国家自然科学基金(31200245) 作品数:6 被引量:22 H指数:3 相关作者: 胡延萍 包蕊 李毅 王莉 李文靖 更多>> 相关机构: 中国科学院 中国科学院大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 中国科学院西部之光基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
正交设计优化黑褐苔草ISSR-PCR反应体系 被引量:6 2014年 采用正交设计对黑褐苔草(Carex atro fusca)ISSR-PCR反应的Mg^(2+)、Taq DNA聚合酶、dNTP、引物和DNA模板进行优化,以期建立最佳反应条件并筛选退火温度。结果表明:黑褐苔草20μL ISSR-PCR最佳反应体系为:1.80μmol·L^(-1)Mg^(2+)、0.60 U Taq DNA聚合酶、0.125μmol·L^(-1)dNTP、0.3μmol·L^(-1)Primer和50 ng DNA模板;引物UBC807适宜退火温度为55℃。该体系能在不同个体中扩增出清晰的、稳定性好的条带。 胡延萍 王莉 包蕊 石琳 旭荣花 李毅关键词:ISSR-PCR 正交设计 一种简便制作小型鱼类形态标本的方法 被引量:1 2013年 本文介绍一种简便制作小型鱼类形态标本的方法。包括以下步骤:1.制作前准备;2.剥离皮肤;3.支撑架制作与放置;4.缝合;5.配制填充材料;6.填充;7.装义眼与整理姿态;8.干燥,上色,生境制作与固定。与其他制作小型鱼类形态标本的方法相比,新方法中先缝合再填充的步骤,难度小,容易控制填充物的量,做出的标本形态更逼真。 陈晓澄 胡延萍 李文靖关键词:鱼类 西藏嵩草ISSR-PCR反应体系优化研究 被引量:3 2016年 西藏嵩草(Kobresia tibetica)为莎草科嵩草属多年生草本,根状茎短,秆密集丛生。生于海拔2 550~4 950 m的河滩地、湿润草地、高山灌丛草甸,分布于甘肃、青海、四川西部、西藏东部,其根系发达,喜湿,耐寒,生活力强。西藏嵩草繁殖以营养繁殖为主、有性繁殖为辅,其茎叶茂盛,有较高的营养价值,产草量高,是青藏高原夏、秋两季的主要放牧饲草。该研究以青藏高原高寒沼泽化草甸的建群种和优势种——西藏嵩草为材料,对影响其ISSR-PCR反应的因素(Mg^(2+)、Taq DNA聚合酶、dNTP、引物和模板DNA)进行5因素4水平的正交试验,以确定西藏嵩草ISSR分析的最佳反应体系,并筛选适宜的ISSR引物及各引物的最佳退火温度。结果表明:建立了适宜于西藏嵩草ISSR-PCR反应的最佳体系为20μL反应液中包括10×PCR buffer 2μL、1.5mmol·L^(-1)Mg^(2+)、1.0 U Taq DNA聚合酶、0.100 mmol·L^(-1)dNTP、0.3μmol·L^(-1)引物和30~40 ng DNA模板;同时从100条ISSR引物中筛选出了扩增结果清晰、稳定的12条引物,各引物的最佳退火温度为48.0~53.2℃(引物不同,其最佳退火温度也不同);西藏嵩草ISSR-PCR适宜的扩增程序为首先预变性94℃ 5min,然后变性94℃ 20s、复性48.0~53.2℃ 1min、延伸72℃ 80s、38个循环,最后72℃延伸6min。体系稳定性验证结果表明,该体系在西藏嵩草其他样品中所得条带清晰且多态性丰富,为后续西藏嵩草的遗传多样性分析和优良牧草种质资源筛选研究奠定了基础。该研究结果对以西藏嵩草为优势种的高寒沼泽化草甸研究及湿地生态系统的修复和保护具有重要意义。 胡延萍 包蕊 王莉 石琳 李毅关键词:莎草科 ISSR-PCR 正交设计 大中型鸟类标本修复翻新方法探索 被引量:1 2013年 本文报道一种修复与翻新大中型鸟类标本的方法,包括以下步骤:1.拆标本;2.皮张回软、清洗;3.皮张修复缝合;4.涂抹防腐剂;5.支撑架制作与固定;6.填充与缝合;7.整形与标本固定。皮张回软时,利用药液浸泡可使皮张保持弹性,保证翻新后皮张仍保持完好形态。珍珠棉水果网作为填充物,既环保又可免招虫蛀,亦能使做出的标本形态更加逼真。 陈晓澄 胡延萍 李文靖关键词:鸟类标本 环保 华扁穗草ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选 被引量:13 2014年 利用正交试验设计方法,对影响华扁穗草ISSR-PCR反应中Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTP、引物和DNA模板等5个因素进行优化筛选,以期建立最佳反应条件。同时,筛选扩增条带清晰稳定的ISSR引物,经退火温度试验得到各个引物的最佳退火温度。结果表明:华扁穗草20μl ISSR-PCR最佳反应体系包括1.80 mmol/L Mg2+、0.80U Taq DNA聚合酶、0.100mmol/L dNTP、0.6μmol/L引物和20ng DNA模板;筛选出扩增条带清晰稳定的10条引物。体系验证和引物筛选试验表明,其在华扁穗草不同个体中能够扩增出条带清晰、稳定性好的条带,可用于后续华扁穗草遗传多样性分析,为华扁穗草野生资源保护和优良牧草种质资源选育提供理论依据。 包蕊 胡延萍 王莉 旭荣花 李毅关键词:ISSR-PCR 正交试验设计 引物筛选 青海省黑斑侧褶蛙记录被证实 被引量:1 2015年 2014年5月25日,在青海省西宁市海湖湿地公园用采集了7只蛙类标本,经形态学特征比较,鉴定为黑斑侧褶蛙(Pelophylax nigromaculatus),自Mocquard首次报道百余年之后,采到标本,证实了青海省确有该蛙分布。本文对其特征和分布进行了讨论。 张贺 付海波 李文靖关键词:黑斑侧褶蛙