四川省教育厅科学研究项目(12ZB025)
- 作品数：2 被引量：30H指数：2
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- 西黄丸含药血清经Wnt信号转导通路细胞周期蛋白D1调控人肺癌干细胞增殖的机制被引量：15
- 2014年
- 目的:研究西黄丸含药血清经Wnt信号转导通路关键蛋白细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)调控人肺癌干细胞增殖的机制。方法:10只日本大耳白兔随机分为5组,西黄丸浸出液高、中、低剂量组按32,16,8 g·kg-1·d-1ig,空白组给以等量生理盐水ig;环磷酰胺(CTX)组按7.5 mg·kg-1·d-1ip,各组连续给药3 d后腹主动脉采血,离心,获得含药血清。体外培养人肺腺癌细胞系(LAC),应用流式细胞荧光激活(FACS)技术,筛选鉴定具干细胞特性的SP细胞(side population cells)。50只C57BL/6小鼠分西黄丸高、中、低剂量组,CTX组,模型组5组,SP细胞以培养基稀释调整瘤细胞密度1×107/mL,于每只小鼠右腋皮下接种0.2 mL瘤细胞悬液,每组分别给予西黄丸药液32,16,8 g·kg-1·d-1ig,等量生理盐水ig和CTX7.5 mg·kg-1·d-1,ip,连续14 d,处死小鼠,剥取瘤块称瘤重,并计算抑瘤率。SP细胞密度调至2×106/mL,分别种入培养瓶,设西黄丸高、中、低剂量组,CTX组,空白组5组,分别加入如前所述制备的各组血清(血清、培养液体积比30%),培养24 h后上流式细胞仪检测各组细胞周期。按同样方法制备5组SP细胞,加入各组含药血清培养24 h后用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白印迹(Western blot)法分别检测Cyclin D1 mRNA及蛋白表达。结果:与模型组相比,西黄丸高、中剂量组和CTX组瘤重明显降低(P<0.01);与空白组30%血清比较,西黄丸高、中剂量30%含药血清组和CTX 30%含药血清组G1期细胞数量比例明显增高,S期、G2期细胞数量比例明显减少(P<0.05);与空白组30%血清比较,西黄丸高、中剂量30%含药血清组及CTX 30%含药血清组Cyclin D1 mRNA及蛋白表达均明显低于空白血清组(P<0.05,P<0.01)。结论:西黄丸可通过抑制Wnt信号通路中关键蛋白Cyclin D1表达,阻止肺癌干细胞从G1向S期转化,从而达到抑制肺癌细胞增殖的作用。
- 肖桦秦旭华赖宇金沈锐赖莉
- 关键词：西黄丸肺癌干细胞细胞周期蛋白D1
- 西黄丸经Wnt信号转导通路关键蛋白β-catenin调控人肺癌干细胞增殖被引量：18
- 2014年
- 目的:研究西黄丸经Wnt信号转导通路关键蛋白β-catenin调控人肺癌干细胞增殖的机制。方法:培养人肺腺癌细胞系LAC,应用流式细胞荧光激活(FACS)技术,筛选鉴定具干细胞特性的SP细胞;50只C57BL/6小鼠分为西黄丸高剂量组、中剂量组、低剂量组,环磷酰胺组、模型组5组,SP细胞调整细胞密度1×107/ml,每只小鼠右腋皮下接种0.2ml瘤细胞悬液,成瘤后,分组按32g/kg、16g/kg、8g/kg给以西黄丸药液灌胃,CTX组7.5mg/kg,模型组予等量生理盐水,连续给药14d,处死小鼠,剥取瘤块称瘤重,并计算抑瘤率。日本大耳白兔随机分为5组,按上述剂量和方法给药,各组连续给药3 d后腹主动脉采血,离心,获得含药血清。SP细胞密度调至2×107/ml,种入培养瓶,分为西黄丸高、中、低剂量组,CTX组、空白组5组,分别加入如前所述制备的各组含药血清(血清、培养液体积比30%),培养24h后用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白印迹(Western Blot)法分别检测β-catenin mRNA及蛋白表达。结果:西黄丸32g/kg、16g/kg可明显抑制C57BL/6小鼠体内肺癌移植瘤,同时可明显降低β-catenin mRNA及蛋白表达。结论:西黄丸可经由抑制β-catenin的表达,阻止肺癌干细胞Wnt信号转导通路激活,从而抑制肺癌干细胞增殖为肺癌细胞。
- 肖桦秦旭华金沈锐马萍赖莉
- 关键词：西黄丸肺癌干细胞
