浙江出入境检验检疫局科研基金
- 作品数：93 被引量：369H指数：10
- 相关作者：罗鹏吴忠华吕沁风郑伟沈燕更多>>
- 相关机构：浙江国际旅行卫生保健中心浙江大学台州出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目浙江省重大科技专项基金浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生理学轻工技术与工程更多>>
- 舟山口岸输入性医学媒介生物监测及防控对策被引量：1
- 2010年
- 〔目的〕掌握舟山口岸输入性医学媒介生物特征,为制定有效防控措施提供依据。〔方法〕分析舟山口岸2009年入境国际航行船舶截获医学媒介生物种群构成、季节消长、地区来源和船舶携带媒介等情况特征,评估各风险因子危害性,进而提出防控措施和建议。〔结果〕2009年舟山口岸截获143批次8种媒介生物,德国小蠊为主要截获种类,媒介生物的截获没有明显季节消长规律,携带医学媒介生物的船舶以东南亚国家来源为主,修理船携带媒介生物风险高于其他船舶。〔结论〕不同种类与来源地的入境国际航行船舶携带医学媒介生物差别较大,应根据风险因子不同,采取有效措施做好输入性医学媒介生物及相关传染病的监测防治工作。
- 周炯林胡攀丁言良林纲
- 关键词：输入性医学媒介生物
- 不同DNA抽提方法对普通PCR和实时荧光定量PCR方法检测家蚕微孢子虫的影响被引量：9
- 2011年
- 为了优选快速、灵敏、特异的家蚕微孢子虫Nosema bombycis分子检测方法和DNA抽提方法,本文通过对家蚕微孢子虫TaqMan探针荧光定量PCR检测方法和SYBRGreen荧光定量PCR检测方法的建立以及反应体系优化,并与普通PCR方法进行比较;再采用4种不同DNA抽提方法分别对PCR和实时荧光定量PCR方法检测家蚕微孢子虫悬浮液的效果评价。结果显示:不经过DNA抽提,直接将家蚕微孢子虫发芽液进行PCR反应的效果优于其他方法,检测灵敏度由高到低依次为直接法、酚/氯仿抽提法、动物组织DNA试剂盒抽提法和植物组织DNA试剂盒抽提法;TaqMan探针法检测家蚕微孢子虫发芽液的灵敏度和SYBRGreen法相近,达到微孢子102个/mL,两者均优于普通PCR方法。实验表明,直接采用发芽液结合荧光定量PCR方法检测家蚕微孢子虫最为简便、快速、灵敏。该研究结果将有助于提高家蚕微粒子病监控技术和检疫能力,对家蚕微粒子病的检疫和防治具有积极意义。
- 何永强吴姗鲁兴萌邱海洪帅江冰张晓峰王素华徐国群李光才董强
- 关键词：家蚕微孢子虫荧光定量PCR家蚕微粒子病检疫
- 凝胶渗透色谱净化-超高效液相色谱-串联质谱法测定皮革制品中7种尼泊金酯类防腐剂被引量：8
- 2011年
- 利用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)结合凝胶渗透色谱(GPC)技术,建立了一种快速分离和测定皮革制品中7种尼泊金酯类防腐剂的分析方法。样品经超声提取、浓缩、GPC净化,甲醇-水溶液(1∶1,v/v)溶解,采用Acquity UPLCBEH C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以甲醇和水为流动相,梯度洗脱,电喷雾负离子模式电离,采用多反应监测模式检测和外标法定量。该方法在0.1～1.0 mg/L范围内线性关系良好(r>0.99);在添加量为0.5～3.0 mg/kg时,平均回收率为(79.44±5.67)%～(98.07±9.50)%,相对标准偏差(RSD)为4.24%～14.00%;方法的检出限(LOD)为4～12μg/kg,定量限(LOQ)为13.2～39.6μg/kg。该方法操作简便、快捷、灵敏、准确,适合皮革中多种尼泊金酯类防腐剂的确证和定量测定。
- 吴刚赵珊红吴俭俭董锁拽郭方龙王力君叶庆富
- 关键词：凝胶渗透色谱超高效液相色谱-串联质谱尼泊金酯防腐剂
- 大米和米制品Bt63转基因检测PCR方法的灵敏度研究被引量：11
- 2009年
- 采用普通PCR法和荧光定量PCR法对Bt63转基因大米的检测灵敏度进行对比研究。根据大米内源蔗糖磷酸合成酶基因SPS和结构特异性基因Btc的基因序列,选用特异性的引物和探针进行研究,经验证试验表明具有专一性,能用于品系鉴定。在灵敏度试验中,阳性转基因大米按照不同质量百分比进行梯度稀释,提取DNA进行PCR扩增。结果表明,普通PCR检测的灵敏度在0.1%左右,而荧光定量PCR检测的灵敏度为0.01%,是普通PCR检测的10倍以上。应用两种方法对实际样品进行检测,都得到了较明显的内源SPS基因的扩增,而Btc基因都是阴性。荧光定量PCR方法避免了电泳检测的步骤,具有更高的安全性和简便性,因此日常检测中,利用荧光定量PCR技术检测Bt63转基因大米及其产品是一种快速、灵敏和准确的检测手段。
- 吴志毅张明哲陈曦
- 关键词：转基因检测荧光定量PCR
- 液相色谱-串联质谱法同时测定葡萄酒中6种吡唑类杀菌剂被引量：9
- 2015年
