浙江省自然科学基金(Y2080180)
- 作品数：7 被引量：17H指数：2
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- 犬脂肪基质干细胞体外复合珊瑚支架材料的生长特性和成骨活性被引量：1
- 2010年
- 目的:研究犬脂肪基质干细胞(adipose derived stromal cells,ADSCs)作为种子细胞复合珊瑚体外培养的生长特性和成骨活性。方法:分离犬ADSCs,成骨诱导后复合珊瑚继续培养,以未诱导ADSCs复合物为对照,进行生长曲线、DIO染色后的激光共聚焦荧光显微镜、碱性磷酸酶(AKP)和骨钙蛋白(OCN)生物化学定量检测。结果:生长曲线示7天后ADSCs在材料上生长进入平台期,共聚焦显微镜示诱导ADSCs复合珊瑚7天后生长良好;AKP检测显示成骨诱导ADSCs-材料组在各个检测点均显著高于未诱导ADSCs-材料组(P<0.05);OCN从第7天开始表达,成骨诱导ADSCs-材料组显著高于未诱导ADSCs-材料组(P<0.05)。结论:天然珊瑚是ADSCs生长和成骨转化的良好生物支架材料。
- 付全花沈海刚李钢李晔刘波
- 关键词：脂肪基质干细胞珊瑚碱性磷酸酶骨钙蛋白
- 犬脂肪基质干细胞复合珊瑚支架材料裸鼠皮下成骨的实验研究
- 2012年
- 目的:探讨犬脂肪基质干细胞(adipose derived stromal cells,ADSCs)作为种子细胞复合珊瑚支架材料在裸鼠皮下成骨的可行性。方法:体外分离培养、成骨诱导、扩增犬ADSCs,将第2代细胞接种于珊瑚支架上,形成细胞-材料复合物。倒置相差显微镜观测细胞形态,DIO染色后激光共聚焦荧光显微镜观察细胞在材料上的生长状况,细胞材料复合物植于8只裸鼠右侧背部皮下作为实验组,在左侧对称部位植入单纯珊瑚支架作为对照组。分别在移植后第4、8周取材,HE染色,进行组织学及组织形态计量学分析。结果:ADSCs倒置相差显微镜下为成纤维细胞样梭形外观,与材料共培养后共聚焦显微镜可见细胞贴附于材料表面及孔隙内生长。HE染色显示,4周时实验组可见新生骨组织形成;8周时实验组新生骨组织形成增加。图像分析显示,两个时间点实验组成骨量与对照组相比差异皆有统计学意义(P<0.05);实验组第8周成骨量高于第4周,差异也具有统计学意义(P<0.05)。结论:犬ADSCs作为种子细胞复合珊瑚支架材料可以在裸鼠皮下形成骨样组织。
- 沈海刚李晔刘波袁捷
- 关键词：脂肪基质干细胞珊瑚裸鼠
- 犬脂肪基质干细胞体外抑制淋巴细胞增殖反应的初步研究被引量：2
- 2010年
- 目的:研究犬脂肪基质干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)体外抑制淋巴细胞增殖的作用。方法:从Beagle犬腹股沟脂肪组织中分离获取脂肪基质干细胞,体外培养至第二代,1×105个/孔ADSCs刺激异体淋巴细胞,观察淋巴细胞增殖情况。以植物血凝素(PHA,2μg/mL)刺激淋巴细胞后,分别以1×102～5细胞/孔数量的异体ADSCs加入反应体系中,观察淋巴细胞增殖抑制情况。分别以1×102～5细胞/孔数量的"第三者"ADSCs加入双向混合淋巴细胞反应体系中,观察淋巴细胞增殖抑制情况。通透性隔离腔培养的ADSCs加入混合双向淋巴细胞反应体系中,观察淋巴细胞增殖抑制情况。结果:ADSCs刺激同种异体淋巴细胞体外增殖作用不明显;ADSCs可明显抑制PHA刺激的淋巴细胞增殖(P<0.05);"第三者"ADSCs可明显抑制双向混合淋巴细胞反应(P<0.05),抑制作用呈ADSCs细胞数量依赖性;隔离腔培养的ADSCs也可明显抑制双向混合淋巴细胞反应(P<0.05)。结论:ADSCs在体外具有抑制淋巴细胞增殖的作用,具有一定的调节淋巴细胞反应的能力。
- 刘波朱金土曹毅徐少骏王树军
- 关键词：淋巴细胞
- 人脂肪干细胞复合珊瑚支架在三维培养下成骨活性的初步研究
- 目的研究人脂肪干细胞(adipose de rived stromal cells,ADSCs)作为种子细胞复合珊瑚支架材料在体外三维培养下的成骨活性。方法取行脂肪抽吸术患者的脂肪组织,Ⅰ型胶原酶消化进行培养,贴壁细胞传...
