质的变化。结果 ZGDHu-1能抑制EBC-1细胞增殖,呈现作用时间和剂量的量效关系,24h、48h、72h后的IC50分别为(295±25)ng/ml,(112±8)ng/ml和(23±2)ng/ml。EBC-1细胞与ZGDHu-1作用后,Annexin-V+/PI-表达升高,细胞内核小体含量显著增加,二者均呈现剂量依赖性。EBC-1细胞与50ng/ml、200ng/ml、500ng/ml等浓度的ZGDHu-1培养48h后,磷酸化P38MAPK的表达率为67.4%、88.2%和91.1%,对照组为10.6%;而磷酸化Stat3表达率分别为56.5%、43.6%和34.6%,对照组为89.1%。Western blot法检测发现bax、P53和Fas蛋白的表达随药物作用浓度的升高而显著上调,bcl-2的表达没有变化,Caspase-3蛋白的表达则明显下调。结论 ZGDHu-1能显著抑制EBC-1细胞增殖,并诱导其细胞凋亡。Fas介导的线粒体的途径可能是ZG-DHu-1诱导EBC-1细胞凋亡通路之一;P38MAPK和Stat3激活也参与了ZGDHu-1诱导EBC-1细胞的凋亡。
- 周永列许武林王珍妮吕亚萍胡惟孝
- 关键词：四嗪二甲酰胺肺癌分子机制
- 四嗪二甲酰胺对Kasumi－1细胞蛋白酶体抑制作用的研究
- 2012年
- 四嗪是一类四氮杂苯化合物，一般都具有良好的生物活性。目前唯一作为药品上市的替莫唑胺（temozolomide）是一种咪唑四嗪类口服抗肿瘤药，属于不对称四嗪类化合物。四嗪二甲酰胺（ZGDHu-1）化学名称为N，N’-二（间甲苯基）-3，6-二甲基-l，4二氢-1，2，4，5-四嗪-l。
- 周永列陈利纯吕亚萍王珍妮夏骏邱莲女胡惟孝
- 关键词：四嗪二甲酰胺KASUMI-1细胞蛋白酶体生物活性抗肿瘤药
- 四嗪二甲酰胺抑制T淋巴细胞活化的实验研究
- 2010年
- 目的研究四嗪二甲酰胺（ZGDHu-1）对植物血凝素（PHA）刺激的T淋巴细胞体外活化的影响，初步探讨其免疫抑制作用。方法从健康人外周血分离淋巴细胞，经PHA刺激诱导淋巴细胞活化，ZGDHu-1单独或联合环孢霉素A（CSA）作用24h、48h，检测各组T淋巴细胞的增殖、凋亡情况。采用流式细胞仪检测CD3^＋CD69^＋、CD3^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^＋、CD8^＋CD25^＋和CD3^＋Fas^＋、CD4^＋Fas^＋、CD8^＋Fas^＋。用Annexin V／PI染色结合流式细胞术，分析淋巴细胞早期凋亡。酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞培养上清IL-2和转化生长因子-β1（TGF-β1）。结果ZGDHu-1能明显降低PHA活化的CD3^＋CD69^＋、CD3^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^＋和CD3^＋Fas^＋、CD4^＋Fas^＋、Annexin V^＋／PI^-，并降低活化T淋巴细胞的IL-2分泌及促进TGF—β1的分泌，联合CSA应用效果更明显。结论ZGDHu—1能抑制T淋巴细胞活化，降低T淋巴细胞凋亡，和CSA联合具有一定的协同效应。
- 邱莲女周永列陈秀君胡惟孝
- 关键词：环孢霉素AT细胞活化细胞凋亡流式细胞术
- 四嗪二甲酰胺体外对慢性B淋巴细胞白血病细胞增殖的影响及其机制探讨
- 2010年
- 四嗪二甲酰胺（ZGDHu-1）,其化学名称为N,N＇-二（间甲基苯）-3,6-二甲基-1,4二氢-1,2,4,5-四嗪-1,4-二甲酰胺,是胡惟孝等[J]合成的一种具有显著的抗肿瘤活性的化合物[2],初步实验结果表明ZGDHu-1是一种蛋白酶体抑制剂[3].我们通过检测ZGDHu-1作用后慢性B淋巴细胞白血病（B-CLL）细胞凋亡情况并观察其对NF-κB表达的影响,探讨ZGDHu-1对B-CLL细胞的作用机制.
- 邱莲女周永列王珍妮黄强胡惟孝
- 关键词：慢性B淋巴细胞白血病四嗪二甲酰胺细胞增殖NF-ΚB表达蛋白酶体抑制剂体外
- 四嗪二甲酰胺对白血病细胞株Kasumi-1蛋白酶体抑制作用的研究
- 目的观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)抑制白血病细胞株Kasumi-1的增殖,诱导分化和凋亡的作用,并探讨其对20S蛋白酶体β亚单位的抑制作用。方法将不同浓度的ZGDHu-1与Kasumi-1细胞在体外培养,瑞氏染色、M...