- 采用液相色谱-串联质谱建立了同时测定葡萄酒中戊苯吡菌胺、氟唑菌酰胺、吡唑萘菌胺、吡咪唑、联苯吡菌胺、呋吡菌胺6种吡唑类杀菌剂的分析方法。样品用超纯水稀释混匀,经HLB固相萃取柱净化后,采用Agilent ZOBRAX C18色谱柱（2.1 mm×150 mm,5μm）分离;以0.1%乙酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,目标分析物在多反应监测（MRM）模式下进行定性分析,外标法定量。在优化实验条件下,6种吡唑类杀菌剂在1.0~50.0μg·L-1范围内呈良好的线性关系,相关系数（r2）均不低于0.999 3,方法定量下限为0.1~0.4μg·kg-1。在低、中、高3个加标水平下的平均回收率为72.8%~92.6%,相对标准偏差（RSD）不大于6.7%。该方法简便快速、灵敏度高,可用于葡萄酒中吡唑类杀菌剂的测定。
- 陈祥准夏碧琪黄芙珍程洁沈燕韩超
- 关键词：葡萄酒
- 双通道荧光PCR快速检测水产品中主要致病性弧菌的研究
- 2011年
- 目的:建立水产品中副溶血弧菌和霍乱弧菌快速、敏感、特异的双通道荧光PCR同步鉴别体系。方法:针对副溶血弧菌TDH基因和霍乱弧菌ctxA基因设计合成2对特异性引物和2条Taqman探针,优化体系,建立双通道荧光PCR体系。结果:建立的双通道荧光PCR体系特异性强,引物和探针之间无干扰。对副溶血弧菌和霍乱弧菌的检测灵敏度高,下限均能达到5×104CFU/mL。体系稳定,重复性好,可操作性强,两种不同浓度基因组DNA无相互抑制现象,适用于不同条件、多种样品的检测。采用该方法对140份采自舟山、象山和杭州的各类水产品进行检测,副溶血弧菌和霍乱弧菌检出率分别为25.7%和3.6%,未见霍乱弧菌和副溶血弧菌混合污染的样品,表明建立的双重荧光PCR是一种可用于水产品等样品中副溶血弧菌和霍乱弧菌的快速、灵敏、特异的鉴别方法。
- 帅江冰傅玲琳张晓峰励建荣
- 关键词：副溶血弧菌霍乱弧菌TAQMAN探针
- 石蒜绵粉蚧研究进展被引量：4
- 2017年
- 综述了石蒜绵粉蚧的形态特征、寄主及分布、分类鉴定、生物学特性、风险分析、综合防治等方面的研究进展,探讨了石蒜绵粉蚧的防控对策,并展望了今后的研究方向。
- 陈哲鲁专邵炜冬
- 关键词：寄主生物学特性
- 高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法同时测定黄酒中的单糖和低聚糖及其指纹图谱的构建被引量：4
- 2015年
- 建立了黄酒中葡萄糖、果糖、异麦芽糖、异麦芽三糖、麦芽糖、潘糖、麦芽三糖共7种糖类的高效阴离子交换色谱分离-积分脉冲安培检测的方法。以氢氧化钠和醋酸钠为淋洗液进行梯度洗脱,CarboPac^TM10阴离子交换柱进行分离。该方法可在26 min内实现黄酒中7种糖类的定量分析,在0.5-50 mg/L浓度范围内线性关系良好,样品定量限为0.1 g/L,加标回收率为76.5%-108.4%,精密度（RSD）为3.02%-8.23%。将该法用于不同厂家不同批次的绍兴加饭酒中各种糖类含量的检测,基于所得的检测结果,利用中位数法构建了标准指纹图谱,并采用夹角余弦法评价了各个样品与标准指纹图谱之间的相似度。结果初步显示,不同厂家加饭酒之间的相似度差别较大,该法可作为区别不同厂家酒的依据之一。
- 胡贝贞董文洪夏碧琪宋伟华韩超
- 关键词：高效阴离子交换色谱单糖低聚糖黄酒指纹图谱
- 醛基片PCR芯片技术在转基因玉米品系检测中的应用研究
- 2013年
- 针对9种转基因玉米品系Bt11、TC1507、Bt176、MON810、MON863、GA21、NK603、Mon88017、MIR604进行醛基片PCR芯片高通量检测和条件优化。特异性和灵敏度试验表明,醛基片PCR芯片的特异性较好,能应用于转基因玉米品系鉴定。而该方法应用于转基因检测的灵敏度为5%,有待于后续试验进一步优化。
- 张明哲张晓峰陈曦吴姗陈笑梅周圆
- 关键词：转基因检测品系鉴定
- 浙江省妊娠期妇女戊型肝炎病毒抗体和核酸检测分析
- 2016年
- 目的分析浙江省妊娠期妇女HEV感染状况及分子流行特征。方法采用ELISA对2013年至2015年98236名妊娠期妇女进行HEV IgM抗体筛查，并利用套式PCR法对IgM抗体阳性样本进行HEV核酸检测，进一步扩增核酸阳性样本的HEV开放阅读框（ORF）2全基因，分析其分子流行病学特征。结果共检出352例HEV IgM抗体阳性，总阳性率为0．36％，除2例合并HBV感染外，其余均为单纯HEV IgM抗体阳性。核酸检测有3份IgM阳性血清检出HEV特异性核酸片段。进一步分析发现，3株散发性人HEV毒株均属于基因4型HEV。3株样本毒株虽然核苷酸同源性较高，氨基酸同源性更是超过97％，但在进化关系上却不在同一分支内。样本序列与国内外其他地区的毒株相比变异较大，包含1～460位核苷酸和620-870位核苷酸两个高变区，但其氨基酸位点同义替换率与非同义替换率相似，进化压力以中性选择为主。结论浙江省内妊娠期妇女HEV感染率与已报道的普通人群感染率相似。其中分离的3株HEV毒株均为人畜共患型的HEV4毒株，变异率较高。
- 李爱云帅江冰马裕朱宇宁张晓峰
- 关键词：妊娠肝炎病毒戊型免疫球蛋白MORF2
