湖北省教育厅科学技术研究项目(D200612005)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 新城疫病毒JZ05株F基因重组pGAPZα的构建被引量：1
- 2009年
- 以RT-PCR扩增新城疫病毒JZ05株F基因F1片段和F2片段,以核酸内切酶KpnⅠ和XbaⅠ对目的基因片段及质粒pGAPZαA进行酶切,连接酶切产物,转化Eacterium coli DH5α。以PCR方法确定JZ05 F1的阳性重组子为2个,JZ05 F2的阳性重组子为4个。对阳性重组子进行酶切鉴定及序列分析,结果发现,重组质粒pGAPZαA-F1、pGAPZαA-F2及质粒pGAPZαA的酶切电泳条带与试验设计大小相符;基因测序得到的重组子中F1和F2序列长度分别为1 198 bp、269 bp,与新城疫病毒JZ05株F基因序列比对,其序列长度和核苷酸排列完全一致。这表明重组质粒中目的基因片段的核苷酸序列、大小和插入位置是正确的,为以酵母表达系统表达F1和F2、研究强毒株与弱毒株F蛋白的抗原性差异程度及研制重组亚单位疫苗打下了基础。
- 程太平刘超荣俊
- 关键词：新城疫病毒F基因
- 新城疫病毒Mukteswar株F基因重组pGAPZα-F的构建
- 2009年
- 以RT-PCR扩增新城疫病毒Mukteswar株F基因F1片段和F2片段,以核酸内切酶KpnⅠ和XbaⅠ对目的基因片段及质粒pGAPZαA进行酶切,连接酶切产物,转化E.coliDH5α。以PCR方法确定Mukteswar F1和Mukteswar F2的阳性重组子均为4个。对阳性重组子进行酶切鉴定及序列分析,结果,重组质粒pGAPZαA-F1、pGAPZαA-F2及质粒pGAPZαA的酶切电泳条带与试验设计大小相符;基因测序得到的重组子中F1和F2序列长度分别为1 198 bp、269 bp,与新城疫病毒Mukteswar株F基因序列比对,其序列长度和核苷酸排列完全一致。结果表明重组质粒中目的基因片段的核苷酸序列、大小和插入位置是正确的,为以酵母表达系统表达F1和F2,研究Mukteswar株与基因Ⅶ型毒株之间F蛋白的抗原性差异程度打下基础。
- 程太平荣俊刘超
- 关键词：F基因
- 一株新城疫病毒F基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2009年
- 以PCR扩增新城疫病毒JZ05株的F基因,并进行克隆和测序。采用DNAssist序列分析软件将JZ05毒株F基因与另外18个NDV毒株F基因序列及其氨基酸序列进行比对分析。测序结果表明,NDVJZ05株F基因产物F0蛋白酶裂解位点(111～117位)的氨基酸序列为GRRQKRF。与18个NDV毒株F蛋白的氨基酸序列对比,半胱氨酸残基数目和位置完全一致;仅NDV JZ05株发生单个氨基酸残基变更的有5处;而其F蛋白细胞融合活性位点中的一些保守氨基酸残基都没有发生变更。10个毒株(Ch98、Ch2000、YN、JZ05、JS01、GD05、SCL03、SSX03、Lye01、TW)之间全长氨基酸序列的同源性均在96%以上,这10个毒株与3个疫苗毒株(LaSota、B1、Clone30)的同源性在88.07%～89.51%。
- 程太平荣俊
- 关键词：新城疫病毒F基因基因克隆
