甘肃省自然科学基金(2007GS04449)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：蒋守田潘丽张永光吕建亮刘力宽更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 口蹄疫病毒泛亚型O／CHINA／99株全长cDNA分子克隆构建和感染性鉴定
- 2009年
- 设计并合成了O型口蹄疫泛亚型代表毒株O/CHINA/99基因组9条引物,利用RT-PCR扩增各基因片段,酶切后连到pOK-12载体上,经酶切、PCR和序列测定表明,O/CHINA/99全基因组由8 200个核苷酸组成,构建的感染性cDNA与原毒株的序列同源性为99.1%;利用T7 RNA聚合酶系统进行体外转录,转录产物RNA用脂质体转入BHK-21细胞传代培养,可观察到典型的FMDV致细胞病变效应;拯救病毒接种2日龄乳鼠后,可出现典型的临床症状,并于16～48h内死亡。以上结果表明,O/CHINA/99株全长cDNA分子克隆构建成功,并从构建的全长cDNA拯救出了口蹄疫病毒。
- 吕建亮张永光王永录潘丽刘力宽方玉珍蒋守田张维德
- 关键词：口蹄疫病毒全长CDNA反向遗传学
- 泛亚型口蹄疫病毒O/China/99缺失毒株全长cDNA分子克隆的构建
- 2008年
- 设计并合成了4条O型口蹄疫病毒(FMDV)泛亚型代表毒株O/China/99基因组的引物,利用RT-PCR扩增各基因片段,酶切后连接到pOK12载体上,然后人工合成一段缺失PKs的5′UTR序列,利用两端的限制性内切酶位点,将该基因片段插入到上述载体中。酶切、PCR和序列测定结果显示,O/China/99株全基因组由8 200个核苷酸组成,构建的感染性cDNA与原毒株的核苷酸序列同源性为99.1%。结果表明,O/China/99缺失毒株全长cDNA分子克隆的构建成功。
- 吕建亮张永光王永录潘丽刘力宽方玉珍蒋守田张维德
- 关键词：口蹄疫病毒全长CDNA反向遗传学PKS
