浙江省自然科学基金(Y2090935)
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 相关作者：王毅刚王世兵雷文肖睿娟孔彦平更多>>
- 相关机构：浙江理工大学中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 蒽贝素(Embelin)通过阻断NF-κB信号通路抑制肝癌细胞Bel-7404生长的研究被引量：6
- 2012年
- 蒽贝素(Embelin)是一种X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)的小分子抑制剂,可以抑制XIAP的生成和活性,从而解除XIAP的抗凋亡作用,使凋亡顺利进行.研究了Embelin抑制肝癌细胞Bel-7404增殖的机制.采用不同浓度梯度,通过荧光显微镜、Hochest33342染色、MTT检测、AnnexinⅤ/PI流式细胞术和Western blot分别检测Embelin对Bel-7404细胞的形态学变化、凋亡小体形成、细胞存活率、细胞凋亡水平、凋亡信号转导相关蛋白表达的影响.结果显示,Embelin能明显抑制Bel-7404细胞增殖,并通过激活caspase通路以及阻断NF-κB信号通路诱导Bel-7404细胞凋亡,为进一步利用Embelin进行肝癌治疗的研究打下一定的基础.
- 王世兵雷文徐燕华郭科妮王毅刚
- 关键词：肝癌细胞CASPASENF-ΚB
- 二氯乙酸钠对溶瘤腺病毒ZD55-Smac抑制肝癌细胞生长的影响被引量：2
- 2010年
- 研究了溶瘤腺病毒ZD55-Smac联合小分子药物二氯乙酸钠(DCA)对人肝癌细胞株的体外抑制效果。首先通过PCR及Western blot鉴定病毒构建正确与否及有无野毒污染,再用MTT法分别检测DCA、ZD55、ZD55-Smac以及DCA与病毒联合对肝癌细胞株Huh-7、PLC、SMMC-7721及肝正常细胞QSG-7701生长的抑制作用;通过倒置显微镜观察了DCA、ZD55-Smac以及DCA和ZD55-Smac联合使用对肝癌细胞株PLC及肝正常细胞QSG-7701的细胞形态变化的影响;利用Hoechst33342染色观察了所处理细胞的凋亡形态学变化。结果表明DCA联合ZD55对肝癌细胞株Huh-7、PLC和SMMC-7721的抑制效果相比较单药物治疗或单病毒治疗有显著增加,而DCA联合ZD55-Smac对肝癌细胞的抑制效果比单病毒治疗有所减弱。该研究为进一步探究ZD55-Smac联合药物治疗打下基础。
- 谭渊李喜英席璐王世兵肖连立李新王毅刚
- 关键词：肝癌细胞
- AFP调控的携带Mn-SOD基因的腺病毒对肝癌细胞的杀伤作用被引量：4
- 2011年
- 利用改造后的溶瘤腺病毒Ad.enAFP-E1A-△E1B55Kd作为载体携带治疗基因Mn-SOD,得到目的病毒Ad.enAFP-E1A-△E1B55Kd-MnSOD;通过PCR方法鉴定病毒构建正确;MTT法检测病毒对肝癌细胞的特异杀伤能力和对肝正常细胞的安全性;Hoechst33342染色实验观察细胞凋亡的现象。结果显示:经目的病毒感染后肝癌细胞出现明显的病变现象和生长抑制,而肝正常细胞基本无病变现象出现,表明构建的目的病毒具有较高的安全性和很好的靶向性。此外目的病毒处理能引起特异性的肝癌细胞凋亡,所携带治疗基因Mn-SOD能通过促进肿瘤细胞的凋亡达到抑制肿瘤细胞生长的效果。
- 孔彦平张静肖睿娟郭国英王毅刚
- 关键词：腺病毒肝癌细胞
- 溶瘤腺病毒ZD55-Mn-SOD联合TPL对骨髓瘤细胞的生长抑制效应被引量：1
- 2012年
- 研究利用携带Mn-SOD的溶瘤腺病毒Ad-E1A-ΔE1B55Kd-Mn-SOD(ZD55-Mn-SOD)联合小分子化合物雷公藤内酯醇(Triptolide,TPL)对骨髓瘤细胞株RPMI8226、U266生长的体外抑制效应,希望找到解决化疗药物在临床使用中所出现的疗效低及毒副作用大的方法。采用CCK-8比色分析方法表明100 MOI ZD55-Mn-SOD与TPL(2ng/mL、4ng/mL)联合处理后,RPMI 8226及U266的细胞存活率均显著低于单用ZD55-Mn-SOD或TPL(P<0.05);用结晶紫染色法定性分析了ZD55-Mn-SOD联合TPL对两种骨髓瘤细胞的杀伤作用;最后Hoechst33342染色法观察细胞凋亡也显示联合应用ZD55-Mn-SOD与TPL处理组的细胞凋亡现象比二者单独使用均要显著。本研究初步证实ZD55-Mn-SOD与TPL联合具有协同作用,能有效地在体外抑制骨髓瘤细胞RPMI 8226和U 266的生长。
