温州市科技计划项目(S20100016)
- 作品数:4 被引量:20H指数:2
- 相关作者:闫茂仓陈琛张小莺赵建乐李引乾更多>>
- 相关机构:浙江省海洋水产养殖研究所陕西理工大学西北农林科技大学更多>>
- 发文基金:温州市科技计划项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家级动物科学实验教学示范中心建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 牛β-防御素BNBD11基因在大肠杆菌中的表达
- 2011年
- 探索牛β-防御素BNBD11原核表达及纯化的技术路线。根据已报道的BNBD11的氨基酸序列,兼顾大肠杆菌密码子偏好性,设计合成BNBD11基因。构建重组表达载体pET32a-BNBD11,转入E.coli BL21,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达。经SDS-PAGE检测融合蛋白结果显示,大部分表达产物以可溶形式存在,用Ni Sepharose柱层析纯化融合蛋白。融合蛋白经甲酸切割后,再次用Ni Sepharose柱层析去除带有His-Tag的杂蛋白,最终得到纯化的重组BNBD11。实验实现了BNBD11在大肠杆菌中的融合表达,并纯化了获得的重组BNBD11。
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- 关键词:Β-防御素大肠杆菌
- 文蛤抗菌物质的粗提及活性检测被引量:2
- 2014年
- 为了分离纯化得到文蛤体内的抗菌活性蛋白,以灭活的副溶血弧菌诱导的方法,通过紫外分光光度计法测定其粗提品的蛋白质含量,并进行抗菌活性检测,同时利用硫酸铵沉淀法对粗提物进一步纯化、SDS-PAGE电泳检测纯度。结果显示,文蛤经副溶血弧菌诱导后,产生的抗菌物质在短时间内达到高峰,随后逐渐下降,大约在4h时对大肠杆菌抑制率最高;诱导4h时抑制率与对照相比无显著差异(P>0.05)。在经过硫酸铵沉淀后,SDS-PAGE电泳显示条带较多;进行Sephadex G-50凝胶过滤层析的最佳条件为洗脱流速0.2ml/min、样品浓度3.0mg/ml。
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- 关键词:文蛤抗菌物质硫酸铵沉淀活性检测凝胶层析
- 牛抗菌肽及其基因工程的研究进展被引量:11
- 2010年
- 综述了牛抗菌肽在分类、组织分布、生物活性、基因结构等方面的研究进展,对采用基因工程技术表达牛抗菌肽的方法进行了评述,并展望了其转基因技术的应用前景,提出了利用生物信息学构建牛抗菌肽肽库的新思路。
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- 关键词:抗菌肽基因工程
- 抗菌肽SMAP-29结构功能及分子设计策略被引量:7
- 2011年
- 抗菌肽是生物体内产生的一种具有生物活性的小分子多肽,具有广谱抗细菌、抗病毒、抗真菌甚至抗癌作用。SMAP-29是来源于绵羊骨髓细胞,包含29个氨基酸的Cathelicidin类α-螺旋结构抗菌肽。SMAP-29具有多种生物活性,包括抗革兰氏阳/阴性菌、抗真菌、抗病毒、抗寄生虫、抗螺旋体、抗衣原体和中和内毒素活性,并且具有作用机制独特、快速杀灭细菌的特点。以下综述了SMAP-29抗菌肽家族的基因和蛋白结构、结构与活性关系、作用机制、生物功能、基因重组表达,重点阐述了SMAP-29结构、分子设计的必要性和基于SMAP-29一级、二级结构进行分子设计策略,为SMAP-29药物设计和研究开发奠定了基础。
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- 关键词:抗菌肽活性分子设计