黑龙江省留学归国人员基金(Lc05c11)
- 作品数:3 被引量:16H指数:3
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- 抗黄曲霉毒素M1免疫亲和柱的制备
- 目的:制备黄曲霉毒素M1污染样品的净化前处理免疫亲和柱.方法:利用无血清培养基制备的高纯度抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体和Sepharose 4B进行偶联、装柱后通过IC-ELSIA对免疫亲和柱的性能的评价确立了最佳反应条件...
- 孙兴荣裴世春柳家朋
- 关键词:黄曲霉毒素M1免疫亲和柱无血清培养基
- 抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立
- 采用Aflatoxin M1-bovine serum albumin(BSA)conjugate免疫8周齢Balb/C小鼠,4次免疫后,使小鼠产生较强免疫应答,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合、筛选,最终获得一株能...
- 裴世春
- 关键词:黄曲霉毒素M1酶联免疫吸附测定单克隆抗体
- 文献传递
- 黄曲霉毒素M1检测ELISA条件的优化及应用研究被引量:3
- 2008年
- 采用黄曲霉毒素M1与牛血清白蛋白偶联物抗原免疫Balb/C小鼠获得特异性抗体。利用此抗体,进行间接竞争ELISA法试验,确定了最佳抗原包被反应浓度为1.0μg·mL-1,最佳抗原包被条件为4℃过夜,一抗和酶标二抗IgG-HRP最佳工作浓度为1∶8000和1∶5000。建立间接竞争定量ELISA方法,该方法的最低检出限是0.08ng·mL-1,间接竞争ELISA50%抑制率浓度为0.62ng·mL-1,校正曲线的线性范围为0.04~5ng·mL-1。在此优化条件下制备的抗体检测黄曲霉毒素M1具有很高的特异性和灵敏性,具有实际应用价值。
- 裴世春郑丽娜唐彦君张园园何娜
- 关键词:黄曲霉毒素M1酶联免疫吸附测定单克隆抗体
- 抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立被引量:4
- 2008年
- 采用黄曲霉毒素M1与牛血清白蛋白偶联物免疫8周龄BALB/c小鼠,4次免疫后,使小鼠产生免疫应答,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合、筛选,最终获得1株能稳定分泌抗黄曲霉毒素M1的杂交瘤细胞株系。其染色体平均计数为90±10对,间接ELISA检测该株系培养上清的效价为1∶6400,纯化腹水效价为5000×27,与黄曲霉毒素M1及其结构类似物黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的反应率分别为100%、7%、0%。经传30代后,抗体效价稳定。并在此基础上建立了间接竞争ELISA检测方法,该方法的最低检出浓度是0.08ng/mL,校正曲线的线性范围为0.08ng/mL~5ng/mL。该方法的加标回收率为80.0%~128.3%。
- 张园园裴世春才琳何娜赵识非霍贵成
- 关键词:黄曲霉毒素M1酶联免疫吸附测定单克隆抗体
- 抗黄曲霉毒素M1免疫亲和柱的制备被引量:9
- 2011年
- 制备黄曲霉毒素M1污染样品的净化前处理免疫亲和柱。利用无血清培养基制备的高纯度抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体和溴化氰活化的Sepharose 4B进行偶联、装柱后通过IC-ELSIA对免疫亲和柱的性能评价确立了最佳反应条件。免疫亲和柱的有效柱容量为500 ng,经添加回收试验测定的平均回收率为92.46%,变异系数2.3%~7.2%。利用高纯度抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体和溴化氰活化的Sepharose 4B制备的免疫亲和柱可应用于乳制品等食品中黄曲霉毒素M1污染度测定的样品快速前处理。
- 孙兴荣裴世春柳家鹏王莹
- 关键词:黄曲霉毒素M1免疫亲和柱无血清培养基