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人造矿物纤维诱导人支气管上皮细胞系恶性转化的研究被引量：1: 2009年; 目的比较温石棉、难溶性陶瓷纤维（RCF）、玻璃棉（GW）、岩棉（RW）对人支气管上皮细胞BEAS-2B细胞株的细胞毒性与致恶性转化的能力。方法检测温石棉、RCF、GW、RW对BEAS-2B的细胞毒性；BEAS-2B细胞每10d染毒24h，共染毒6次，待细胞出现生长抑制后，用锚着不依赖性生长实验判断细胞恶性转化。结果温石棉、RCF、GW、RW均对BEAS-2B细胞具有细胞毒性，并呈剂量-反应关系。染毒6次后，温石棉组、RCF组细胞生长速度加快，排列紊乱，失去接触抑制，出现复叠层生长，并可在软琼脂上生长，细胞集落形成率分别为4．6％和7．2％，与阴性对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；而GW组和RW组细胞集落形成率分别为0．6％和0．4％，与阴性对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论温石棉组、RCF具有使BEAS-2B细胞发生恶性转化的能力，GW、RW染毒60d未能使BEAS-2B细胞发生恶性转化。; 朱丽瑾张敏鞠莉肖芸张幸

温石棉诱导人支气管上皮细胞错配修复基因表达改变被引量：2: 2011年; 目的研究温石棉诱导人支气管上皮细胞系的BEAS-2B细胞恶性转化活力及错配修复基因表达的变化。方法以2×10-3μg/m2温石棉纤维染毒BEAS-2B细胞,每10 d染毒24 h,待细胞出现生长抑制后用锚着不依赖性生长实验判断细胞恶性转化,并利用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测温石棉对BEAS-2B染毒12 h、24 h、48 h、60 d等不同染毒阶段的人类错配修复基因hMSH1和hMLH2的mRNA表达的变化。结果细胞染毒60 d后生长加快,接触抑制消失,呈现重叠生长,并可在软琼脂中生长。温石棉染毒24 h和48 h组mRNA表达下调,60 d组表达上调。结论温石棉可导致人支气管上皮细胞BEAS-2B错配修复基因表达发生变化。; 朱丽瑾鞠莉肖芸张敏钟惠仙张幸; 关键词：温石棉错配修复基因基因表达

温石棉诱导人支气管上皮细胞凋亡及氧化的作用被引量：2: 2009年; 目的研究温石棉诱导永生化人支气管上皮细胞（BEAS-2B）的凋亡和活性氧（ROS）的生成，并观察自由基清除剂对其诱导作用的拮抗作用。方法选用BEAS-2B，用0、5、10、20、100、200μg／cm^2浓度的温石棉悬液及0、100、200、400、800、1600μg/ml的温石棉浸出液，设立正常空白对照、阴性对照（标准硅灰石）和阳性对照（标准石英），用锥虫蓝排斥法检测细胞存活率，琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞凋亡片段，流式细胞术检测细胞凋亡率及反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测凋亡相关基因caspase-3的表达水平。采用荧光探针2′，7′-二氯双氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）测定温石棉刺激后细胞产生的ROS水平，并观察自由基清除剂过氧化氢酶、二甲亚砜和甘露醇对ROS生成和基因表述水平的影响。结果温石棉刺激BEAS-2B 24h后，0、5、10μg／cm^2温石棉悬液和0、100、200μg/ml温石棉浸出液的细胞存活率大于90％。并且检测到凋亡细胞DNA凋亡片段。随着温石棉悬液和浸出液浓度的增加，BEAS-2B凋亡率上升，与阴性对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。温石棉悬液和浸出液可明显增强细胞caspase-3 mRNA的表达和诱导ROS产生。过氧化氢酶、二甲亚砜和甘露醇等自由基清除剂则可减轻caspase-3表达和阻断ROS生成，对温石棉悬液组细胞的ROS阻断率分别为23．7％、21．6％和11．2％，对温石棉浸出液组ROS阻断率分别为37．9％、40．3％和10．6％。结论温石棉可诱导BEAS-2B发生凋亡，ROS在BEAS-2B的凋亡中起重要作用。; 张敏朱丽瑾贾振宇肖芸鞠莉张幸; 关键词：活性氧组分自由基清除剂

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浙江省医药卫生科学研究基金(2007A004)

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