浙江省自然科学基金(Y307492)
- 作品数：6 被引量：48H指数：4
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- 灰葡萄孢产孢和孢子萌发条件被引量：15
- 2008年
- 以灰葡萄孢(Botrytis cinerea)菌株B05.10为试验材料,研究了培养基、温度、pH值以及某些营养因子对菌丝生长、产孢量和孢子萌发率的影响。结果表明,B05.10菌株在PSA培养基、pH 6.0,22℃培养7 d时产孢量最多达到1500×104cfu/皿;在1%水琼脂、pH 5.0,22℃条件下4 h时灰葡萄孢孢子开始出现萌发管,12 h时萌发管转变形成分枝的菌丝,添加木糖、果糖和可溶性淀粉等营养因子对提高孢子萌发率也有明显促进作用。
- 崔志峰丁贞科冯贻安汪琨朱廷恒
- 关键词：灰葡萄孢产孢分生孢子萌发
- 肉桂醛特异性抑制酵母细胞壁合成的作用机理被引量：16
- 2012年
- 基于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)及其细胞壁合成酶缺陷突变株组成的筛选模型对肉桂醛抗真菌的作用机制进行了研究。发现肉桂醛对细胞壁合成酶基因缺陷突变株及其野生型的抑制具有显著差异,对葡聚糖合酶缺陷突变株Δfks1的最低抑制浓度MIC值为8μg/mL,比野生型低8倍,肉桂醛对几丁质合酶基因缺陷突变株CHS020和CHS003的MIC值也比野生型低4倍。肉桂醛对Δfks1生长的抑制能被山梨醇等渗溶液部分挽救,经肉桂醛处理后,Δfks1的β-葡聚糖和几丁质含量分别降低了23.48%和31.94%。研究结果表明,肉桂醛特异性抑制真菌细胞壁葡聚糖和几丁质的合成是其抑制真菌细胞生长的主要机制之一。
- 汪琨徐峥汪倩雯朱廷恒崔志峰
- 关键词：肉桂醛抗真菌作用SACCHAROMYCESCEREVISIAE
- 灰葡萄孢T-DNA插入细胞壁缺陷突变体的筛选
- 2011年
- 用荧光增白剂Calcofluor White(CFW)对234株T-DNA插入灰葡萄孢突变株进行筛选,获得了3株对CFW敏感性(B-117,B-169,D-9)和1株对CFW抗性(B-62)的突变株。1.2 mol.L-1Sorbito对D-9的生长缓慢有挽救作用。在SDS培养基上D-9和野生型的差异不大,但在NaCl培养基上野生型的生长受到抑制,D-9则不受NaCl影响。在孢子萌发试验中,D-9突变株也与野生型明显不同,表现为D-9的孢子膨大、菌丝较粗、长度增加而且不弯曲。在番茄感染试验中,D-9突变株侵染番茄的毒力大幅度减弱。由此推测D-9突变株与细胞壁缺损以及致病性有关。
- 雷娜张为宏朱廷恒汪琨崔志峰
- 关键词：灰葡萄孢T-DNA插入突变体细胞壁缺陷
- 一株灰葡萄孢细胞壁完整性缺陷突变株的分子鉴定和表型分析
- 2012年
- 为探明灰葡萄孢细胞壁相关基因功能,用荧光增白剂Calcofluor White(CFW)从灰葡萄孢T-DNA插入突变体库中筛选细胞壁完整性缺陷突变株,发现一株突变株D-59对CFW的敏感性与野生型相比提高了2.8倍。通过TAIL-PCR扩增突变株的T-DNA插入位点的侧翼序列并对其进行序列分析表明,T-DNA插入于突变株BC1G_00770.1基因的外显子部位。RT-PCR的结果显示,D-59的BC1G_00770.1基因不表达。突变株D-59的表型分析表明,突变株的菌丝稀疏,菌落呈土黄色,产孢量明显下降,孢子萌发异常,致病能力减弱,细胞壁的几丁质含量下降了48%。
- 张为宏朱廷恒汪琨崔志峰
- 关键词：灰葡萄孢细胞壁缺陷T-DNA插入突变体TAIL-PCR
- 致病真菌抗药性机制的研究进展被引量：5
- 2010年
- 随着抗真菌药物的长期大量使用,致病真菌对药物的抗药性逐年增多,给真菌感染性疾病的防治带来了巨大的困难。目前,危害人类健康最严重的3种致病真菌是烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、白色假丝酵母(Candida albicans)和新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)。这些病原真菌产生抗药性的机制主要有4类,通过改变细胞内药物靶点结构以阻碍药物与之结合,提高多药转运蛋白的表达使药物从细胞中排除,细胞的补偿机制及生物被膜机制。另外,病原真菌在药物环境压力下可激活一系列感知和应对环境压力的信号传导级联机制和分子伴侣,如钙调神经磷酸酶途径、分子伴侣热激蛋白90、环磷酸腺苷/蛋白激酶A信号传导途径、酪蛋白激酶2、蛋白激酶C细胞壁完整性信号传导途径、以及糖磷脂酰肌醇修饰蛋白均与真菌抗药性有关。本文综述了上述3种病原真菌产生抗药性的机制及其涉及的信号传导途径,为进一步研究和有效防治真菌感染性疾病提供参考。
- 马宁崔志峰
- 关键词：分子作用机制信号传导
- 农杆菌介导的灰葡萄孢T-DNA插入突变体库构建及插入位点分析被引量：12
- 2010年
- 【目的】利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)进行转化,构建T-DNA插入突变体库,为从分子水平上认识灰葡萄孢的致病机制打下基础。【方法】以含有pCAMBIA 1390双元载体的农杆菌对灰葡萄孢进行转化,利用潮霉素进行筛选。对抗性稳定的转化子进行生物学和形态学观察,采用离体番茄叶片进行致病性测定。利用TAIL-PCR技术对突变体中T-DNA的旁侧序列进行克隆。【结果】得到了一些突变体,表现为生长速率减缓、产孢能力下降、致病力减弱等。克隆并分析了其中一个突变体中T-DNA插入的位置和旁侧序列。【结论】本实验建立了农杆菌介导的灰葡萄孢转化体系,构建了T-DNA插入的灰葡萄孢突变体库。用TAIL-PCR进行突变体中T-DNA旁侧序列的分析是可行的。
- 冯娟朱廷恒崔志峰汪琨
- 关键词：灰葡萄孢农杆菌介导
