国家大学生创新性实验计划(091042324)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
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- 相关机构：山东出入境检验检疫局中国海洋大学更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 哈维氏弧菌铁超氧化物歧化酶基因表达及免疫作用研究被引量：4
- 2012年
- 哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是鱼虾等海水动物的重要病原菌。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase)通过催化超氧阴离子自由基(O2)形成O2和H2O2,以保持细胞自由基产生和清除之间的平衡,在病原菌适应环境及细菌致病性方面发挥重要作用。用PCR从哈维氏弧菌基因组扩增得到600 bp的目的片段,序列分析表明与弧菌Fe-SOD的序列相似性为91%—99%。将目的基因片段克隆到原核表达载体进行表达。SDS-PAGE电泳分析显示纯化的蛋白为单一条带,分子量为27 kD。具有典型的Fe-SOD吸收光谱,对氯仿-乙醇和H2O2敏感,表明纯化的蛋白属于Fe-SOD。用邻苯三酚自氧化法测得酶的最适pH 7,最适温度20℃。该酶在pH6—8的范围内稳定,当温度超过40℃时酶的活力迅速丧失。纯化的重组蛋白免疫大菱鲆,4周后用致病性哈维氏弧菌进行人工感染试验,对大菱鲆的免疫保护率为80.00%。Western blot可以检测到免疫大菱鲆的血清中的特异抗体。
- 辛瑞晓易飞张蕊徐涛玄璞刘瑞贾俊涛陈吉祥
- 关键词：哈维氏弧菌超氧化物歧化酶基因免疫原性
