国家民委科研基金(2009-158-09XB02)
- 作品数：6 被引量：23H指数：3
- 相关作者：臧荣鑫蔡勇杨具田吴建平卢建雄更多>>
- 相关机构：西北民族大学甘肃农业大学第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家民委科研基金甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目兰州市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 绵羊前体脂肪细胞的原代培养及分化被引量：10
- 2010年
- 本试验旨在建立绵羊前体脂肪细胞的原代培养方法,探讨反刍动物脂肪沉积机理。以1日龄羔羊的肾周脂肪组织为试验材料,采用组织块法和酶消化法分离培养前体脂肪细胞,观察形态学变化,测定生长曲线,油红O染色检测细胞内脂肪含量,并用实时定量PCR法检测脂蛋白脂酶、过氧化物体增殖剂活化受体γ、脂肪酸合酶的表达量。结果表明:原代培养的细胞成分均一、增殖旺盛、分化率高,具有前体脂肪细胞的形态特征和基因表达特性,为绵羊前体脂肪细胞。本试验成功建立了绵羊前体脂肪细胞原代培养方法,并在体外重现了增殖和分化的过程。
- 蔡勇阿依木古丽杨具田马忠仁卢建雄臧荣鑫吴建平
- 关键词：绵羊前体脂肪细胞原代培养分化
- 哺乳动物ACC_α基因启动子结构特征及调控被引量：1
- 2011年
- 乙酰辅酶A羧化酶(ACC)在哺乳动物脂肪酸合成和分解代谢中发挥着重要作用.ACC包括ACCα和ACCβ2种形式,由不同基因编码,其中ACCα主要在脂肪酸合成过程中起作用.哺乳动物ACCα基因的启动子主要包括3个:PI、PⅡ和PⅢ,而反刍动物和啮齿动物还包括第4个启动子PIa,各启动子具有不同的结构特征.
- 何会金臧荣鑫冉永峰
- 关键词：哺乳动物启动子
- 兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因克隆及其同源性比较被引量：5
- 2013年
- 【目的】克隆兰州大尾羊心脏型肪酸结合蛋白(H-FABP)基因全长cDNA序列,为研究绵羊H-FABP生物学作用和生产应用提供理论依据。【方法】根据已知哺乳动物H-FABP基因cDNA序列,设计5'和3'特异引物,运用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得兰州大尾羊H-FABP基因全长cDNA序列。【结果】扩增获得兰州大尾羊5'端425 bp、3'端231 bp片段和177 bp中间片段,拼接获得748 bp兰州大尾羊H-FABP基因全长cDNA序列(GenBank登录号:JQ780322)。兰州大尾羊H-FABP基因ORF长402 bp,编码133个氨基酸。核苷酸序列分析显示兰州大尾羊H-FABP基因序列与大多数哺乳动物相似,但其第66位发生的碱基转换(T←→G)引起所编码的第22位天门冬氨酸(N)不同于其它所有物种的赖氨酸(K)。构建的基因进化树分析结果显示兰州大尾羊与山羊亲缘关系最近。预测兰州大尾羊H-FABP蛋白质的空间结构与山羊和牛H-FABP类似,由2个α螺旋和10个反向平行的β折叠组成,10个折叠片围成一个桶状结构,疏水性残基位于桶内,用于结合脂肪酸。【结论】克隆了兰州大尾羊H-FABP基因,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。
- 徐红伟柏家林冯玉兰曹忻蔡勇金方圆达小强杨具田臧荣鑫
- 关键词：兰州大尾羊H-FABP基因CDNA末端快速扩增
- 绵羊ACCA基因编码蛋白结构和功能的生物信息学分析被引量：3
- 2011年
- 绵羊乙酰辅酶A羧化酶α基因编码蛋白由2 346个氨基酸组成,其编码蛋白无信号肽,无跨膜区,含有多个磷酸化位点.三维预测结果表明,该蛋白含有36个α螺旋,36个β折叠,73个β转角,功能上具有ATP依赖的氨甲酰磷酸合成酶、生物素羧基载体蛋白和羧基转移酶等结构域.绵羊该蛋白与山羊和牛的同源性非常高.这一结果可为动物中ACCA蛋白深入的结构与功能分析及利用提供进一步的信息与参考.
