国家自然科学基金(30371825)
- 作品数：6 被引量：32H指数：3
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- 开胸与微创方法制备小型猪急性心肌梗死模型的对比研究被引量：10
- 2008年
- 目的观察开胸结扎冠状动脉法(简称开胸法)与微创冠状动脉内球囊封堵法(简称微创法)制备心肌梗死(MI)模型的差异。方法选用贵州小型猪,分别应用开胸法与微创法,阻断冠状动脉左前降支中段血流,造成心肌梗死,比较观察两种方法建立心肌梗死模型的异同。结果两种方法均可以形成心肌梗死模型,病理检查无显著差异。开胸法造模后出现通气性呼吸功能障碍,心肌酶升高水平与临床患者心肌梗死衍变有差异。微创法应用造影剂可能会有一过性肾功能损伤。结论微创法对实验结果干扰小,与临床条件相近,是一种更好的造模方法。
- 谢忠忱尹明苟鹏黄丽洁贾琳彭享胜陈华
- 关键词：心肌梗死小型猪动物
- 不同浓度地黄低聚糖对离体培养成年大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响被引量：10
- 2008年
- 目的观察不同浓度地黄低聚糖(RGOs)对离体培养成年大鼠骨骼肌成肌细胞(SMs)增殖的影响。方法分离成年大鼠SMs,每日观察细胞的生长形态。第3代(培养10 d后)的SMs行α-骨骼肌肌动蛋白免疫组化染色。用无血清培养液[Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)/F12]孵育原代培养3 d的SMs 24 h使细胞同步化,分别以RGOs终浓度为0(对照)、0.156、0.625、2.500和10.000 g/L含体积分数为15%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12培养液培养,连续计数6 d。从原代培养到细胞计数,整个过程分别重复3次,取平均值,观察不同浓度RGOs对SMs增殖的影响。结果本研究方法分离的SMs经锥虫蓝染色显示成活率均在90%以上。原代分离提纯的SMsα-肌动蛋白(α-actin)染色阴性;传代2次后(距原代分离10 d),α-actin染色阳性。RGOs可明显促进原代分离的SMs增殖,这种效应反映在指数增长期提前,细胞分裂数量增加,肌管融合速度增加,较低浓度(0.156～2.500 g/L)时,促增殖效应呈剂量依赖性(P均<0.05);但给予高浓度(10.000 g/L)时并不能进一步促进SMs增殖。结论RGOs可以明显改变SMs生长特性,最适干预浓度为0.625 g/L。有望为临床上心肌梗死的中西医结合细胞学治疗提供实验依据。
- 尹明王士雯高磊李泱王新华刘鹏
- 关键词：地黄低聚糖成肌细胞离体培养增殖
- 五指山小型猪冠状动脉球囊损伤术被引量：2
- 2008年
- 目的通过实施冠状动脉内皮损伤术，加速小型猪在高胆固醇饮食条件下的动脉粥样硬化进程，建立小型猪定位冠状动脉硬化技术，为心血管疾病研究提供理想的动物模型。方法采用8头五指山小型猪进行冠状动脉内皮损伤术，术前饲喂3．0％高胆固醇饲料20—25d，在冠状动脉前降支中段进行球囊扩张，压力为6—10atm，扩张次数3次。结果除1头小型猪，在经过扩张压力10个大气压，扩张3次手术后存活外，其余小型猪在术后6—24h内死亡。结论五指山小型猪冠状动脉扩张后，极易出现室颤，推测该品种小型猪对这种手术的耐受力较差。
- 谢忠忱黄广勇尹明苟鹏贾琳黄丽洁陈华
- 关键词：五指山小型猪冠状动脉
- 5-氮胞苷浓度对体外骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞的影响被引量：9
- 2005年
- 目的 探讨不同浓度5-氮胞苷(5-aza)体外诱导小型猪骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化的可能性及其对细胞扩增速度的影响。方法 10 ml骨髓，1．077g／ml Ficoll密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞(MNCs)，第2代传代细胞分别加入3，5，10μmol／L浓度5-aza化学诱导24 h，与对照组连续培养4周，细胞爬片免疫荧光法鉴定结蛋白desmin及心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达，电镜观察诱导细胞的超微结构变化。结果 5-aza化学诱导后MSCs形态变长、增大，排列更加紧密、整齐，5和10μmol／L组可见较多的多核细胞，部分管状结构，诱导率分别为36％和31％，无显著性差异；3 μmol／L组上述变化的细胞极少，3种浓度及对照组4周后细胞扩增数量分别为(3．81±0．40)×10~6、(3．76±0．62)×10~6、(3．67±0．80)×10~6及(2．90±0．21)×10~6，10μmol／L组增殖速度明显减慢(P＜0．05)。各组诱导后的细胞均未见自发搏动。免疫组化提示desmin及cTnI表达阳性，5和10μmol／L组电镜下出现肌丝样结构、心房颗粒及细胞间的缝隙连接。结论 小型猪MSCs经5、10μmol／L 5-aza化学诱导可分化为心肌样细胞，其中5 μmol／L 5-aza不仅可以诱导心肌样细胞而且对细胞增殖速度影响小。
- 程芮王士雯曹丰孟玲王韫芳李艳华李泱裴雪涛
- 关键词：骨髓间充质干细胞心肌细胞5-氮胞苷
- 多能干细胞移植的临床应用及中药的调节效应被引量：1
- 2004年
- 多能干细胞具有多向分化潜能和自我更新的特征。多能干细胞移植已经成为治疗肿瘤、心力衰竭和帕金森病等多种疾病的重要手段。许多中药具有双向免疫调节作用,它们通过调节骨髓造血机能和增加可移植的干细胞体外扩增效应,从而提高干细胞移植的成功率,增加多能干细胞移植的治疗效应。
- 王士雯李泱
- 关键词：中药
- 地黄低聚糖对骨骼肌成肌细胞瞬时外向钾电流的影响被引量：1
- 2008年
- 目的从细胞瞬时外向钾电流(Ito)角度,探讨地黄低聚糖(RGOs)对骨骼肌成肌细胞(SMs)电生理特性的影响。方法分离成年大鼠心肌细胞和SMs,运用膜片钳技术研究心肌细胞和SMs以及0.625g·L-1RGOs干预后,SMs与心肌细胞Ito的差异。结果两种细胞Ito均从-40mV时开始激活,RGOs对大鼠SMsIto有增加作用,从-30mV到30mV,经过0.625g·L-1RGOs预处理的SMs组Ito密度〔(7.3±0.7)to(65.3±2.3)pA/pF(n=5)〕显著高于心肌组〔(0.9±0.1)to(28.8±0.9)pA/pF(n=5)〕和SMs组〔(4.5±0.5)to(23.7±2.0)pA/pF(n=5)〕的电流密度。结论RGOs能显著提高SMs的Ito密度,影响移植的SMs的电生理特性。这为今后在提高干细胞移植有效性同时,增加其安全性提供了一个新的思路。
- 尹明王士雯高磊李泱王新华刘鹏
- 关键词：地黄低聚糖成肌细胞膜片钳术