- 陈利纯周永列吕亚萍王珍妮夏骏邱莲女胡惟孝
- 关键词：四嗪二甲酰胺KASUMI-1细胞株白血病蛋白酶体
- 文献传递
- 四嗪二甲酰胺对慢性B淋巴细胞白血病CD4^+ CD25^+调节性T细胞体外作用的研究
- 2011年
- 目的研究四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)对慢性B淋巴细胞白血病(chronic B cell lymphocytic leukemia,B-CLL)CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)的影响,初步探讨其对CD4+CD25+Tregs的作用机制。方法 B-CLL外周血淋巴细胞分离培养,流式细胞术检测ZGDHu-1作用前后CD4+CD25+/highCD127low、CD19+CD5+以及CD4+CD25+Tregs细胞活力、细胞凋亡、Fas、FasL、APO2.7及Bcl-2、Bax。结果 B-CLL的CD4+CD25+/highCD127low、CD19+CD5+明显高于正常对照组,且CD4+CD25+/highCD127low与CD19+CD5+明显正相关。ZGDHu-1作用后,B-CLL的CD4+CD25+/highCD127low、CD19+CD5+明显降低,CD4+CD25+Tregs活力明显下降和凋亡明显升高;CD4+CD25-T细胞活力也有一定程度的下降,凋亡升高,但其凋亡明显低于CD4+CD25+Tregs。ZGDHu-1作用后,CD4+CD25+Tregs的APO2.7明显增加,Bcl-2明显降低,Bax没有变化,而CD4+CD25-T细胞FasL明显增加。结论 ZGDHu-1作用后B-CLL的CD4+CD25+Tregs明显下降,可能与Bcl-2/Bax比值降低,APO2.7表达增高,而促进B-CLL CD4+CD25+Tregs的凋亡有关。
- 邱莲女周永列黄强胡惟孝
- 关键词：四嗪二甲酰胺慢性B淋巴细胞白血病CD4+CD25+调节性T细胞
- 四嗪二甲酰胺抑制肺癌细胞株A549、EBC-1、MA增殖并诱导细胞凋亡的研究被引量：1
- 2010年
- 目的 观察四嗪二甲酰胺（ZGDHu-1）体外抑制肺癌细胞株A549、EBC-1、MA增殖并诱导细胞凋亡作用.方法 将不同浓度的ZGDHu-1与A549、EBC-1、MA细胞在体外培养,用锥虫蓝染色、噻唑蓝（MTT）比色法、5＇-溴-2脱氧尿苷（HrdU）-酶联免疫吸附试验（ELISA）法观察ZGDHu-1对A549、EBC-1、MA细胞增殖的抑制作用 用细胞形态学、DNA含量及细胞周期分析、Annexin-V/PI双标记、Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡.结果 ZGDHu-1能抑制A549、EBC-1、MA细胞增殖和活力,呈现作用时间和剂量的量效关系.A549、EBC-1、MA细胞经ZGDHu-1作用48 h后,其IC50分别为165、106、210μg/L 72h后的IC50分别为42、18、90μg/L.大部分细胞阻滞于G2～M期 出现典型的细胞形态改变,亚G1峰检出并显著增加,Annexin-V＋/PI-表达升高,细胞内DNA片段含量增加,Hoechst33258荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变,证实ZGDHu-1能诱导A549、EBC-1、MA细胞凋亡.结论 ZGDHu-1能抑制A549、EBC-1、MA细胞增殖,并可诱导其细胞凋亡.
- 许武林周永列王珍妮吕亚萍胡惟孝
- 关键词：四嗪二甲酰胺肺癌增殖脱噬作用
- 四嗪二甲酰胺对K562和K562/Adr的作用及其与NF-κB信号分子的关系被引量：1
- 2011年
- 目的探讨四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)对慢性粒细胞白血病细胞株K562(K562-S)和耐药细胞株K562/Adr(K562-R)的抑制作用及其对p210 BCR/Ab l融合蛋白和转录核因子κB(NF-κB)表达的影响。方法 MTT比色法观察其对K562-S细胞增殖的抑制作用,采用Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡,流式细胞仪及细胞克隆形成初步分析其对白血病干细胞的影响,通过Western印迹分析PARP-1、p210 BCR/Abl、c-Abl、NF-κB的表达。结果不同浓度的ZGDHu-1对K562-S细胞均有增殖抑制作用,呈现剂量-时间依赖关系,ZGDHu-1作用48h时的IC50值为0.25μg/ml。在ZGDHu-1作用7天后,K562-S及K562-R细胞克隆形成被完全抑制。ZGDHu-1作用48h后,出现PARP-1裂解,诱发细胞凋亡,下调K562-R细胞p210 BCR/Abl及c-Abl的表达,抑制K562-S及K562-R细胞质内NF-κB/p65的表达。结论 ZGDHu-1能够抑制K562-S及耐药细胞株K562/Adr(K562-R)细胞的增殖,促进细胞凋亡。通过抑制p210 BCR/Abl的表达,降低NF-κB的活性,阻断NF-κB信号传导通路,尤其对于耐药型白血病细胞具有广泛的应用价值。
- 张玉霞周永列徐菲邱莲女
