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4个绵羊品种线粒体细胞色素b基因的序列差异和系统进化研究被引量：30: 2005年; 测定了小尾寒羊、大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊和鲁北白山羊5个品种羊415bp线粒体DNA细胞色素b基因片段,其中44个位点检出变异。分析其碱基组成和变异情况,并以鲁北白山羊为外群,用UPGMA和NJ法构建了一系列分子系统树,得到相同的拓扑结构,在分子水平从母系遗传的角度澄清4个绵羊品种的起源分化关系。结果显示:在4个绵羊品种之间,洼地绵羊与滩羊关系最近与小尾寒羊亲缘关系最远。绵羊品种内的平均差异为0185%,线粒体DNA多态性相对贫乏,推测4个品种绵羊具有共同的母系祖先。; 张传生耿立英万海伟李吉涛杜立新; 关键词：线粒体细胞色素B基因绵羊品种线粒体DNA多态性鲁北白山羊大尾寒羊起源分化

反向 Northern Blotting 对绵羊卵巢组织差异表达ESTs的鉴定被引量：1: 2005年; 利用地高辛DNA标记与检测技术反向Northern斑点杂交,对小尾寒羊和滩羊卵巢组织差异显示ESTs进行鉴定,避免同位素放射性污染,安全性很高且操作简单,提高了实验的准确性,一种鉴定差异显示ESTs简单而有效的方法。在研究基因表达、比较不同环境条件下动物组织的mRNA差异表达等方面具有广阔的应用前景。; 朱靖杨娜娜柳淑芳杜立新; 关键词：ESTS 绵羊 DNA标记放射性污染斑点杂交动物组织

The Analysis for the Single Nucleotide Polymorphism of TGF-β1 and Its Association with Reproduction in Different Sheep Breeds被引量：1: 2010年; A single nucleotide polymorphism （SNP） of 805 bp region in the intron 6 of transfor- ming growth factor β1 （TGF-fll） gene was identified by polymerase chain reaction-single-strand composi- tion polymorphism （PCR-SSCP） in 196 sheep among Small-tailed Han sheep, Tong sheep, Tan sheep and Oula sheep. Comparative sequence analysis of cloned products revealed an AGAC deletion at 294 bases up-stream of exon 7 of the TGF-βI gene （ site 14201 in gi76871756）. Statistical results of the genotype and allele frequencies in different breeds showed that gen- otype AB was dominant in the Small-tailed Han sheep. Genotype BB, however, was in majority in low- fecundity sheep. The results of a Chi-square test indi- cated that all the populations were in Hardy-Weinberg equilibrium.; LixiaGaoHongbinLiLixinDuXuemeiSongZhenzuLiShangangLiCaihongWei; 关键词：PCR-SSCP SHEEP SNP TGF-Β1

不同品种绵羊TGF-β1基因单核苷酸多态性及其与繁殖力关系的研究被引量：4: 2008年; 以小尾寒羊、滩羊、同羊、欧拉羊共计196头为研究材料,采用PCR-SSCP技术,对绵羊TGF-β1基因6-7外显子区间内的805 bp序列进行多态性分析,发现了一个多态位点。经克隆测序分析发现,第6内含子区内存在一个突变,该突变位点为第7外显子上游的第294位碱基处缺失了AGAC(序列:gi76871756中的14201位)。对不同绵羊群的基因型和等位基因频率统计结果表明,多胎品种小尾寒羊以AB基因型为主。χ2检验结果表明,单胎品种滩羊、同羊、欧拉羊以BB基因型为主,所有品种都处于Hardy-Weinberg平衡状态。; 高丽霞李宏滨杜立新宋雪梅李珍祖李善刚魏彩虹; 关键词：转化生长因子Β1 单核苷酸多态性绵羊

正交法整体优化差异显示反应体系被引量：8: 2004年; mRNA差异显示PCR(mRNAdifferentialdisplayPCR ,DDRT PCR)是分离差异表达基因的有效方法 ,但该方法的准确性极易受到外部因素和内部因素的影响。采用正交法优化DDRT PCR反应条件 ,充分考虑到模板浓度、锚定引物浓度、随机引物浓度、dNTPs浓度、镁离子浓度以及Taq酶用量等因素在差异显示反应过程中的交互作用 ,一次PCR反应即可确定最佳反应组合。将筛选出的条件用于DDRT PCR ,得到差显结果假阳性率低 ,重复性和稳定性好 ,而且简化了反应条件的优选程序 ,这表明正交法是优化差异显示反应条件的理想方法。为了进一步简化整个差异显示反应系统的操作程序 ,降低假阳性率 ,研究采用了非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE)和银染显示差异带的方法 ,并用反向Northern法来验证回收条带。; 柳淑芳杜立新朱靖王爱华李宏滨; 关键词：DDRT-PCR 银染

