国家自然科学基金(81102810) 作品数:18 被引量:132 H指数:10 相关作者: 高慧 吴莹 张爽 王晓婷 高雁 更多>> 相关机构: 辽宁中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省自然科学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
盐炙对知母中新芒果苷体内药代动力学的影响 被引量:6 2016年 目的:建立测定大鼠血浆中新芒果苷HPLC方法,探究盐炙对知母中新芒果苷药代动力学的影响。方法:色谱柱:Ecosil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:水-乙腈(15:85);流速:1 m L/min;检测波长:258 nm;柱温:30℃。结果:新芒果苷在生品和盐炙品组大鼠体内药代动力学参数分别为:AUC_(0-t)为(43.913±0.636)、(71.565±1.950)mg/L*h;AUC_(0-∞)为(44.127±0.673)、(71.805±1.926)mg/L*h;C_(max)为(4.539±0.048)、(5.805±0.119)mg/L;MRT_(0-t)为(8.124±0.246)、(8.650±0.398)h;MRT_(0-∞)为(8.290±0.321)、(8.761±0.435)h;t_(1/2)为(4.315±0.472)、(3.989±0.301)h。结论:知母盐炙后促进新芒果苷的吸收,并在一定程度上增加了生物利用度。 吴莹 张爽 高慧关键词:盐炙 知母 药代动力学 知母盐炙前后体外降血糖作用的研究 被引量:13 2016年 目的利用Caco-2细胞模型比较知母盐炙前后的降血糖作用,并考察其作用机制,为盐知母炮制原理的阐明提供依据。方法建立Caco-2单层细胞模型,采用CCK-8细胞活力试剂盒检测5 000、2 500、500、250、50、25、5、2.5、0.5、0.25μg/m L生、盐知母水煎液细胞毒性,来确定药物最大毒性剂量。以蔗糖酶和麦芽糖酶底物,葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖质量浓度,计算抑制率,比较其对Caco-2单层细胞上蔗糖酶和麦芽糖酶活力的影响。葡萄糖吸收实验测定剩余葡萄糖的质量浓度,比较生、盐知母对Caco-2细胞吸收和转运葡萄糖的影响。结果当生、盐知母质量浓度≤250μg/m L时,Caco-2细胞可进行细胞实验。实验选取了50、250μg/m L两个质量浓度。生、盐知母水煎液50、250μg/m L对蔗糖酶、麦芽糖酶活性均有抑制作用,且盐知母水煎液对蔗糖酶、麦芽糖酶的抑制作用均优于生知母。生、盐知母水煎液均有降低细胞对葡萄糖吸收的趋势,且呈现剂量相关性,但效果不显著。盐知母水煎液对葡萄糖吸收的抑制作用略好于生知母(P<0.05)。结论盐知母对Caco-2细胞的降糖作用优于生知母,其降糖机制可能主要体现在α-葡萄糖苷酶上,而对葡萄糖吸收作用影响较小。 张爽 高雁 王晓婷 孙冬月 高慧关键词:CACO-2细胞 蔗糖酶 麦芽糖酶 葡萄糖吸收 盐知母增量成分降糖活性及药代动力学研究 目的:知母是百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides Bge.的干燥根茎,具有清热泻火、滋阴润燥的功效。用于内热消渴,外感热病,肺热燥咳,骨蒸潮热,高热烦渴,肠燥便秘等症。课题组前期研究发现知母盐... 王晓婷关键词:知母 盐制 降糖活性 药代动力学 文献传递 知母盐制前后降血糖作用及其机制 被引量:32 2014年 目的:比较知母盐制前后降血糖作用,并探讨其作用机制。方法:采用HPLC法,以对-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,分析水解产物中对-硝基酚(PNP)的浓度,比较生知母和盐知母对α-葡萄糖苷酶的抑制作用;采用STZ诱导2型糖尿病大鼠模型,以阿卡波糖为阳性对照,比较生知母、盐知母水煎液对糖尿病大鼠空腹血糖(FBG)水平的影响,进行口服葡萄糖耐量试验,并采用ELISA法检测糖化血红蛋白(HbA1c)和血清胰岛素(FINS)水平,并计算胰岛素抵抗(Homa-IR)指数和胰岛素敏感(ISI)指数。结果:生知母和盐知母水煎液对α-葡萄糖苷酶有较强的抑制作用,呈浓度正相关,且盐知母优于生知母;各给药组均能明显降低FBG、HbA1c、FINS、Homa-IR,升高ISI,改善糖耐量。其中除对ISI作用外,盐知母均优于生知母,且盐知母对FINS的作用强于阳性对照药阿卡波糖。结论:生知母、盐知母均能抑制α-葡萄糖苷酶活性,对2型糖尿病大鼠糖代谢有改善治疗作用,盐制后作用显著增强。 吴莹 宋泽璧 高慧 刘腾飞关键词:知母 Α-葡萄糖苷酶 2型糖尿病 HPLC法测定盐炙前后知母中新芒果苷、芒果苷和异芒果苷 被引量:12 2015年 目的建立HPLC法同时测定盐炙前后知母中新芒果苷、芒果苷、异芒果苷,并比较盐炙前后3种成分的差异。