浙江省自然科学基金(Y2080761)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
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- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 壳聚糖季铵盐纳米粒的制备及其应用研究进展
- 2012年
- 壳聚糖季铵盐是一种常见的壳聚糖修饰物，属水溶性壳聚糖衍生物。它是聚阳离子多聚物，具有低毒性、良好的生物降解性和生物相容性、稳定性强等优势，因而其应用范围相当广泛。此文主要就近几年壳聚糖季铵盐纳米粒的制备方法及该纳米粒在基因递送载体、疫苗佐剂、给药系统等应用领域的最新研究进展作了综述。
- 傅婷洪艳陈勇
- 关键词：壳聚糖纳米粒疫苗佐剂
- 壳聚糖季铵盐(HTCC)载HSV-2型DNA疫苗pgD诱导小鼠免疫应答的初步研究被引量：2
- 2012年
- 目的:制备了壳聚糖季铵盐-DNA疫苗(pgD)纳米粒复合物,并对其诱导BALB/c小鼠产生免疫应答的能力做了初步研究。方法:通过复凝聚法制备了HTCC-pgD纳米粒复合物并对其进行表征。60只BALB/c小鼠随机分成5组:①HTCC10对照组;②pcDNAkan空载体对照组;③重组质粒pgD组;④HTCC∶pgD=5∶1组;⑤HTCC∶pgD=10∶1组。各组小鼠后腿肌肉注射,注射剂量为100μg/(只.次),隔2周免疫1次,共免疫2次。末次免疫2周后,通过流式细胞仪检测外周血中CD4+、CD8+百分率,ELISA法检测血清中IgG抗体效价、IFN-γ、IL-4含量这4个方面来研究该纳米粒复合物对小鼠免疫反应的影响。结果:HTCC能与质粒pgD很好结合成纳米复合物,保护DNA免受核酸酶的降解。小鼠经免疫2次后,流式细胞仪检测外周血中CD4+T淋巴细胞亚群结果显示HTCC-pgD纳米粒复合物组的CD4+百分率要高于其他对照组(P<0.05)。血清ELISA检测IgG结果显示与对照组相比,HTCC-pgD纳米粒复合物可诱导小鼠机体产生较高滴度的IgG抗体。HTCC-pgD纳米粒复合物组的小鼠血清中IFN-γ水平与对照组相比有所上调,IL-4水平有下降。结论:通过复凝聚法制备的HTCC-pgD纳米粒复合物可诱导BALB/c小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫,为HSV-2型DNA疫苗研制提供科学依据。
- 傅婷洪艳陈勇何卓晶陶薇
- 关键词：壳聚糖季铵盐单纯疱疹病毒2型DNA疫苗免疫应答
- 壳聚糖季铵盐作为基因递送载体的初步研究
- 2009年
- 目的考察壳聚糖季铵盐体外基因转染活性，寻求一种新的非病毒基因载体递送系统。方法凝胶阻滞实验分析壳聚糖季铵盐包裹质粒的能力，DNase I的保护实验分析载基因纳米粒的抵抗核酸酶降解的能力，体外基因转染实验评价纳米粒的体外转染活性，用倒置荧光显微镜观察和流式细胞仪测定转染结果。通过考察转染液中有无牛血清和递送不同剂量的基因对转染效率的影响，寻求本递送系统较好的转染条件。另外，用MTT法测定壳聚糖季铵盐的细胞毒性。观察壳聚糖季铵盐和pcDNA 3．1-EGFP以何种比例结合形成的纳米粒、转染液中有无牛血清，质粒的量为多少时对人胚肾T细胞的转染效率是最高的；不同浓度的壳聚糖季铵盐对细胞生长的影响。结果壳聚糖季铵盐纳米粒能转入人胚肾T细胞，虽然转染效率略逊于聚乙烯亚胺，但是细胞毒性明显小于聚乙烯亚胺。壳聚糖季铵盐纳米粒转染细胞72h后效率较高，经综合分析，当pcDNA质量为2μG，壳聚糖季铵盐和peDNA以质量比为5结合形成的纳米粒，在无血清条件下对人胚肾T细胞进行转染，转染效率是最高的。结论壳聚糖季铵盐纳米粒能将基因递送到细胞内，并且报告基因能在细胞内表达。因此，壳聚糖季铵盐用做基因递送的载体系统值得进一步的研究。
- 钟婧何卓晶陶薇洪艳
- 关键词：壳聚糖季铵盐基因治疗基因载体
- 壳聚糖季铵盐作为基因递送载体的初步研究被引量：12
- 2009年
- 背景:非病毒载体因其安全性好而在基因治疗领域赢得了广泛的关注,各种各样的非病毒载体处在不断的研究中,壳聚糖季铵盐作为一种新的生物材料,同样也具有作为基因递送载体的潜质。目的:考察壳聚糖季铵盐体外基因转染活性,寻求一种新的非病毒基因载体递送系统。设计、时间及单位:对比观察实验,于2008-04/12在浙江省医学科学院生物工程所完成。材料:质粒pcDNA3.1-EGFP为浙江省医学科学院生物工程实验室保存。以3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵作为改性剂制备壳聚糖季铵盐,用复凝聚法制备载基因纳米粒。方法:凝胶阻滞实验分析壳聚糖季铵盐包裹质粒的能力,DNaseI的保护实验分析载基因纳米粒的抵抗核酸酶降解的能力,体外基因转染实验评价纳米粒的体外转染活性,用倒置荧光显微镜观察和流式细胞仪测定转染结果。通过考察转染液中有无牛血清和递送不同剂量的基因对转染效率的影响,寻求本递送系统较好的转染条件。另外,用MTT法测定壳聚糖季铵盐的细胞毒性。主要观察指标:壳聚糖季铵盐和pcDNA3.1-EGFP以何种比例结合形成的纳米粒、转染液中有无牛血清,质粒的量为多少时对人胚肾T细胞的转染效率是最高的;不同浓度的壳聚糖季铵盐对细胞生长的影响。结果:壳聚糖季铵盐纳米粒能转入人胚肾T细胞,虽然转染效率略逊于聚乙烯亚胺,但是细胞毒性明显小于聚乙烯亚胺。壳聚糖季铵盐纳米粒转染细胞72h后效率较高,经综合分析,当pcDNA质量为2μg,壳聚糖季铵盐和pcDNA以质量比为5结合形成的纳米粒,在无血清条件下对人胚肾T细胞进行转染,转染效率是最高的。结论:壳聚糖季铵盐纳米粒能将基因递送到细胞内,并且报告基因能在细胞内表达。因此,壳聚糖季铵盐用做基因递送的载体系统值得进一步的研究。
- 钟婧何卓晶陶薇洪艳
- 关键词：壳聚糖季铵盐基因治疗基因载体