- 何会金臧荣鑫冉永峰欧阳霞辉
- 关键词：绵羊蛋白质结构预测生物信息学
- 五个地方绵羊品种FAS基因3′-UTR区单核苷酸多态性研究被引量：3
- 2010年
- 【目的】探究脂肪酸合成酶(FAS)基因3′端非翻译区(3′-UTR)在绵羊地方品种中的遗传多态性,为进一步揭示地方绵羊品种间遗传分化、开展肉质性状的关联分析和表达调控等研究提供依据。【方法】采用PCR-SSCP和DNA测序技术对兰州大尾羊(38只)、滩羊(58只)、甘加羊(40只)、欧拉羊(30只)和乔科羊(39只)五个地方绵羊品种205只个体的脂肪酸合成酶(FAS)基因3′-UTR进行单核苷酸多态性(SNPs)检测和遗传多态性分析。【结果】在这五个地方绵羊品种的FAS基因3′-UTR区中,有951位点和1005位点2个多态位点;两位点分别存在AA、Aa、aa和EE、Ee、ee各三种基因型,而aa和ee基因型未检测到;AA和EE基因型频率高于Aa和Ee基因型频率,基因型AA和EE为优势基因型;A和E两个等位基因频率高于a和e等位基因频率,为优势等位基因。适合性检验表明,这5个地方绵羊品种在951位点和1005位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态。独立性检验表明:在951位点,兰州大尾羊与滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊之间表现为差异显著(0.010.05);在1005位点兰州大尾羊、滩羊、欧拉羊、甘加羊和乔科羊品种之间均表现为差异不显著(P>0.05)。测序结果表明,951位点在FAS基因在其转录产物mRNA的951位所对应处有一处C→T突变;1005位点在FAS基因在其转录产物mRNA的1005位所对应处有一处A→G突变。FAS基因mRNA二级结构预测结果显示:951位点的突变能导致其二级结构发生了明显的改变,而1005突变不会改变其二级结构。【结论】五个地方绵羊品种在FAS基因3′-UTR区有951位点(C→T)和1005位点(A→G)两个SNPs,2位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态;基因型频率分布的独立性检验结果表明,在951位点,兰州大尾羊与滩羊、欧拉�
- 杨具田徐红伟臧荣鑫蔡勇卢建雄曹忻霍生东刘根娣吴建平
- 关键词：绵羊
- 罗格列酮和血清脂对绵羊前体脂肪细胞分化的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨罗格列酮(rosiglitazone,Ros)和血清脂(serum lipid,Lip)对绵羊前体脂肪细胞分化的影响及不同组织来源的前体脂肪细胞分化影响的差异。方法用不同浓度的Ros和(或)Lip培养绵羊皮下前体脂肪细胞和肾周前体脂肪细胞,通过测量3-磷酸甘油脱氢酶(GPDH)活性和油红O染色萃取液A值分析前体脂肪细胞的分化程度和脂肪细胞充脂量的变化,应用实时荧光定量PCR检测PPARγ和LPL mRNA的表达水平。结果 Ros和Lip提高细胞GPDH活性和脂滴的沉积量(P<0.05),上调LPL mRNA表达(P<0.05),最佳浓度分别为100nmol/L和20μL/mL;最佳浓度条件下Ros的诱导作用强于Lip(P<0.05),Ros显著提高了PPARγmRNA表达量(P<0.05),而Lip对PPARγmRNA的表达没有明显影响(P>0.05);Ros和Lip共同诱导与Ros单独作用之间没有明显差异(P>0.05);在相同诱导分化条件下,皮下前体脂肪细胞的分化程度高于肾周前体脂肪细胞(P<0.05)。结论研究结果表明Ros和Lip可促进绵羊前体脂肪细胞的分化,在相同条件下,皮下前体脂肪细胞的分化能力强于肾周前体脂肪细胞。
- 蔡勇阿依木古丽臧荣鑫马忠仁乔自林卢建雄杨具田吴建平
- 关键词：绵羊前体脂肪细胞细胞分化罗格列酮
