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国家自然科学基金(81041017)
作品数:
2
被引量:3
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相关作者:
展玉涛
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肖凡
李学永
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展玉涛
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2篇
2011
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二甲双胍治疗非酒精性脂肪性肝病的研究进展
被引量:2
2011年
随着经济的发展和人们生活水平的提高,非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病率有逐渐升高趋势。过去认为NAFLD系良性疾病,但近年来研究表明,NAFLD对人们的健康有一定危害。资料显示,NAFLD患者病死率显著高于普通人群,患者易患心血管疾病和恶性肿瘤,少数可发展为肝硬化引起肝病相关死亡,NAFLD可促进2型糖尿病患者慢性肾病的发生。因此,应重视对NAFLD的治疗。
展玉涛
关键词:
非酒精性脂肪性肝病
二甲双胍
糖基因Glt8d2重组蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备
被引量:1
2011年
目的构建新糖基转移酶基因Glt8d2的原核表达载体,诱导融合蛋白的表达,并对其进行纯化;制备兔抗GltSd2蛋白多克隆抗体并进行鉴定。方法应用RT—PCR技术,以HepG2细胞mRNA为模板,扩增Glt8d2目的基因片段,构建原核表达载体pET-32a(+)-Glt8d2。转化大肠埃希菌B121,异丙基-D-半乳糖苷诱导并通过SDS—PAGE凝胶电泳分析、Western印迹分析、生物质谱分析证实Gh8d2重组蛋白表达正确。大量表达后利用Ni’亲和柱对表达蛋白进行纯化及柱上复性。纯化蛋白免疫新西兰大白兔,获得抗Gh8d2蛋白的多克隆抗体。以纯化的Glt8d2重组蛋白为抗原,分别以免疫前后的新西兰兔血清作为第一抗体,利用Western印迹和酶联免疫吸附法对多克隆抗体进行特异性分析及效价检测。结果扩增获得Glt8d2基因片段,成功表达了Gh8d2重组蛋白,经SDS—PAGE凝胶电泳和Western印迹分析得到证实。成功获得重组蛋白及兔抗Gh8d2多克隆抗体。ELISA检测证实多克隆抗体效价〉1:320000。免疫组织化学分析显示,该基因编码的糖基转移酶在肝实质细胞内呈胞质模式表达分布。结论利用大肠埃希菌B121能够成功表达Gh8d2重组蛋白,获得高特异性、高效价兔抗Glt8d2重组蛋白的多克隆抗体,为今后研究Glt8d2基因的生物学功能研究奠定了基础。
魏洪莲
张锦前
肖凡
李学永
成军
魏红山
展玉涛
关键词:
糖基转移酶
脂肪肝
载脂蛋白
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