湖南省自然科学基金(06JJY4030)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- zVAD-fmk对未成熟树突状细胞诱导初始性CD4^+T细胞分化为调节性T细胞影响的体外研究被引量：2
- 2011年
- 目的研究Caspase通路在未成熟树突状细胞(imDC)诱导同种异体CD4+T细胞转化为调节性T细胞(Treg)中的作用及探讨免疫耐受机制建立可能的分子机制。方法将人外周血分离、培养出的imDC与健康胎儿脐血中分离CD4+T细胞混合培养,同时加入zVAD-fmk,以流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞(Treg细胞)转化率。结果 (1)imDC的鉴定:外周血经诱导后分离的imDC,以流式细胞仪检测细胞表面分子,imDC表面分子表达的结果:CD80(7.27±0.13)、CD83(3.53±0.35)、CD1a(4.29±0.27)(;2)混合培养后CD4+CD25+T细胞的转化率结果为:空白组(1.78±0.11)﹪、对照组(22.23±0.77)﹪、低浓度zVAD-fmk组(21.63±0.82)﹪、中浓度zVAD-fmk组(12.24±0.54)﹪、高浓度zVAD-fmk组(12.20±0.96)﹪,结果对照组和低浓度组、中浓度组和高浓度组间比较,P>0.05,其余各组间比较,P<0.05。加入zVAD-fmk并与imDC细胞混合培养的T细胞转化率相对于未加入阻断剂的T细胞较低,同时Caspase信号通路对zVAD-fmk无浓度依赖性。结论可以诱导同种异体初始性CD4+T细胞分化为Treg。Caspase信号通路特异性的阻断剂zVAD-fmk可以部分抑制Treg的转化,说明Caspase信号通路在诱导免疫耐受中可能起了较为重要的作用。
- 骆志清王毅钱坤罗志刚郭军华屈小勇
- 关键词：树突细胞调节性细胞CASPASE
- GW5074对不成熟树突状细胞诱导初始性CD4^＋T淋巴细胞分化为Treg的影响
- 2011年
- 目的建立一种稳定且高效的不成熟树突状细胞（imDC）体外培养方法，探讨细胞外信号调节激酶（ERK）1／2信号传导通路抑制剂GW5074对imDC体外诱导同种初始性CD4^＋T淋巴细胞分化为调节性T淋巴细胞（Treg）的影响。方法从健康成人外周血单个核细胞（PBMC）中分离、培养成熟树突状细胞（mDC）和imDC，并对mDC和imDC的免疫表型和功能进行鉴定。取新生儿脐静脉血分离初始性CD4^＋T淋巴细胞。实验分为5组：（1）空白对照组为单纯培养的初始性CD4^＋T淋巴细胞，不做任何处理；（2）阳性对照组将imDC与初始性CD4^＋T淋巴细胞以1：10的细胞比例混合培养；（3）低浓度GW5074组；（4）中浓度GW5074组；（5）高浓度GW5074组。后3组在阳性对照组基础上，分别加入终浓度为8、24和40μmol／L的GW5074。培养5d后，用流式细胞仪检测初始性CD4^＋T淋巴细胞转化为Treg细胞的转化率。结果imDC呈CD1a高表达，CD80和CD83低表达；mDC呈CD1a低表达，CD80和CD83高表达。imDC和mDC的刺激指数分别为1．12±0．03、2．85±0．07。空白对照组，阳性对照组，低、中及高浓度GW5074组的CD4^＋CD25^＋Treg转化率分别为（5．81±1．36）%、（35．73±2．07）％、（22．53±2．11）％、（11．55±1．73）％和（4．97±1．83）％，除空白对照组与高浓度GW5074组间的差异无统计学意义（P〉0．05）外，其余各组之间两两比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论通过应用重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素4联合诱导人外周血PBMC可获得高纯度imDC，ERKU2信号传导通路在诱导免疫耐受中发挥作用，GW5074可抑制初始性CD4^＋T淋巴细胞向Treg转化。
- 邢增术王毅王刚秦国庆梁培育周浩李志雄肖祥廖端芳
- 关键词：树突状细胞免疫耐受
