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豚鼠糖尿病性膀胱病逼尿肌中c-kit mRNA和蛋白的表达变化及意义被引量：9: 2010年; 目的:检测豚鼠糖尿病性膀胱病(DCP)逼尿肌中酪氨酸蛋白激酶生长因子受体(c-kit)mRNA和蛋白的表达水平,探讨c-kit表达与DCP的关系及其发病机制。方法:60只豚鼠随机分成对照组20只,实验组40只,实验组采用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病豚鼠模型,2组豚鼠饲养10周后运用尿动力学检测并将实验组筛选出DCP组和糖尿病性非膀胱病(NDCP)组,应用RT-PCR、激光共聚焦显微镜技术分别检测各组膀胱组织c-kit mRNA和蛋白的表达。结果:DCP组c-kit mRNA表达显著低于对照组(P<0.01)及NDCP组(P<0.05),相对平均吸光度值分别为4.65±0.47、5.66±0.54、5.54±1.28。糖尿病性膀胱病组c-kit蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)与NDCP组(P<0.01),c-kit蛋白荧光值分别为548.69±48.51、844.67±59.24、856.52±53.03。结论:豚鼠DCP逼尿肌中c-kit mRNA、c-kit蛋白表达减少,导致c-kit信号通路异常,从而使Cajal样细胞在膀胱中的功能减弱而导致逼尿肌功能障碍发生DCP,因此c-kit表达异常可能是DCP的发病机制之一。; 李云飞丁国富蔡志强范勇洪王勤章; 关键词：CAJAL细胞糖尿病膀胱病 C-KIT

糖尿病豚鼠膀胱Cajal样间质细胞形态学变化及意义被引量：14: 2009年; 目的观察糖尿病豚鼠膀胱Cajal样间质细胞形态学变化,探讨糖尿病膀胱功能改变原因。方法用链脲佐菌素单次注射建立豚鼠糖尿病模型,建模成功4周后,行尿动力学检查,采用组织冷冻切片、酪氨酸蛋白激酶受体单克隆抗体间接免疫荧光检测及透射电镜技术观察膀胱中Cajal样间质细胞变化。结果与对照组相比,糖尿病豚鼠膀胱最大逼尿肌压显著降低,最大膀胱容量及膀胱顺应性显著明显增高。免疫荧光检测显示逼尿肌中KIT阳性细胞与逼尿肌组织面积百分比均明显小于对照组。电镜下可见Cajal样间质细胞内细胞器变性、减少,胞质广泛溶解,核周间隙增宽,与其他细胞间的缝隙连接显著减少、结构破坏、连接松散。结论糖尿病豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的数量减少和结构破坏可能是造成膀胱功能障碍的重要原因之一。; 王勤章纪世琪朱国栋李云飞蔡志强李应龙王江平丁国富; 关键词：糖尿病膀胱 CAJAL样间质细胞尿动力学

豚鼠膀胱组织内Cajal样间质细胞及NOS表达阳性神经元的分布被引量：4: 2009年; 目的探讨Cajal样间质细胞和一氧化氮合酶2(NOS2)表达阳性神经元在成年豚鼠膀胱组织内的分布。方法成年豚鼠膀胱冰冻切片,c-Kit免疫荧光和n-NOS2免疫荧光染色。结果膀胱肌层内可见c-Kit表达阳性细胞的存在,n-NOS2免疫荧光染色显示其阳性神经元广泛分布于膀胱组织内。c-Kit免疫荧光和n-NOS2免疫荧光双重染色虽未发现两者的共存,但可见c-Kit表达阳性细胞存在于NOS表达阳性神经元的附近。结论豚鼠膀胱的Cajal样间质细胞可能参与膀胱自主节律性运动的调控,提示二者可能共同参与膀胱自主节律性运动的调控,为"神经-Cajal样间质细胞-肌肉"作用单元的形成提供结构基础。; 纪世琪王勤章丁国富; 关键词：CAJAL样间质细胞一氧化氮合酶膀胱

高糖环境对豚鼠膀胱ICCs细胞超微结构的影响被引量：4: 2009年; 目的:观察高糖环境下豚鼠膀胱Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)超微结构,探讨糖尿病膀胱(diabetic cystopathy,DCP)的发病机制。方法:采用酶消化法原代培养,透射电镜观察5、10、15mol/L葡萄糖浓度下培养24、72h的ICCs超微结构。结果:随糖浓度增高培养时间延长,ICCs内细胞器明显减少,线粒体大小不等,数量减少,肿胀、空泡样改变甚至溶解,内质网扩张、空泡样变,胞质广泛溶解,突起消失。结论:高糖环境对豚鼠膀胱ICCs超微结构造成显著影响,这种结构破坏可能是造成DCP发病的重要原因之一。; 范勇洪丁国富王勤章李云飞蔡志强; 关键词：CAJAL间质细胞高糖环境超微结构糖尿病膀胱

早期糖尿病膀胱尿动力学及cajal样细胞的变化和意义被引量：7: 2009年; 目的:观察早期糖尿病在膀胱尿动力学和cajal样细胞上的病理学改变,探讨其发生机制及病理演绎过程。方法:建立早期糖尿病豚鼠模型40只(病变组),以正常豚鼠20只作对照(对照组),饲养10周后行膀胱最大收缩压、漏尿点压等尿动力学指标测定。然后将两组豚鼠膀胱制作成冷冻切片行免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜观察。结果:10周后,与对照组比较,病变组膀胱最大容量(P<0.05)、漏尿点压(P<0.01)、顺应性(P<0.05)、剩余尿量(P<0.01)增加,而膀胱静息压(P<0.01)、最大逼尿肌压(P<0.05)下降,激光共聚焦显微镜下见糖尿病组膀胱逼尿肌中cajal样细胞数量减少(P<0.01),cajal样细胞二聚体消失(P<0.01)。结论:糖尿病膀胱病变豚鼠早期有尿动力学异常,cajal样细胞数量减少并伴有该细胞二聚体结构消失,提示早期糖尿病膀胱病变是高糖环境下发生了具有起博功能的cajal样间质细胞异常,从而使逼尿肌功能障碍及尿动力学发生改变;而真正起逼尿功能的平滑肌细胞失去该细胞起博而处于一种待激发的"休眠状态"。因此,临床上应针对这种情况进行干预,以控制病情的进一步恶化。; 李云飞王勤章丁国富; 关键词：糖尿病膀胱病变 CAJAL样间质细胞激光共聚焦显微镜尿动力学

