国家自然科学基金(81100550) 作品数:5 被引量:20 H指数:3 相关作者: 尹士男 刘敏 荆丹清 母义明 白桦 更多>> 相关机构: 中国人民解放军总医院第一附属医院 中国人民解放军总医院 航天中心医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 解放军总医院科技创新苗圃基金 北京市科技新星计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
血管紧张素Ⅱ2型受体重组腺病毒的扩增及其在INS-1细胞中的转染 2014年 目的利用人胚肾(HEK)293A细胞株扩增含有大鼠血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)基因的重组腺病毒,并在大鼠胰岛素瘤细胞INS-1细胞株中进行转染,构建AT2R高表达的胰岛β细胞模型。方法利用293A细胞株扩增重组腺病毒Ad-G-AT2R-EGFP和对照病毒Ad-CMV-EGFP,并测定病毒滴度。在INS-1细胞中瞬时转染后利用实时PCR、Western印迹以及免疫荧光和激光共聚焦技术检测细胞中AT2R与AT1R的表达。结果扩增后得到重组腺病毒Ad-G-AT2R-EGFP和Ad-CMV-EGFP的滴度分别为9×109和8×109pfu/ml。在INS-1细胞中转染Ad-GAT2R-EGFP后,AT2R mRNA的表达随病毒感染复数(multiplicity of infection,MOI)值的增加呈剂量依赖性增加。当MOI值为10时,AT2R mRNA的表达达到峰值(P<0.05),同时AT2R蛋白的表达明显高于转染了Ad-CMV-EGFP的细胞和未转染细胞,但AT1R的表达无显著变化。结论成功扩增并得到高滴度且携带有AT2R基因的重组腺病毒载体,并将其转染入INS-1细胞中构建出AT2R高表达的胰岛β细胞模型,为下一步探讨AT2R在胰岛β细胞中的作用奠定了基础。 李晓静 刘敏 王妍 户义 尹士男 母义明关键词:腺病毒科 艾塞那肽与胰岛素治疗肥胖2型糖尿病疗效对比观察 被引量:9 2012年 目的比较艾塞那肽和胰岛素对于肥胖2型糖尿病患者在血糖控制和血糖稳定性方面的差异。方法 20例口服药降糖效果欠佳的肥胖2型糖尿病患者给予艾塞那肽治疗,年龄、性别和体重指数相匹配的20例2型糖尿病患者作为对照,应用方差分析和卡方检验比较两组临床资料和治疗期间的血糖水平和血糖波动指标,应用回归分析和协方差分析血糖波动与血糖水平的关系。结果艾塞那肽治疗组的患者平均血糖明显低于胰岛素治疗组[(5.85±0.52)mmol/L和(6.90±0.78)mmol/L],血糖达标率明显高于胰岛素治疗组。艾塞那肽和胰岛素治疗组全天血糖标准差分别为(0.70±0.15)mmol/L和(1.53±0.34)mmol/L,平均血糖波动幅度分别为(1.22±0.50)mmol/L和(3.00±1.14)mmol/L,最大血糖波动幅度分别为(2.00±0.43)mmol/L和(4.47±0.95)mmol/L,四分位血糖波动范围分别为(0.87±0.25)mmol/L和(1.82±0.50)mmol/L,M-值分别为1.22±0.84和6.98±4.12,日间血糖平均绝对差分别为(0.47±0.21)mmol/L和(1.30±0.29)mmol/L,餐后血糖波动幅度分别为(0.76±0.28)mmol/L和(0.76±0.28)mmol/L,以上指标差异均有显著性。回归分析显示血糖波动指标与餐后血糖呈正相关,以餐后血糖为协变量进行协方差分析后发现两组间平均血糖波动幅度和M-值差异无显著性。结论对于肥胖2型糖尿病患者,艾塞那肽与胰岛素相比可以更好地控制血糖和减少血糖波动,而对血糖波动性的改善主要依赖于血糖水平的下降。 刘敏 白桦 荆丹清 尹士男关键词:胰岛素 2型糖尿病 血糖波动 混合喂养法建立成年营养性肥胖大鼠模型 被引量:5 2015年 目的:尝试用混合喂养法建立一种与临床相仿的成年营养性肥胖大鼠模型。