浙江省自然科学基金(Y207360)
- 作品数：5 被引量：11H指数：3
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- 脂多糖刺激单核细胞上清对成骨细胞Runx2/Cbfα1表达影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察牙龈卟啉菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对成骨细胞Runx2/Cbfα1表达的影响。方法收集经100 ng/ml Pg-LPS刺激的单核巨噬细胞RAW264.7培养24 h后上清,以20%的稀释浓度的分别作用于MC3T3-E1细胞1、6、12、24、48、72 h后,采用半定量RT-PCR与Western-Blot检测细胞Runx2/Cbfα1在基因与蛋白水平上的差异性表达。结果成骨细胞MC3T3-E1在20%稀释浓度的培养上清刺激后,半定量RT-PCR法发现Runx2/Cbfα1基因表达显著受抑制,且呈时间依赖性,72 h降到最低;Western-Blot检测显示细胞Runx2/Cbfαa1蛋白表达6 h后开始下降,72 h降至最低。结论 Pg-LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清能抑制小鼠成骨细胞Runx2/Cbfα1的表达且与时间呈一定相关。
- 叶洁邓辉徐春燕王海燕胡荣党
- 关键词：脂多糖成骨细胞
- 炎性刺激下张应力对成骨细胞核心结合因子α1表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察成骨细胞在牙龈卟啉菌脂多糖(Pg-LPS)刺激单核巨噬细胞上清培养下张应力对其核心结合因子α1(Runx2/Cbfα1)表达的影响。方法成骨细胞MC3T3-E1于Pg-LPS刺激单核巨噬细胞上清培养24h后,应用四点弯曲加力装置对细胞分别加载1000μstrain和3000μstrain循环单轴张应力0h、0.5h、1h、2h、3h、6h,采用实时荧光PCR检测细胞Runx2/Cbfα1mRNA的表达差异性。同时设非炎性刺激组为对照组。结果机械牵张力刺激下,炎性刺激组细胞和非炎性刺激组细胞Runx2/Cbfα1mRNA表达趋势相似,0.5h后升高,6h最高;炎性刺激组细胞各时点Runx2/Cbfα1mRNA表达低于非炎性刺激组(P<0.05);不同应力作用下,前3h细胞Runx2/Cbfα1mRNA表达未见明显差异,6h时3000μstrain组细胞表达高于1000μstrain组(P<0.05)。结论炎症刺激可抑制应力下成骨细胞Runx2/Cbfα1的表达,提示临床上对牙周炎静止期患者施力需谨慎。
- 胡荣党叶洁徐春燕
- 关键词：脂多糖单核细胞机械牵张成骨细胞核心结合因子Α1
- 脂多糖刺激的单核巨噬细胞培养上清液对小鼠MC3T3-E1细胞c-fos表达的影响被引量：4
- 2010年
- 目的:研究经牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)脂多糖(LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)c-fos表达的影响。方法:收集100μg/L的Pg LPS刺激RAW264.724h后的上清液,以20%稀释浓度分别作用于MC3T3-E1,分别在1、3、6、12、24、48、72h时,采用RT-PCR和Western blot检测ALP mRNA、c-fos mRNA及蛋白表达水平的变化。结果:Pg LPS刺激RAW264.7细胞培养上清作用于MC3T3-E1后,ALP mRNA表达均下降,在6h时表达最低,而c-fos的mRNA和蛋白水平均提高,分别在3h和6h时达最高水平。结论:Pg LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清可通过上调成骨细胞c-fos的表达而抑制其成骨能力。
- 徐春燕邓辉叶洁王海燕胡荣党
- 关键词：脂多糖MC3T3-E1C-FOS
- LPS刺激单核巨噬细胞培养上清对成骨细胞OPG/RANKL的影响被引量：2
- 2015年
- 目的 :观察经牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清对小鼠成骨细胞MC3T3-E1 OPG/RANKL表达的影响。方法:收集经100 ng/m L Pg-LPS刺激的单核巨噬细胞RAW264.7培养24 h后的上清,以不同稀释浓度(10%、20%、30%、40%和50%)的培养上清作用于MC3T3-E1 24h,分别通过RT-PCR、免疫印迹法(Western blotting)检测细胞OPG/RANKL基因和蛋白水平表达的变化,采用SPSS17.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果:MC3T3-E1经不同稀释浓度的培养上清刺激后,其OPGm RNA及蛋白表达随浓度的增加而显著减少(P<0.05),而RANKLm RNA及蛋白表达随浓度的增加显著增加(P<0.05)。结论:Pg-LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7培养上清可通过抑制成骨细胞OPGm RNA及蛋白的表达,增加RANKLm RNA及蛋白的表达而抑制其成骨能力,且与浓度呈一定的正相关。
- 王海燕秦化祥邓辉孙超凡胡荣党
- 关键词：LPS单核巨噬细胞成骨细胞OPG/RANKL
- 炎症状态下张应力对成骨细胞基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1表达的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察炎症状态下周期性张应力对小鼠成骨细胞（MC3T3-E1细胞）基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1表达的影响。方法收集100ng／ml的经牙龈卟啉单胞菌脂多糖（P．g-LPS）刺激小鼠单核巨噬细胞（RAW264．7细胞）24h后培养上清液，以20％稀释浓度作用于MC3T3-E1细胞24h，采用四点弯曲细胞力学加载仪对正常培养与炎症状态下培养的MC3T3-E1细胞分别加载张应力0h（对照组）、1h、3h、6h，采用荧光定量聚合酶链反应（realtimePCR）和免疫组化法检测基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的mRNA及蛋白水平表达的变化。结果炎症状态下周期性张应力作用于小鼠成骨细胞后，加力组基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的mRNA和蛋白表达量较非炎症状态下显著增加，并随着时间的延长而不断增加，且不同时间段的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。结论炎症状态下张应力可显著影响成骨细胞基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的表达，从而为炎症状态与张应力共同作用下基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1参与牙周组织细胞外基质代谢提供了理论依据。
- 林蕾蕾邓辉王海燕胡荣党
- 关键词：成骨细胞基质金属蛋白酶-13基质金属