方法采用HPLC法,Ecosil色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈–0.2%冰醋酸,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长258 nm,柱温室温,进样量10μL。结果新芒果苷、芒果苷、异芒果苷分别在0.860 0~17.200 0μg、0.806 5~16.130 0μg、0.039 0~0.780 0μg与峰面积的线性关系良好;平均回收率分别为98.32%、98.30%、97.27%,RSD值分别为0.87%、0.74%、0.71%(n=6)。知母盐炙后新芒果苷、异芒果苷的量减少,而芒果苷的量增加。结论该方法准确、专属性强、灵敏度高,可用于知母中新芒果苷、芒果苷、异芒果苷的质量控制方法。新芒果苷、芒果苷之间可能在炮制过程中发生了转化,可为进一步研究盐知母炮制机制提供参考。 宋泽璧 吴莹 高慧关键词:知母 盐炙 芒果苷 高效液相色谱 知母盐制后增量成分对HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响 被引量:11 2018年 目的:通过探讨知母盐制后增量成分知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ、芒果苷对HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响,进一步验证知母盐炙后降糖作用增强的炮制原理。方法:将HepG-2细胞分为空白对照组、知母皂苷AⅢ组、知母皂苷BⅢ组、芒果苷组、二甲双胍组,在5%CO_2培养箱中培养24 h,饥饿12 h,再加入不同浓度相应的含药或不含药血清培养基,采用葡萄糖试剂盒检测培养液中的葡萄糖含量,葡萄糖消耗实验之后,加入cck-8试剂培养2 h,用酶标仪测定吸光度(OD);采用胰岛素诱导建立胰岛素抵抗HepG-2细胞模型,同上法比较知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ以及芒果苷对胰岛素抵抗HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响。结果:知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ、芒果苷对正常组和胰岛素抵抗HepG-2细胞的葡萄糖消耗量和细胞增殖均有显著增加(P<0.05)。结论:知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ、芒果苷均具有降糖活性,尤其对胰岛素抵抗的HpeG-2细胞作用明显,是盐知母降糖作用的物质基础。 王晓婷 闫丽 孙冬月 王馨雅 高慧关键词:HEPG-2细胞 知母皂苷 芒果苷 葡萄糖消耗 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS探究知母皂苷类成分质谱裂解规律 被引量:6 2022年 目的:总结知母中皂苷类成分的质谱裂解途径,探讨不同结构亚型的皂苷类成分的裂解规律。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS),Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱,以0.01%甲酸水-乙腈作为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源,在负离子模式进行扫描,解析知母总皂苷成分的质谱信息,总结该类成分的质谱裂解规律。根据保留时间、精确分子量及二级质谱碎片离子等相关信息,结合质谱裂解规律,对知母皂苷类成分进行快速识别。结果:在知母中共鉴识出15个皂苷成分及3个皂苷元成分,在多级质谱中,15个皂苷化合物在负离子模式下均可产生[M-H]^(-)、[M-H-C_(6)H_(12)O_(5)]^(-);发现皂苷化合物的母核具有相似的裂解途径,在负离子模式下主要特征碎片离子为m/z 302.26、274.23、256.22。结论:本研究确立了知母中皂苷类化合物的主要裂解规律,为该类化合物的快速检测提供了方法。 王晓婷 于颖琦 高慧关键词:知母 皂苷 皂苷元 裂解规律 知母盐制前后化学成分含量及改善2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗作用的差异分析 被引量:23 2020年 目的:通过比较知母盐制前后化学成分的含量变化,以及对2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素抵抗的影响,探讨知母盐制后降糖作用增强的炮制原理。