博士科研启动基金(2008F329)
- 作品数：3 被引量：21H指数：3
- 相关作者：秦安东李颖徐林罗军敏任涛更多>>
- 相关机构：遵义医学院同济大学附属东方医院遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：贵州省优秀科技教育人才省长资金项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miRNA-7真核表达载体的构建与鉴定被引量：6
- 2013年
- 目的构建miR-7真核表达载体并观察其对人肺癌细胞体外生长的影响。方法以人肺癌细胞系95D细胞基因组DNA为模板,PCR法扩增miR-7前体序列,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后将其亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),并进行酶切及测序鉴定;将构建成功的pcDNA3.1(-)-pri-miR-7载体(命名为p-miR-7)体外瞬时转染95D细胞,应用Real-time PCR特异探针法检测miR-7成熟体的表达水平,并利用MTT法检测细胞生长的改变。结果酶切和测序验证成功构建了miR-7真核表达载体p-miR-7;表达载体p-miR-7瞬时转染95D细胞后可有效表达miRNA-7成熟体,并显著抑制95D细胞的体外生长(P<0.05)。结论成功构建了miR-7的真核表达载体,为后续深入研究miR-7在肺癌发生中的作用及机制提供了前期实验基础。
- 宋永祥李颖秦安东廖珍媛李永菊罗军敏任涛徐林
- 关键词：真核表达肺癌MTT法
- miRNA-7在小鼠不同组织器官中表达的检测及其意义被引量：11
- 2012年
- 目的采用Real-time PCR方法来检测miRNA-7在小鼠12种不同组织器官中的表达情况并探讨其意义。方法首先分别提取小鼠12种组织器官总RNA,用miRNA-7特异性引物逆转录为cDNA,采用Real-timePCR探针法检测miRNA-7在12种组织器官中的表达水平。结果成功应用Real-time PCR方法检测miRNA-7在小鼠12种组织器官中的表达水平,结果显示,miRNA-7在肺组织中的表达水平最高,而在淋巴结中的表达水平最低。此外,在小肠、脑、胸腺、脾脏中也存在miRNA-7的高表达。结论 miRNA-7在小鼠的肺、小肠、脑、胸腺、脾脏中呈较高水平的表达,提示该分子可能在上述器官的发育、分化、功能维持及相关疾病发生中具有重要作用,为后续深入研究miRNA-7的生物学功能提供了前期试验依据。
- 郑静李颖秦安东秦娜琳罗军敏徐林
- 关键词：MIRNAS小鼠
- microRNA-7对人肺癌95D细胞体外侵袭的作用被引量：14
- 2011年
- 目的探讨微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)对人肺癌95D细胞体外侵袭的作用。方法采用体外转染法将miR-7瞬时转染95D细胞后,应用Real-timePCR特异探针法检测95D细胞中miR-7的表达情况,应用划痕法检测95D细胞的迁移情况,Invasion实验检测95D细胞侵袭能力的变化;用Western印迹法检测95D细胞中胰岛素样生长因子1受体(Insulin growth factor 1 receptor,IGF1R)表达及下游信号的变化。结果与对照组相比,miR-7转染组95D细胞体外侵袭能力明显削弱(<0.05),而IGF1R表达则显著下调,其信号途径分子Akt的磷酸化水平也明显降低。结论 miR-7可以抑制人肺癌95D细胞的体外侵袭,可能作为后续肺癌生物治疗的新靶点。
- 徐林任涛秦安东周涯罗军敏姚新生李颖
- 关键词：肺癌MIRNAS体外侵袭胰岛素样生长因子1受体生物治疗