方法:55只8周龄SD大鼠随机分为对照组10只(普通饲料喂养)和实验组45只(混合喂养),喂养2周后实验组剔除肥胖抵抗大鼠。每周记录大鼠体重,喂养9周后观察两组大鼠体重、体长、Lee's指数、空腹血糖(FBG)、血脂、葡萄糖耐量水平和肝脏组织病理改变。结果:喂养第9周末,实验组大鼠和对照组大鼠体重分别为(645.6±34.8)g和(483.3±31.5)g,Lee's指数分别为(326.3±24.2)和(302.7±19.8),组间比较有显著差异(P<0.05)。实验组血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、FPG、糖负荷后30、60、120分钟血糖均明显高于对照组,差异有统计学意义。HE染色病理结果显示实验组大鼠肝脏均出现脂肪样变,而对照组未见明显变性。结论:本研究所应用的混合喂养法可以稳定成功地建立伴有葡萄糖耐量减低和高脂血症的成年营养性肥胖大鼠模型。 李晓静 刘敏 王安平 哈斯 荆丹清 尹士男 母义明关键词:营养性肥胖 SD大鼠 糖耐量异常 末梢血酮与尿酮在糖尿病酮症诊治中的临床应用价值比较 被引量:5 2016年 目的:比较末梢血酮即β-羟丁酸与尿酮在糖尿病酮症诊断和监测方面的临床价值。方法:收集2013年10月至2014年12月我院内分泌科收治的随机末梢血糖>13.9 mmol/L的糖尿病患者161例,根据尿酮是否阳性分为糖尿病酮症患者29人,非糖尿病酮症患者132人。比较患者末梢血酮、尿酮的相关性;通过受试者工作特征曲线(ROC)寻找血酮诊断糖尿病酮症的诊断切点;比较血酮和尿酮对监测治疗反应性的优缺点。结果:糖尿病患者血酮和尿酮水平呈显著正相关,血酮随尿酮增加而增加(r=0.493,P<0.001),而二者与血糖水平均无明显相关性(P=0.358,P=0.133)。以尿酮为糖尿病酮症诊断标准,ROC曲线下面积0.843(CI,0.746-0.939),末梢血酮诊断酮症的界值为0.25 mmol/L。在监测糖尿病酮症患者治疗的过程中,血酮较尿酮达峰更快,转阴更早。结论:血酮与尿酮有较好相关性,末梢血酮检测有良好的敏感性、及时性和精确性,对治疗策略有更好的指导意义,建议临床推广。 江华 刘敏 王聪 荆丹清 白桦 贾喆 尹士男关键词:糖尿病酮症 AT2R激动剂C21对肥胖大鼠胰岛β细胞功能的保护作用 被引量:1 2018年 目的观察血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)激动剂C21对高脂喂养肥胖大鼠胰岛β细胞功能的影响。方法将雄性SD大鼠分为普通饲料(正常对照)组、单纯高脂喂养组(HFD)、AT2R激动剂C21 1mg/(kg·d)治疗组(HFD+C21)、AT1R拮抗剂替米沙坦1mg/(kg·d)治疗组(HFD+TEL)、C21和替米沙坦联合治疗组(HFD+C21+TEL),口服给药4周后观察大鼠体质量、血脂、血糖、血清胰岛素水平,并通过葡萄糖耐量实验(IPGTT)和胰岛素耐量实验(IPITT)检测葡萄糖和胰岛素耐量;提取胰腺组织体外观察胰岛结构形态,应用免疫组化、免疫荧光和Western印迹技术检测AT2R、胰岛素以及胰岛素分泌相关蛋白的表达。结果高脂喂养大鼠体质量和血脂均显著高于正常对照组(P<0.05);与HFD组相比,HFD+C21组和HFD+C21+TEL组IPGTT各时点的血糖水平显著下降(P<0.05),空腹胰岛素和HOMA-β指数显著升高(P<0.05),胰岛素阳性面积/胰岛面积比、胰岛素及其分泌相关蛋白表达均显著增加(P<0.05),而IPITT中血糖值和HOMA-IR指数无明显降低;HFD+TEL组与HFD组相比仅甘油三酯水平显著下降(P<0.05),其余无明显变化。结论 AT2R激动剂可改善高脂喂养肥胖大鼠的胰岛素分泌功能。 李晓静 刘敏 刘敏 哈斯 王安平 尹士男关键词:肥胖 胰岛素分泌