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS)测定生知母、盐知母中7种知母皂苷及芒果苷的含量,色谱条件设定为流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~1 min,90%~80%A;1~2 min,80%~78%A;2~5.5 min,78%~70%A;5.5~10.5 min,70%~40%A;10.5~12 min,40%~20%A;12~12.1 min,20%~90%A;12.1~13 min,90%A),流速0.3 mL·min-1;质谱条件为电喷雾离子源(ESI),负离子采集模式,采集范围m/z 100~1200。建立2型糖尿病KKAy小鼠模型,将成模小鼠随机分为模型组、生知母组、盐知母组,另设C57BL/6J小鼠作为空白组,每组9只。各给药组灌胃给予相应药液(7.2 g·kg-1·d-1),空白组、模型组给灌胃同体积生理盐水,每日1次,连续21 d。每周检测各组小鼠空腹血糖(FBG),于最后1次给药3 h后眼球取血,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清中的空腹胰岛素(FINS),瘦素(LEP),糖化血红蛋白(HbA1c),糖化白蛋白(GA)和胰高血糖素样肽-1(GLP-1)水平,计算胰岛敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用实时荧光定量聚合酶链反应法(Real-time PCR)检测各组小鼠肝组织和脂肪组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK),过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1(PGC1)mRNA的表达。结果:知母经盐制后,所测的8种化学成分含量均有升高,其中知母皂苷AⅢ,知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅢ,知母皂苷Ⅰ,知母皂苷Ⅰa和芒果苷的含量升高显著,其含量依次增加了43.78%,38.77%,25.84%,28.21%,22.51%,24.04%。生知母、盐知母均能明显降低2型糖尿病小鼠FBG,FINS,HOMA-IR,HbA1c,LEP和GA水平(P<0.05,P<0.01),均能明显升高ISI和GLP-1水平(P<0.05,P<0.01),均能明显上调肝组织及脂肪组织中PI3K,PGC1 mRNA的表达(P<0.05),且盐知母作用优于生知母。结论:生知母、盐� 郑威 闫丽 高慧关键词:知母 化学成分 胰岛素抵抗 盐知母HPLC-PDA-CAD指纹图谱研究 被引量:5 2015年 目的:建立盐知母的HPLC-PDA-CAD指纹图谱,并测定7种主要成分含量,为科学评价和控制其质量提供可靠依据。方法:采用Thermo Hypersil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,Corona参数:氮气压力为35 psi(约241.3 k Pa),Filter:High,Range:200 p A。结果:建立了盐知母HPLC-PDA-CAD特征指纹图谱共有模式,标定了12个电雾式检测共有指纹峰和5个紫外检测共有指纹峰,指认了知母皂苷BⅡ、知母皂苷E、知母皂苷BⅢ、知母皂苷AⅢ、新芒果苷、芒果苷和宝藿苷-1的峰位,并测定这7种成分的含量。结论:建立了盐知母HPLC-PDA-CAD指纹图谱检测方法,可为盐知母的质量控制提供依据。 吴莹 高慧 宋泽璧HPLC-CAD法测定盐制前后知母中知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元 被引量:10 2014年 目的:利用HPLC-电雾式检测器(charged aerosol detector,CAD)联用技术建立知母中知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元的测定方法,并比较知母盐制前后两种成分的变化。方法知母皂苷BⅡ以乙腈-水(25∶75)为流动相,进样量为10μL;菝葜皂苷元以甲醇-水(95∶5)为流动相,进样量为20μL;其他色谱条件均采用Thermo C18柱(250 mm&#215;4.6 mm,5μm),体积流量为1 mL/min,柱温为30℃;Corona参数:氮气压力为241.3 kPa,Filter:High,Range:200 pA。结果知母皂苷BⅡ在0.305-4.880μg线性关系良好,r=0.9994,平均回收率为99.1%,RSD值为1.2%;菝葜皂苷元在0.490-7.840μg线性关系良好,r=0.9991,平均回收率为98.0%,RSD值为1.3%。知母中知母皂苷BⅡ为3.16%-5.92%,盐制后为4.15%-7.20%;知母中菝葜皂苷元为0.42%-1.39%,盐制后为0.52%-1.54%。结论 CAD检测器具有较为平稳的基线和较高的灵敏度,更加适用于知母皂苷类及含有较弱或无紫外吸收成分的测定,知母盐制后知母皂苷BⅡ和菝葜皂苷元的量均有所升高。 吴莹 高慧 宋泽璧关键词:知母 菝葜皂苷元