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花生蔗糖合酶基因AhSuSy的克隆和干旱胁迫表达分析被引量：9: 2012年; 蔗糖合酶（sucrose synthase,SuSy）是蔗糖代谢途径中的关键酶,在植物生长、发育和渗透调节过程中起着重要的作用。本研究利用同源克隆、RACE和TAIL-PCR相结合的方法从花生叶片中分离了蔗糖合酶基因,命名为AhSuSy（Gen Bank登录号为JF346233）。该基因cDNA序列全长2790bp,包含一个2421bp的开放阅读框（ORF）,5′端非编码区57bp,3端非编码区为312bp。根据编码区预测AhSuSy编码806个氨基酸,与大豆、拟南芥、玉米等植物中相关蛋白的氨基酸序列同源性达75%以上;成功构建了该基因的原核表达载体pET32a-AhSuSy,在IPTG诱导下得到92kD左右的蛋白,与理论值一致。半定量RT-PCR分析表明AhSuSy在花生根、茎、叶中均有表达。利用10%PEG模拟干旱处理花生幼苗,分析胁迫后AhSuSy的转录水平,同时测定蔗糖合酶活性和蔗糖含量,发现三者均表现为处理后4~12h逐渐升高,相关性分析显示花生中蔗糖含量与蔗糖合酶活性的相关系数达0.993（P=0.007〈0.01）,处理后12~24h逐渐降低。推测该基因响应干旱调控,在花生抗旱胁迫中可能起着一定的作用。; 何美敬刘立峰穆国俊侯名语陈焕英崔顺立; 关键词：花生克隆半定量RT-PCR

冀鲁豫花生育成品种的遗传多样性分析被引量：9: 2012年; 以冀鲁豫三省不同地域的41个花生育成品种为材料,利用SSR分子标记结合田间表型鉴定、聚类分析等方法对其遗传多样性进行了研究。结果表明,21对SSR引物对41个花生育成品种进行了扫描,共检测到52个等位变异,每个位点2～4个,平均2.5个,Shannon信息指数变幅为0.21～1.40,平均为0.73,聚类分析显示在阈值为5.54可将供试品种分为3大类群7个亚类。不同品种9个农艺性状变异系数在13.16%～186.49%之间,基于农艺性状的聚类分析结果显示在阈值为5.48时可以将供试品种分为6大类群11个亚类,各大类群间品种的农艺性状表现各具特点。; 耿健刘立峰崔顺立陈焕英魏新燕; 关键词：花生育成品种 SSR

花生籽仁蛋白质含量近红外光谱模型的建立被引量：14: 2011年; 采用近红外漫反射光谱非破坏性分析,结合偏最小二乘法,以河北省地方花生品种为研究对象建立了花生籽仁蛋白质含量的近红外光谱模型。结果表明,对原始光谱数据采用"一阶导数+变量标准化"处理的方法建立的模型其校正或预测效果最佳。该模型的校正集和验证集决定系数分别为0.9245和0.9018,校正标准误和预测标准误分别为0.3601和0.4153。用该模型对16个未参与建模的花生品种进行了预测,结果表明该模型具有很好的预测能力,可以用于花生品种蛋白质含量的快速检测。; 宋丽华刘立峰陈焕英穆国俊卢萍萍; 关键词：花生近红外光谱蛋白质含量偏最小二乘法

花生花药愈伤组织的诱导和分化研究被引量：2: 2011年; 利用花生栽培品种‘邢花4号’对不同发育时期的花药进行固体培养,对诱导愈伤和愈伤分化的培养基进行了筛选。结果表明:在小孢子单核靠边期,或花蕾长3～4mm,呈绿色时,花药的诱导率最高(30.42%);以附加6-BA 8.0mg/L、NAA 0.8mg/L、KT 0.02mg/L的MS培养基上愈伤组织诱导效果较好;在添加6-BA 1.0mg/L、NAA 0.5mg/L的MSB5培养基中,可分化出茎和根,分化率达3%。取材时期、培养基成分及激素的种类和浓度等是花生花药的愈伤组织诱导和培养关键所在。; 张景景刘立峰穆国俊侯名语陈焕英崔顺立; 关键词：花生花药愈伤组织分化

花生蔗糖合成酶基因的克隆及序列分析被引量：4: 2012年; 蔗糖合成酶(Sucrose Synthase,SuSy)是蔗糖代谢途径中的关键酶,在植物生长、发育和渗透调节过程中起着重要作用。为揭示蔗糖合成酶基因在花生中的抗逆机理,以花生基因组DNA为模板,利用染色体步移技术(GenomeWalking)中的TAIL-PCR技术扩增花生SuSy基因组序列和启动子区域,得到基因组序列6 189 bp,启动子预测分析表明,该序列包含约800 bp的启动子上游调控序列,13个外显子,12个内含子。启动子元件分析显示,该片段含有典型的TATA-box、CAAT-box,并存在低温响应元件LTR、GA响应元件、干旱响应MYB结合位点、厌氧诱导必要的顺式作用元件ARE等调控元件,及G-box、box4等光响应元件,说明花生SuSy基因的表达可能受低温、干旱、缺氧、光照等环境因素以及激素GA的调控。; 何美敬刘立峰穆国俊侯名语陈焕英崔顺立; 关键词：花生蔗糖合成酶基因克隆启动子染色体步移

花生(Arachis hypogaea L.)游离小孢子培养获得愈伤组织研究被引量：2: 2012年; 通过镜检花粉各发育时期及其与花蕾、花药形态的相关性,探讨了花生基因型、液体培养基及附加激素浓度对愈伤组织诱导率的影响。结果表明,当花蕾纵径长为2.48～2.96mm,小孢子基本处于四分体时期;长度在3.26～4.16mm时,以单核期为主;5.38～9.9mm,为双核期。在小孢子单核靠边期取材诱导率最高,达9.38%。本实验所用的六个花生品种中,四粒红的单蕾产胚数最高,达到0.1个胚/蕾(MS培养基)和0.05个胚/蕾(NLN培养基);在附加4mg/L 2,4-D,3mg/L 6-BA和0.3mg/L NAA改良的MS液体培养基上且当小孢子密度为2.5×105个/mL时,花生品种四粒红的愈伤组织诱导率最高,为12.5%。; 张景景穆国俊侯名语陈焕英崔顺立刘立峰; 关键词：花生小孢子愈伤组织激素组合

河北省花生地方品种基于EST-SSR的遗传多样性及性状-标记相关分析被引量：10: 2013年; 利用215对EST—SSR引物对70份河北省花生地方品种的遗传多样性进行了检测，结果表明，58对引物在不同材料间具有多态性，多态性引物比率为26．98％。共扩增出168个位点，其中156个为多态性位点；不同EST．SSR的多态性信息量（PIC）变幅为0．0630—0．9825，平均为0．5244。聚类分析结果表明，在阈值为8．00时，可以将各地方品种明显分为2大类，第1类群包含所有普通型材料，第Ⅱ类群包含所有珍珠豆型和多粒型。标记一性状相关分析获得了与5个农艺性状显著相关的标记12对，可以应用于花生育种中农艺性状的分子标记辅助选择。; 胡宏霞穆国俊侯名语陈焕英崔顺立何美敬刘立峰; 关键词：花生

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河北省应用基础研究计划(10960120D)