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国家自然科学基金(30270658)

作品数:2 被引量:7H指数:2
相关作者:张志谦李金萍胡颖宋琳更多>>
相关机构:北京肿瘤医院更多>>
发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
相关领域:生物学自动化与计算机技术更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学
  • 1篇自动化与计算...

主题

  • 2篇信号肽
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇生长激素
  • 1篇重组蛋白
  • 1篇细胞
  • 1篇金属蛋白
  • 1篇金属蛋白酶
  • 1篇基质
  • 1篇基质金属
  • 1篇基质金属蛋白...
  • 1篇基质金属蛋白...
  • 1篇激素
  • 1篇分泌表达
  • 1篇分泌表达载体
  • 1篇PCDNA3
  • 1篇COS-7
  • 1篇COS7细胞
  • 1篇PEX
  • 1篇SIGNAL

机构

  • 2篇北京肿瘤医院

作者

  • 2篇张志谦
  • 1篇胡颖
  • 1篇李金萍
  • 1篇宋琳

传媒

  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇中国生物工程...

年份

  • 1篇2007
  • 1篇2005
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
生长激素信号肽可诱导重组蛋白外分泌表达被引量:4
2005年
Signal peptide capable of efficiently directing many protein secretion in mammalian cells is one of the key elements in recombinant protein production,gene therapy and the development of DNA vaccines.In order to explore the possibility of rat growth hormone signal peptide as such an element,a new vector based on the mammalian expression vector pcDNA3 was constructed by employing rat growth hormone(rGH) signal peptide as leading sequence,followed by multiple cloning sites,the myc epitope-tag and 6×his purification tag in the expression cassette.The vector was validated by successfully expressing and secretion of chick MMP-2 C-terminal PEX domain,a potential angiogenesis inhibitor,and tandem peptide repeats of myc epitope-tag in COS-7 cells.These results suggest that rat growth hormone signal peptide is effective in the mediation of recombinant protein expression and secretion,and this vector provides a new tool for universal cloning and secretion of exogenous proteins in mammalian cells.
张志谦李金萍胡颖
关键词:重组蛋白生长激素信号肽SIGNALSIGNALPCDNA3COS-7
MMP-9信号肽高效诱导PEX重组蛋白在COS7细胞中分泌表达被引量:3
2007年
为了便于收集和纯化,重组蛋白常需要引导至真核细胞外。蛋白能否分泌主要取决于其是否含有信号肽,由于不同信号肽诱导蛋白分泌的效率不同,高效信号肽的筛选已成为生物工程领域提高重组蛋白产量的重要策略之一。为了筛选诱导MMP-2C末端PEX在COS7细胞中高效分泌表达的信号肽,在PEX的N末端分别融合大鼠生长激素(rGH)、小鼠IgGκ链和人基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase9,MMP-9)的信号肽并比较三种信号肽引导PEX分泌表达的效率。Western免疫印迹和ELISA蛋白定量检测表明MMP-9的信号肽引导PEX蛋白分泌的效率约为其它两种信号肽的两倍。利用Ni-NTA亲和柱对细胞培养基中的PEX进行纯化,蛋白产量约为1mg/L,纯化的PEX重组蛋白具有抑制鸡尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)血管发生的作用。以上结果提示MMP-9的信号肽有效诱导具有生物活性的PEX重组蛋白在COS7细胞中分泌表达。
宋琳张志谦
关键词:基质金属蛋白酶-9信号肽分泌表达载体PEX
共1页<1>
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