国家自然科学基金(81202368)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
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- Cyclin D3、CDK11p58在脂多糖诱导大鼠星形胶质细胞活化过程中的表达及相互作用被引量:1
- 2013年
- 目的 :探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导星形胶质细胞活化过程中细胞周期蛋白D3(cyclin D3)、周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)11p58的表达、亚细胞定位及相互作用。方法:LPS刺激体外培养大鼠星形胶质细胞,采用Western Blot技术检测过程中cyclin D3及CDK11p58蛋白的表达情况;用免疫共沉淀技术分析LPS刺激前后cyclin D3及CDK11p58形成复合物的情况;用免疫荧光双标技术检测二者的亚细胞定位情况;将cyclin D3真核表达载体转染入星形胶质细胞,用核浆分离技术分析过表达cyclin D3对于CDK11p58亚细胞定位影响。结果:LPS呈浓度依赖性上调星形胶质细胞内cyclin D3及CDK11p58蛋白表达;cyclin D3与CDK11p58可形成复合物,LPS刺激增强二者相互作用;静息状态下星形胶质细胞内cyclin D3及CDK11p58均主要位于细胞核,但在细胞质内亦有不同程度表达,LPS刺激后二者均向细胞核聚集,且出现明显细胞核内共定位;过表达cyclin D3可促进CDK11p58向细胞核转运。结论:LPS可刺激大鼠星形胶质细胞内cyclin D3及CDK11p58蛋白表达;cyclin D3通过与CDK11p58相互作用,促进CDK11p58细胞核转运,从而参与星形胶质细胞活化过程。
- 张冬梅陶涛夏小鹏吴圆圆成红兵
- 关键词:星形胶质细胞脂多糖
- 肿瘤坏死因子受体相关因子6在小胶质细胞炎性激活中的作用
- 2013年
- 目的:研究肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在小胶质细胞炎性激活中的作用。方法:分离培养大鼠原代小胶质细胞,利用脂多糖(LPS)处理构建炎症模型,免疫印迹检测TRAF6的表达改变;合成TRAF6的siRNA,转染小胶质细胞后构建LPS诱导的细胞炎性激活模型,检测细胞活化标记F4/80的表达。结果:脂多糖可诱导小胶质细胞中F4/80的表达,并存在浓度依赖性。干预细胞中TRAF6的表达抑制小胶质细胞中活化标记F4/80的表达。结论:TRAF6在小胶质细胞炎性活化过程中表达增加,干预TRAF6的表达抑制细胞炎性活化。
- 孙驰陶涛
- 关键词:肿瘤坏死因子受体相关因子小胶质细胞WESTERNBLOT检测