浙江省科技厅重大科技专项重点农业项目(2009C12054)
- 作品数：5 被引量：25H指数：4
- 相关作者：黄海龙朱鹏张建成更多>>
- 相关机构：宁波博奥生物工程有限公司宁波大学嘉兴出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅重大科技专项重点农业项目浙江出入境检验检疫局科研基金浙江省科技厅公益技术研究农业项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 进境粮谷检验检疫风险管理探讨被引量：7
- 2011年
- 本文将风险管理引入进境粮谷检验检疫监管工作,提出了进境粮谷检验检疫风险管理的流程和主要措施。
- 王筱筱杨赛军李孝军王勇
- 关键词：粮谷风险管理
- 入境粮谷产品外来有害生物监测及安全性分析被引量：5
- 2013年
- 主要对浙江各口岸进境粮谷产品进行外来有害生物监测和调查,通过统计得到有害生物名录,并对有害生物的入侵作出初步评估和防治设想,为今后的相关工作提供了基础数据支持和新的思路。
- 周圆王筱筱黄雷陈宇邵炜冬
- 关键词：有害生物
- 玉米内州萎蔫病菌LAMP快速检测方法的建立被引量：4
- 2015年
- [目的]建立玉米内州萎蔫病菌的快速恒温扩增检测技术。[方法]利用Gen Bank公布的玉米内州萎蔫病菌(Clavibacter michiganensis subsp.nebraskensis,Cmn)16S-23S序列设计LAMP(loop-mediated isothermal amplification)引物,建立玉米内州萎蔫病菌LAMP检测体系,并对反应条件进行了优化。[结果]LAMP在内引物、环化引物和外引物比为6∶4∶1(30 pmol∶20 pmol∶5 pmol)的25μl体系下64℃反应30 min为最佳反应条件,且LAMP引物能从供试的7种菌株中特异性扩增出Cmn梯度性条带。以玉米内州萎蔫病菌基因组和菌悬液梯度稀释液为模板检测LAMP体系的灵敏度,结果显示,LAMP检测体系针对基因组和菌悬液的灵敏度分别达到了50 fg和3.6CFU,比普通PCR灵敏度高100倍。[结果]LAMP检测体系简单、快速、灵敏度高、特异性好,在玉米内州萎蔫病菌检测方面潜力巨大。
- 单长林李雪松李孝军周圆杨赛军王健张建成
- 关键词：LAMP
- 4种大豆种传病毒多重RT-PCR检测被引量：5
- 2011年
- 进境大豆携带的病毒主要有菜豆荚斑驳病毒(BPMV)、烟草环斑病毒(TRSV)、烟草条纹病毒(TSV)和南方菜豆花叶病毒(SBMV)等,均为大豆种传病毒,可随大豆种子实现远距离传播。本研究对这4种大豆病毒的外壳蛋白基因部分序列设计引物,并通过优化引物、模板浓度和扩增参数,在一个体系中成功对4种病毒进行了多重RT-PCR扩增,得到307bp、206bp7、17bp5、18bp共4条特异性条带,建立了能同时检测BPMV、TRSV、TSV和SBMV的多重RT-PCR检测体系。该方法快速、灵敏、简便,同时特异性强,在出入境检疫中具有广泛的应用前景。
- 李孝军殷汉华陈宇王筱筱陈峰叶露飞杨赛军
- 关键词：大豆菜豆荚斑驳病毒烟草环斑病毒南方菜豆花叶病毒
- 油菜茎基溃疡病菌LAMP-LFD检测方法的建立被引量：7
- 2016年
- 本文基于环介导等温扩增技术与横向流动试纸条相结合的方法,建立了一种应用于油菜茎基溃疡病菌(Leptosphaeria maculans)的LAMP-LFD快速检测方法。以油菜茎基溃疡病菌的ITS基因序列为靶序列,设计出一套用于LAMP-LFD检测的引物和探针,优化了反应体系与反应条件(63℃,35 min)。结果表明:只有油菜茎基溃疡病菌出现阳性条带,其他参照菌株和阴性对照均未出现阳性条带,说明LAMP-LFD检测特异性强;灵敏度检测表明,对油菜茎基溃疡病菌的检测极限可低至114 fg/μL,灵敏度比传统PCR高10倍;该方法可从进境船载油菜籽样品中成功检测出油菜茎基溃疡病菌,检测结果与传统的鉴定方法一致。LAMP-LFD检测方法能够快速检测油菜茎基溃疡病菌,具有简便、灵敏、特异性高,不依赖特殊检测设备等优点,极具推广前景。
- 周圆黄海龙李孝军单长林李雪松陈宇邵炜冬朱鹏