体外Cajal样细胞c-kit基因mRNA在高糖环境下表达变化及意义被引量：8: 2010年; 目的:观察体外高糖环境下Cajal样细胞(interstitial cells of Cajal-like,ICCs)c-kit mRNA表达变化。方法:胶原酶消化法原代分离培养豚鼠膀胱ICCs,加入含葡萄糖浓度分别为5mmol/L、15mmol/L、30mmol/L培养基培养24h、48h、72h后,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测高糖环境下c-kit基因mRNA表达水平的变化。结果:RT-PCR电泳经分析显示15mmol/L、30mmol/L组ICCs c-kit mRNA表达较5mmol/L组降低(P<0.01),72h组较24h组、48h组表达降低。结论:高糖环境造成ICCs c-kit基因mRNA表达水平降低,可导致ICCs的SCF/c-kit信号通路异常,ICCs功能及结构障碍,可能是糖尿病膀胱病变的发病机制之一。; 蔡志强丁国富李云飞范勇洪王勤章; 关键词：C-KIT基因高糖

不稳定膀胱逼尿肌中Cajal样间质细胞的分布被引量：5: 2010年; 目的:了解Cajal(ICCs)样间质细胞在不稳定膀胱逼尿肌中的分布,探讨其与逼尿肌不稳定(DI)发病机制的相关性。方法:建立豚鼠膀胱出口梗阻模型,行充盈性膀胱测压确定DI组14只,另设对照组10只,采用组织冰冻切片、酪氨酸蛋白激酶受体(KIT)单克隆抗体间接免疫荧光检测技术观察逼尿肌中ICCs样细胞的分布情况。结果:KIT阳性细胞走向与逼尿肌肌束平行,主要分布于逼尿肌肌束边缘和逼尿肌肌束中,呈梭形双极细胞。与对照组比较,DI组KIT阳性细胞数量明显增多(P<0.01)。结论:膀胱ICCs样间质细胞增多引起逼尿肌自发收缩活动增加可能是DI发病的重要因素之一。; 李应龙丁国富王勤章李令勋倪钊王新敏; 关键词：荧光抗体技术

SCF对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞超微结构的影响: 2011年; 目的探讨干细胞因子(SCF)对高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(ICCs-like)超微结构的影响。方法胶原酶消化法原代分离培养豚鼠膀胱ICCs样细胞。实验分组:正常对照组(葡萄糖浓度为5 mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度为15 mmol/L),培养基培养72 h后高糖组分为高糖对照组、SCF 50 ng/ml组、SCF 100 ng/ml组,继续培养24 h及72 h。透射电镜观察各组不同时间段ICCs样细胞超微结构。结果随着培养时间延长,正常对照组ICCs样细胞内超微结构无明显变化;高糖对照组ICCs样细胞内细胞器明显减少,线粒体肿胀、大小不等、空泡样变甚至溶解;内质网扩张,胞质广泛溶解,胞周突起变短乃至消失;而SCF组ICCs样细胞超微结构得到逐步改善,细胞器增多、形态趋于正常对照组,胞周突起增多。结论外源性SCF干预后对高糖环境造成的ICCs样细胞超微结构破坏有一定的修复或逆转作用。; 刘新军王勤章丁国富刘永国周建民李应龙王江平钱彪; 关键词：CAJAL样间质细胞干细胞因子糖尿病膀胱超微结构

豚鼠膀胱Cajal样细胞在高糖环境中的形态学变化被引量：3: 2009年; 目的:观察高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样细胞形态学变化。方法:应用酶解法分离培养豚鼠膀胱Cajal样细胞,分为无糖组、正常对照组(葡萄糖浓度5mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度分别为15、30、60mmol/L),通过光学倒置显微镜及c-kit抗体染色后激光扫描共聚焦显微镜观察细胞形态。结果:葡萄糖浓度分别为30、60mmol/L组较无糖组、正常对照组(5mmol/L)及15mmol/L组细胞数量减少,差异有统计学意义(P<0.05),蛋白标记后显示蛋白染色部位减少,有核着色迹象。结论:高糖环境可导致Cajal样细胞的形态异常,数量减少,可能引起其功能学的改变,提示其可能是糖尿病膀胱病变的的影响因素。; 蔡志强王勤章丁国富李云飞范勇洪; 关键词：高糖环境糖尿病

Cajal样间质细胞在豚鼠膀胱肌层的分布及意义: 2009年; 目的研究豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的分布、超微结构特点并探讨其功能。方法选择健康豚鼠10只,利用激光共聚焦显微镜和透射电镜观察膀胱Cajal样间质细胞在肌层的分布和结构特点。结果豚鼠膀胱肌层Cajal样间质细胞形成网状和平行状两种不同的分布。超微结构核大、具有丰富的细胞器。结论膀胱Cajal样间质细胞分布和超微结构与胃肠道的ICCs相似,具有起搏细胞特征。; 朱国栋王勤章纪世琪丁国富; 关键词：CAJAL样间质细胞膀胱

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