- 肖睿娟张越峰潘素晶王毅刚
- 关键词：TPL骨髓瘤细胞
- AFP与CEA基因的启动子克隆及肿瘤细胞特异性表达的研究
- 2012年
- 为了研究AFP和CEA基因启动子的转录活性与肿瘤特异性,本实验利用PCR技术扩增AFP和CEA基因上游序列,并将其克隆到pGL3-Basic载体中构建pGL3-AFP和pGL3-CEA荧光报告质粒。将构建的pGL3-AFP和pGL3-CEA质粒分别与pRL-TK共转染人结肠癌细胞株SW620、肝癌细胞株Huh-7、肺癌细胞株A549、宫颈癌细胞株Hela、人肝正常细胞株QSG-7701、人肺正常细胞株Beas-2b,用双荧光报告系统检测这两种质粒在不同细胞里的荧光活性表达。酶切和测序结果证实成功构建了双荧光素酶报告质粒pGL3-AFP和pGL3-CEA,双荧光素酶报告基因检测结果证明AFP和CEA均具有一定的肿瘤特异性。这些结果表明AFP和CEA均具有一定的肿瘤特异性,为进一步研究AFP和CEA基因的表达调控机制和探讨靶向基因-病毒治疗提供依据。
- 雷文王世兵马步云叶静夏玉龙王毅刚
- 关键词：AFP
- BATF2对Wnt信号通路影响的研究
- 2012年
- Wnt信号通路在各种生物体内高度进化保守,与癌症的发生发展密切相关。BATF2是一个新近发现的基因,研究表明其具有抑癌基因的作用。目前,BATF2与Wnt信号通路的关系尚不清楚,该文用荧光素酶报告基因检测、Real-time PCR和Western blot发现BATF2能影响Wnt信号通路。过表达BATF2可明显下调TCF4/β-catenin的转录活性和Wnt信号通路下游基因的表达,可以下调细胞核中的β-catenin。推测BATF2可能通过下调细胞核中的β-catenin来实现对Wnt信号通路的下调。上述结果为抑制Wnt信号通路用于肿瘤治疗提供了一定的依据。
- 郑水娣吴帅桂镜华贾晓渊章康健
- 关键词：WNT信号通路Β-CATENIN
- 磷酸化和乙酰化修饰对STAT3功能的调节被引量：3
- 2010年
- STAT3是细胞因子和生长因子受体的胞质转录因子。当细胞因子与JAK相连受体结合时,JAK通过自身磷酸化而被激活,激活后的JAK可磷酸化一个或多个受体位点并呈递给STAT3而与之结合。随后STAT3发生Tyr705和Ser727位点的磷酸化并从受体上解离,而后转移至细胞核中调控基因表达。近来有研究表明STAT3的Lys685可发生乙酰化修饰,并且它对STAT3二聚体的稳定形成非常重要。为了进一步研究STAT3的乙酰化与磷酸化修饰之间的关系以及对STAT3活性调节的影响,本文应用Western印迹和荧光素酶报告基因检测等方法发现CBP可以增强STAT3Ser727的磷酸化,增强STAT3的转录活性。此外,STAT3 Tyr705去磷酸化能减弱STAT3的乙酰化水平,而且Tyr705的磷酸化修饰对STAT3的转录活性影响很大。上述结果对于如何靶向持续激活的STAT3用于肿瘤治疗提供了依据。
- 谢宏霞曾凤辉刘鸿蒋海王毅刚
- 关键词：磷酸化乙酰化STAT3转录活性
- 携带IL-24的溶瘤腺病毒联合5-Fu对NCI-H460肺癌细胞的生长抑制效应
- 2010年
- 研究利用携带IL-24的溶瘤腺病毒(ZD55-IL-24)联合化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)对肺癌细胞NCI-H460生长的体外抑制效应。利用RT-PCR和Western blot法分别检测了IL-24在转录和翻译水平分析,发现IL-24在经ZD55-IL-24感染的NCI-H460中能有效表达,而未感染ZD55-IL-24的NCI-H460则无表达;用结晶紫染色法定性分析了ZD55-IL-24联合5-FU对NCI-H460的生长抑制和杀伤作用,结果表明联合应用比单用时效果更显著;通过MTT法进行的定量分析也表明ZD55-IL-24与5-FU联合处理48 h后,NCI-H460的增殖抑制率显著高于单用ZD55-IL-24或5-FU(P<0.05);最后,用Hoechst33258染色法观察了细胞凋亡,结果也显示联合应用ZD55-IL-24和5-FU组的细胞凋亡现象比单用的显著。本研究初步证实了ZD55-IL-24显著提高了NCI-H460对化疗药物的敏感性,联合疗法对肿瘤细胞的杀伤作用明显增强。
- 何国清罗小芳雷文孔彦平马卉王毅刚
- 关键词：5-FU凋亡