小尾寒羊微卫星与RAPD标记的研究被引量：58: 2003年; 小尾寒羊是世界上具有非季节性发情和多胎特性的高繁殖率绵羊品种之一。选择 4个位于绵羊 6号染色体上且与FecB基因紧密连锁的微卫星标记 ,对小尾寒羊基因组进行PCR扩增后 ,采用最小二乘法估计各等位基因片段对产羔数的影响。分析结果表明 ,等位基因OarJ1A 5、OarJ1A 1 0、BM1 4 3 1 2和OarHH5 5 1 1可以作为小尾寒羊多胎位点的分子标记。从 1 0 0条随机引物中筛选出 1 8条引物 ,对小尾寒羊、大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊等 4个绵羊品种和鲁北山羊的基因组进行扩增 ,共扩增出 1 4 6条带 ,其中 94条表现出多态性 ,占 6 4 6 % ,同时扩增出每个品种的特异性条带。采用Nei氏标准距离和NJ聚类分析对不同品种的遗传关系进行分析 ,结果表明 ,4个绵羊品种亲缘关系很近。; 杜立新曹顶国; 关键词：小尾寒羊微卫星 RAPD

PCR快速筛选重组克隆方法的建立被引量：3: 2005年; 目的 :建立一种PCR技术快速筛选重组克隆的方法。方法 :用Triton裂解菌落作为模板 ,以pMD - 18T载体多克隆位点设计的引物与目的基因猪 β-INF引物设计不同组合 ,PCR扩增待检重组克隆。结果 :PCR技术快速筛选出猪 β -INF重组克隆并鉴定了插入方向。结论; 张传生耿立英杨娜娜孟春花朱靖杜立新; 关键词：重组克隆 PCR

λ噬菌体cDNA文库向质粒cDNA文库转化的研究被引量：8: 2006年; 尽管以λ噬菌体载体系统构建的cDNA文库具有装载容量大、质量高、代表性好、适合长期保存等优点,但是噬菌斑铺平板培养不但工作量大、费时费力,而且效率很低。此外,以λ噬菌体载体系统构建的cDNA文库可采用的筛选方法有限,不能对文库进行功能性筛选。根据λTriplEx2噬菌体能利用重组酶自身环化成质粒pTriplEx2这一原理,通过随机挑选多个分界良好的噬菌斑转导入E.coli BM25.8菌中将噬菌体转化为质粒的实验,说明是一种实现cDNA文库功能性筛选简单而有效的方法,打破了噬菌体文库筛选方法的局限性,在功能基因组学研究方面具有广阔的应用前景。; 朱靖杨娜娜李浩杜立新; 关键词：CDNA文库

羊FSHR基因5′端转录启动调控区的生物学特性被引量：2: 2006年; 文章对小尾寒羊、滩羊和澳洲绵羊等繁殖性状不同的3种绵羊与排卵有关的FSHR基因5′端转录启动调控区进行了克隆和分析,通过对FSHR基因的15个转录调控元件序列进行比较,结果表明,羊不同品种FSHR基因的转录调控元件序列之间没有差异。这说明绵羊的品种与FSHR基因5′端转录启动调控区的相关性不强,排除了因转录调控元件突变而影响转录调节能力的可能性。; 柳淑芳杜立新王爱华; 关键词：FSHR基因

山东主要绵羊品种线粒体细胞色素b的多态性研究被引量：8: 2004年; 本文测定了小尾寒羊、大尾寒羊、洼地绵羊 3种动物 4 15bp的线粒体DNA细胞色素b基因片段 ,共发现 7个变异位点 ,变异率为 1.15 %。结果显示 :山东 3个绵羊品种平均差异为 0 .0 115 ,线粒体DNA多态性相对贫乏 ,洼地绵羊与大尾寒羊亲缘关系最近 ,与小尾寒羊的亲缘关系较远 ,推测三个品种具有共同母系祖先。; 张传生耿立英杜立新; 关键词：洼地绵羊大尾寒羊母系体细胞多态性研究

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