云南省省院省校科技合作计划项目(2003ZFBBE00A03)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：黄富礼韦嘉江元森刘怀鄂董坚更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院昆明医学院第一附属医院泸州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：云南省省院省校科技合作计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠肝细胞、Kupffer细胞体外共同培养的初步研究被引量：2
- 2007年
- 目的研究SD大鼠Kupffer细胞与肝实质细胞体外共同培养时肝实质细胞生长、形态及功能状况.方法原位二步IV型胶原灌注法联合Percoll液密度梯度离心法分离肝实质细胞与Kupffer细胞;体外进行两种细胞单独培养、肝细胞与Kupffer细胞按6∶1比例共同培养,观察不同情况下肝细胞生存时间和形态,检测培养上清中白蛋白和糖的水平.结果单独培养组肝细胞的生长、增殖迅速,并向正常肝细胞的形态演变,肝细胞可培养存活至21 d;共同培养组肝细胞于48 h即开始出现少量的死亡细胞,细胞生长增值缓慢,细胞可培养存活至10 d.单独培养组上清白蛋白水平在48、96、120、144、168 h比混合培养组高(P<0.05);单独培养组上清糖水平在96、144、168 h高于混合培养组(P<0.05).结论肝实质细胞和Kupffer细胞在适宜的培养条件下可进行共培养;但共培养时肝细胞的生长、白蛋白合成功能和糖代谢会受到影响,肝细胞存活时间缩短,提示在共培养体系要实现肝实质细胞和Kupffer细胞两者良好生长和功能的协调,体外共培养条件需进一步优化.
- 朱强韦嘉黄富礼董坚刘怀鄂江元森
- 关键词：肝细胞KUPFFER细胞共培养
- 体外培养肝细胞安定代谢能力的高效液相测定法被引量：1
- 2008年
- 目的建立高效液相色谱测定体外培养肝细胞安定代谢能力的方法,通过测定肝细胞培养液中安定的浓度变化,准确反映肝细胞药物代谢功能。方法0.5ml体外肝细胞培养上清,销酸铅沉淀除去杂质,以舒乐安定为内标,用氢氧化钠调节碱性,乙醚提取后氮气吹干,甲醇溶解进样,以甲醇∶水(60∶40)为流动相,流速1.0ml/min;在紫外检测波长276nm,柱温30℃下检测分析。结果安定与内标分离良好,保留时间分别为9.34和4.65min,达峰处无杂峰干扰。标准曲线范围8.2～81.6mg/L,线性良好(r=0.999 7,n=6),批间误差0.45%～9.86%(n=5),批内误差0.2%～3.27%(n=5),最低检测浓度为8.2mg/L。样品在检测过程中保持稳定。结论本方法取样量少,专一性强,准确度高,线性范围较广,抗干扰能力强,可满足测定体外培养肝细胞的安定代谢能力研究要求。
- 吴晖韦嘉张峻杨伶俐宋贤黄富礼刘怀鄂江元森
- 关键词：色谱法高压液相肝细胞
