转基因生物新品种培育专项(2009ZX08009-130B)
- 作品数:9 被引量:112H指数:5
- 相关作者:柴团耀张玉秀孙涛柴兴苹刘金光更多>>
- 相关机构:中国矿业大学(北京)中国科学院研究生院中国科学院大学更多>>
- 发文基金:转基因生物新品种培育专项国家高技术研究发展计划国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域:环境科学与工程生物学农业科学更多>>
- 商陆耐重金属Cd关键酶抗氧化酶的研究被引量:20
- 2011年
- 研究商陆(Phytolacca americana L.)对Cd胁迫的抗氧化酶响应,对于揭示其耐Cd机制具有重要意义.商陆幼苗在200μmol/L或400μmol/L CdCl2营养液中处理4 d,叶片活性氧自由基和MDA含量升高,膜透性增加,光合速率降低,表明Cd胁迫诱导产生氧化胁迫.随着Cd处理含量的提高和时间的延长,商陆叶片SOD和POD活性迅速增加,CAT活性在400μmol/LCdCl2处理3 d后显著上升,表明抗氧化酶在清除Cd毒害产生的活性氧自由基和提高Cd耐性中有重要作用.
- 张玉秀张红梅黄智博李林峰刘金光李霞
- 关键词:重金属抗氧化酶商陆
- 水稻低Cd累积相关基因RNA干扰载体及根特异性表达载体的构建被引量:2
- 2015年
- Cd极易被水稻等作物吸收并伴随食物链在人体内累积,严重威胁人类健康.基于水稻Cd累积机制的现有研究,克隆与水稻Cd累积相关的基因Os LCD和Os HMA3,并克隆一个维管组织特异性表达的启动子Os MTP11P,利用Gateway技术及传统酶切、连接方法,成功构建适用于水稻等单子叶植物农杆菌转化的RNA干扰载体pRI-M-LCD和根特异性表达载体p CB2022-H.期望通过这2个载体共转化水稻,使大量的Cd扣留在根细胞的液泡中,限制Cd向地上部分及籽粒中的转运,从而实现Cd在水稻籽粒中的低累积.
- 陈煜娴冯珊珊柴兴苹柴团耀
- 关键词:水稻RNA干扰组织特异性表达
- 锌胁迫下小麦SSH文库的构建及初步分析被引量:2
- 2013年
- Zn是植物必需的微量元素,同时也是近年来造成环境污染的重金属元素之一.为了从基因表达水平揭示小麦Zn胁迫响应的分子机制,本研究利用抑制差减杂交(suppression subtractivehybridization,SSH)技术构建了Zn胁迫(0.5 mmol/L,1 mmol/L)下小麦的正反向SSH文库.从正反向文库中随机挑选阳性单克隆,并利用通用引物T7/Sp6对其进行验证.结果显示,正反库中分别获得307和821个EST序列,其片段长度在200~1 000 bp之间,它们反映了Zn胁迫下特异响应的基因.利用BLASTn和BLASTx将这些EST序列进行比对分析,在正、反库中分别筛选出221和641个uniESTs,其中751个uniESTs被注释(包括正库中193个和反库中558个).这些序列的功能主要涉及信号转导、抗氧化防御、转录与翻译、物质运输、核糖体结构、能量代谢,以及一些功能未知的基因.
- 柴兴苹张玉秀谭金娟王建武陈煜娴柴团耀
- 关键词:小麦基因表达
- Zn胁迫下小麦S-腺苷甲硫氨酸代谢途径关键基因表达模式分析被引量:8
- 2013年
- 从Zn胁迫下小麦幼苗的抑制差减杂交(SSH)cDNA文库中筛选出S-腺苷甲硫氨酸(SAM)代谢途径中的9个关键基因,并采用实时荧光定量PCR对其表达模式进行分析。结果表明,Zn(1mmol·L-1)胁迫下小麦的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAMS)表达呈下降趋势,而参与谷胱甘肽(GSH)和烟酰胺(NA)合成代谢的关键基因均上调表达;不同浓度Zn处理4h后,小麦SAM代谢途径中基因的快速响应存在差异。可见,Zn胁迫下,小麦SAM代谢途径中GSH和NA的合成代谢增强,GSH和NA可能参与小麦对Zn胁迫的响应及降低Zn毒害的作用。
- 柴兴苹张玉秀谭金娟冯珊珊柴团耀
- 关键词:小麦ZNS-腺苷甲硫氨酸
- 拟南芥GH3基因家族启动子序列分析被引量:4
- 2010年
- GH3基因家族是植物生长素早期响应基因家族之一.拟南芥10个GH3基因启动子序列分析表明:GH3基因的转录起始位点一般在起始密码子上游65~145bp之内,TATA box大多分布在(-24)~(-40)bp区域.MDB和MatInspector分析显示,AtGH3s基因的上游调控区域普遍存在组织和器官特异性表达元件、激素响应元件以及环境响应元件,表明GH3基因的表达受到多因素调控;同时,基因芯片数据显示AuxREs对生长素的响应非常重要,但也可能存在其他的生长素响应元件.