- 朱金土刘波
- 关键词：脂肪干细胞珊瑚碱性磷酸酶骨钙蛋白
- 文献传递
- 人脂肪干细胞复合珊瑚支架在三维培养下成骨活性的初步研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨人脂肪干细胞（ADSCs）作为种子细胞复合珊瑚支架材料在体外三维培养下的成骨活性。方法取行脂肪抽吸术患者的脂肪组织，I型胶原酶消化进行培养，贴壁细胞传代，取第2代细胞进行诱导，培养基中添加成骨诱导剂地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸和维生素D3。成骨诱导后复合珊瑚继续培养，以未诱导的ADSCs复合物为对照，进行生长曲线、DIO染色后的共聚焦荧光显微镜、碱性磷酸酶（AKP）和骨钙蛋白（OCN）生物化学定量检测。结果7～8d后ADSCs在材料上生长进入平台期，诱导ADSCs复合珊瑚7d后生长良好。诱导ADSCsAKP表达随着时间的推移不断增强，而且在检测的各个时间点，诱导ADSCsAKP表达水平均明显高于未诱导ADSCs（均P〈0．05）。诱导ADSCs在珊瑚支架上第7天后检测到OCN表达，并一直增高，且从第7天开始OCN表达均明显高于未诱导ADSCs（均P〈0.05）。结论脂肪干细胞复合珊瑚支架在三维培养下能够向成骨细胞表型分化。
- 朱金土刘波车菲尚兴红高寿松
- 关键词：脂肪干细胞珊瑚碱性磷酸酶骨钙蛋白
- 自体脂肪干细胞复合珊瑚修复犬颅骨标准缺损的初步研究被引量：11
- 2009年
- 目的应用自体脂肪干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）复合珊瑚构建组织工程化骨，修复犬颅骨标准缺损。方法体外扩增培养、成骨诱导Beagle犬ADSCs，将第2代细胞接种在珊瑚支架上共同培养。制造实验犬双侧颅骨全层标准缺损（20mm×20mm），一侧以细胞材料复合物修复作为实验组（n=7），另一侧以单纯珊瑚材料修复作为对照组（n=7）。术后24周分别通过影像学、大体形态观察、生物力学检测、组织学方法检测颅骨缺损的修复效果。结果成骨诱导的犬ADSCs体外呈现成骨特性，在珊瑚支架上生长良好。3D—CT重建显示术后12周实验组有新生骨痂形成，对照组材料大部分降解；24周时实验组为骨性愈合，对照组为骨不连。24周时实验组缺损修复百分比为（84．19±6．45）％，显著高于对照组的（25．04±18．82）％（P〈0．01）。大体观察见实验组由新生骨痂修复缺损，对照组缺损边缘可见少量骨痂形成，主要为软组织充填；24周生物力学检测修复组织能耐受的最大压力载荷，实验组为（73．45±17．26）N，为犬顶骨最大压力负荷（104．27±22．71）N的70％，两者比较差异有统计学意义（P〈0．01），对照组为软组织无法完成上述检测。HE染色见实验组有较多成熟骨呈骨性愈合，对照组为纤维性愈合。结论自体成骨诱导的ADSCs复合珊瑚形成的组织工程化骨可修复犬颅骨标准缺损。
- 刘波崔磊刘广鹏曹谊林朱金土曹毅
- 关键词：脂肪干细胞颅骨珊瑚
- 脂肪干细胞定向诱导分化为成骨细胞及其鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨将脂肪干细胞定向诱导分化为成骨细胞的方法并对所诱导细胞的成骨特性进行鉴定。方法:取行脂肪抽吸术患者的脂肪组织,I型胶原酶消化进行培养,贴壁细胞传代,取第2代细胞进行诱导,培养基中添加成骨诱导剂地塞米松(0.01μM)、β-磷酸甘油钠(10mM)、2-磷酸抗坏血酸(50μM)和1,25-(OH)2VitD3(10mM)。鉴定诱导细胞的成骨特性:碱性磷酸酶(AKP)定量检测,免疫荧光化学检测骨钙素(OCN)、骨桥素(OPN)、I型胶原表达,Alizarn Red染色检测钙结节形成,RT-PCR检测AKP和OPN表达。结果:第2代脂肪干细胞诱导后AKP表达自第3天起各个检测点(第3、7、14、21、28天)诱导组与对照组差异皆具有统计学意义(P<0.05),免疫荧光检测OCN、OPN及I型胶原表达阳性,Alizarn Red染色可见钙结节形成,RT-PCR检测诱导组AKP和OPN表达阳性。结论:人ADSCs能够向成骨细胞表型诱导分化。
- 刘波朱金土曹毅高寿松余土根
- 关键词：组织工程骨脂肪干细胞成骨诱导成骨分化
- 未分化骨髓基质干细胞体外抑制淋巴细胞增殖反应的初步研究
- 2011年
- 目的:研究犬未分化骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)体外抑制淋巴细胞增殖的作用。方法:从犬骨髓组织中分离获取骨髓基质干细胞,体外培养至第二代,1×105细胞/孔BMSCs刺激异体淋巴细胞,观察淋巴细胞增殖情况。以植物血凝素(PHA,2ug/mL)刺激淋巴细胞后,分别以1×102～5细胞/孔数量的异体BMSCs加入反应体系中,观察淋巴细胞增殖抑制情况。分别以1×102～5细胞/孔数量的"第三者"BMSCs加入双向混合淋巴细胞反应体系中,观察淋巴细胞增殖抑制情况。通透性隔离腔培养的BMSCs加入双向混合淋巴细胞反应体系中,观察淋巴细胞增殖抑制情况。结果:BMSCs刺激同种异体淋巴细胞体外增殖作用不明显;BM-SCs可明显抑制PHA刺激的淋巴细胞增殖(P<0.05);"第三者"BMSCs可明显抑制双向混合淋巴细胞反应(P<0.05),抑制作用呈BMSCs细胞数量依赖性;隔离腔培养的BMSCs也可明显抑制双向混合淋巴细胞反应(P<0.05)。结论:犬未分化BMSCs在体外具有抑制淋巴细胞增殖的作用,具有一定的调节淋巴细胞反应的能力。
- 沈海刚李晔刘波
- 关键词：淋巴细胞
