中国博士后科学基金(20100470893)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：姚轻舟余细勇雷和平刘居理朱杰宁更多>>
- 相关机构：广东省医学科学院南方医科大学广东省人民医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 内皮细胞微粒与糖尿病心肌病被引量：3
- 2012年
- 内皮细胞激活、损伤、凋亡时,会向细胞外释放内皮微粒,其作为反映内皮细胞功能的新型标记物,在多种病理状态时都有增加。糖尿病心肌病的病理过程中,内皮损伤、血管再生、氧化应激与炎症反应以及肾素血管紧张素系统激活等过程都与内皮微粒存在紧密联系。
- 姚轻舟雷和平余细勇
- 关键词：内皮微粒糖尿病心肌病肾素血管紧张素系统炎症反应
- 野生型和A294G突变型血管紧张素转换酶2基因真核表达质粒构建与鉴定
- 2011年
- 目的构建人野生型和突变型(A294G)血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)基因真核表达载体。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增人ACE2基因,与pcDNA3.1真核表达载体连接,构建pcDNA3.1-hACE2重组质粒,通过酶切和测序进行鉴定;以此野生型ACE2真核表达载体为模板,在pyrobest DNA高保真聚合酶的作用下利用体外定点突变法构建ACE2基因突变型重组质粒,用Dpn I限制性内切酶处理聚合酶链反应产物,直接转化DH5α感受态细胞,挑取克隆并提取相应质粒,测序加以验证。结果测序结果证实,野生型和突变型ACE2基因分别插入到pcDNA3.1+中,野生型ACE2基因序列与NCBI网站人ACE2基因全长编码序列(NCBI参考序列:NM_021804.2)相应片段一致,突变型(A294G)ACE2基因除第294位碱基A被G替代以外,其余序列与野生型一致。结论成功构建了人野生型和突变型ACE2的真核表达质粒,为下一步研究突变型ACE2的生物学功能以及ACE2在疾病发病机制中的作用奠定了基础。
- 雷和平姚轻舟刘居理林秋雄邓春玉朱杰宁余细勇
- 关键词：基因血管紧张素转换酶2点突变质粒