- 孙涛柴团耀张玉秀
- 关键词:启动子顺式作用元件
- 镉对龙葵种子萌发及子叶抗氧化酶活性的影响被引量:14
- 2012年
- 龙葵(Solanum nigrumL.)是Cd超累积植物,可用于植物冶金和Cd污染土壤的植物修复。超累积植物的生理基础研究有助于提高其对Cd的富集效率。龙葵种子在含有不同浓度CdCl(20、30、50、100、150、200μmol·L-1和300μmol·L-1)的琼脂培养基上萌发7d。结果表明,龙葵在200μmol·L-1和300μmol·L-1Cd时发芽率显著降低,而低浓度Cd(30~150μmol·L-1)胁迫下无显著差异;在Cd≥30μmol·L-1时,活力指数、发芽势均显著降低,幼苗的生长受到显著抑制。幼苗生长分析表明:在30~150μmol·L-1Cd处理下根长下降约17%~35%,显著低于200~300μmol·L-1Cd处理(下降79%~90%);株高随Cd浓度的升高逐渐下降。子叶抗氧化酶活性分析表明:100~150μmol·L-1Cd胁迫下,CAT和APX活性显著上升;在Cd胁迫下,SOD活性降低但维持在较高的活性水平。表明龙葵幼苗能忍耐小于150μmol·L-1Cd,抗氧化酶活性在抵抗Cd毒害方面发挥重要作用。
- 刘金光张玉秀史沛丽柴团耀
- 关键词:镉萌发抗氧化酶
- 商陆寡肽转运蛋白基因PaOPT的cDNA全序列克隆及表达分析被引量:2
- 2012年
- 从垂序商陆(Phytolacca americana)的重金属镉胁迫下商陆幼苗叶片的正反向抑制性消减杂交文库(SSH文库)中,获得商陆寡肽转运蛋白基因的EST序列.利用RACE的方法克隆到该基因的全序列cDNA(PaOPT,GenBank注册HQ647015).PaOPT基因在进化中的地位分析表明:它可能属于OPT3基因家族.利用实时荧光定量PCR的方法,分析PaOPT的组织表达特异性以及商陆种子成熟及萌发过程的表达模式.结果表明,该基因是一个在种子中特异性表达的基因,预测它对植物的生长发育有着重要的作用.
- 金力郑宏春柴团耀
- 关键词:商陆
- 超富集植物遏蓝菜对重金属吸收、运输和累积的机制被引量:29
- 2010年
- 遏蓝菜Thlaspi caerulescens可以在其地上部累积大量重金属如锌、镉等,是公认的超富集植物。由于该植物生物量小,不宜直接用于重金属污染的土壤植物修复,而被广泛作为一种模式植物来进行重金属富集机制研究。遏蓝菜对重金属离子的累积大致经过螯合剂解毒、地上部长距离运输以及在液泡中的储存等生理过程。已经发现的植物体内的金属螯合剂——有机酸、氨基酸、植物络合素(PCs)、金属硫蛋白(MT)和尼克烟酰胺NA等,区室化以及长距离运输相关的转运蛋白——ZIP(ZRT/IRTlike protein)、CDF(Cation diffusion facilitator)、Nramp(Natural resistance and macrophage protein)和HMA(Heavy metal ATPase)等家族,以上各种基因、多肽与蛋白等共同参与了植物对金属累积与耐受过程并发挥各自重要的作用。以下主要介绍了遏蓝菜重金属超富集相关的基因、多肽和蛋白,以及它们在重金属螯合作用和运输过程中的功能。
- 刘戈宇柴团耀孙涛
- 关键词:重金属螯合转运
- 印度芥菜(Brassica juncea L.)重金属耐性机理研究进展被引量:33
- 2011年
- 印度芥菜可富集/忍耐Cd、Zn等多种重金属,是研究植物修复技术的一种模式植物。高浓度的重金属离子会改变植物的基因表达、细胞形态、细胞结构,最终使植物生长受抑,甚至死亡。印度芥菜高效的抗氧化系统、损伤修复系统以及对重金属的螯合、区域化可部分解除重金属的毒性,缓解重金属离子的毒害作用。利用基因工程技术在印度芥菜中导入重金属耐性及运输相关基因可大幅度提高其重金属富集能力,在重金属污染修复方面具有广阔的应用前景。
- 孙涛张玉秀柴团耀
- 关键词:印度芥菜重金属胁迫超富集植物植物修复技术