黑龙江省青年科学基金(QC07C46)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 番茄长花柱品系T431低温胁迫下正向差减文库的构建及ESTs分析
- 2010年
- 本研究以番茄长花柱品系T431为材料利用抑制性消减杂交技术(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)构建了低温胁迫下的番茄长花柱突变体SSH cDNA正向差减文库,获得398个阳性克隆。经菌液PCR和Reverse Northern Blot杂交方法结合剔除假阳性,利用BLAST在GenBank数据库进行序列相似性比对,获得有功能的ESTs173个。通过对所获得的ESTs序列进行功能分类发现,其中参与初级代谢、能量代谢、抗病/防御反应和信号传导等过程的基因相对较多。此外,还有一些基因参与植物体内蛋白质合成与加工、物质运输、转运调控与生殖发育等过程。
- 王勇谭丽丽燕正民徐亚英陈典
- 关键词：番茄低温胁迫ESTS
- 应用PCR方法向基因内部引入序列的策略研究被引量：1
- 2011年
- 应用PCR方法,利用3条引物与2个模板,分别采用一步PCR、两步PCR、三步PCR扩增策略,向cre基因内部引入一段内含子序列,以达到基因改造的目的。结果表明,利用一步PCR的策略,难以扩增得到目的基因,利用二步PCR的策略,虽然可以得到目的条带,但存在非特异扩增;通过三步PCR的策略,即第一步PCR扩增产物作为第二步扩增反应的引物,进行小循环的单引物扩增,第三步以第二步产物为模板进行双引物扩增的方法,可以高效扩增得到目的条带。说明三步PCR策略为基因改造的理想方法。
- 徐亚英王勇罗宏陈典
- 关键词：基因改造内含子CRE基因PCR
