吉林省科技发展计划基金(20100950)
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
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- M.natoriense TNJL143-2菌的D-氨基酰化酶的固定化研究
- 2020年
- D-氨基酰化酶可用于D-氨基酸的生产,本研究利用来源于Microbacterium natoriense TNJL143-2的D-氨基酰化酶,分别通过琼脂糖包埋、介孔二氧化硅MCM-41和SBA-15吸附,制备了三种固定化酶,并对三种固定化酶的固定化条件、酶学性质、活性保持时间、重复使用次数、米氏常数等参数进行了研究。结果表明,MCM-41载体固定化酶的蛋白固定率为91.6%,SBA-15载体固定化酶的蛋白固定率为88.0%,琼脂糖包埋法蛋白固定率为79.5%。MCM-41、SBA-15以及琼脂糖三种载体固定化酶最适反应pH均为7.0,最适反应温度范围均为37℃。在固定化酶的活性保持时间以及重复利用活性方面,SBA-15固定化酶同样优于其他两种固定化酶。以D型苯丙氨酸(D-Phe)为底物时,琼脂糖包埋固定化酶的Km为28.8 mol/L,SBA-15固定化酶的Km为25.9 mol/L,MCM-41固定化酶的Km为25.0 mol/L。同时本文还探索了三种固定化酶的pH使用范围及酸碱稳定性、温度使用范围及热稳定性,结果显示,SBA-15作为固定化载体均表现出较广的适用范围及较高的稳定性。在不同条件的反应体系中,SBA-15固定化酶的蛋白损失率始终小于其他两种固定化酶。
- 贾超然于笑晨刘蔚孙唯轩陈丹阳刘建
- 关键词:固定化酶
- 睾丸酮丛毛单胞菌LysR基因的克隆及对3α-HSD/CR表达的调节被引量:3
- 2011年
- 采用分子克隆技术构建睾丸酮丛毛单胞菌LysR基因表达载体,并通过与PAX1共转化来分析LysR基因对3α-HSD/CR在E.coliHB101的表达调节。结果表明:酶切和DNA测序显示,所构建的表达质粒pKtac1-LysR含有编码LysR的基因序列且稳定性较好;共转化结果显示,加入重组质粒pKtac1-LysR的3α-HSD/CR的表达量显著高于加入pKtac1的3α-HSD/CR的表达量(P<0.01)。
- 李明堂王清爽于源华
- 关键词:睾丸酮丛毛单胞菌
- 水通道蛋白AQP5在小鼠骨髓间充质干细胞中的免疫定位
- 2013年
- 水通道蛋白家族是由能够转运水和小的溶质分子透过细胞膜的膜蛋白分子构成。AQP5属于水选择性通道,其在机体组织内的表达非常广泛。间充质干细胞主要来源于骨髓和脂肪组织,能够诱导分化成间充质组织中的各类细胞。采用PCR、免疫印迹和免疫荧光技术分析了水通道蛋白AQP5在小鼠骨髓间充质干细胞中的表达情况。结果表明:AQP5在RNA和蛋白质水平上都有表达,并且与CD90,CD44在小鼠骨髓间充质干细胞膜上共表达。
- 李明堂王清爽冀伟
- 关键词:水通道蛋白AQP5免疫定位