国家自然科学基金(30270998)
- 作品数：12 被引量：83H指数：6
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- 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究被引量：11
- 2005年
- 应用RT-PCR方法对雏鸡肝脏总RNA中鸡类胰岛素生长因子Ⅰ基因cDNA进行扩增,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,与已知序列同源性为100%。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达,经Tricine-SDS-PAGE分析,原核表达产物为7.6kD的重组蛋白,占菌体总蛋白的23%,Western印迹表明重组蛋白具有IGF-Ⅰ抗原活性。表达产物以包涵体形式存在,经7mol·L-1盐酸胍的变性液溶解及0.5mol·L-1精氨酸复性液处理,表达产物随后进行脱盐、凝胶层析纯化、MTT法分析其对NIH3T3和鸡胚成骨细胞的增殖效应,结果表明重组鸡IGF-Ⅰ具有较高的生物学活性。
- 张建峰侯加法张皎姚静
- 关键词：MTT法活性研究中鸡SDS-PAGE分析
- 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究
- 2006年
- 应用RT—PCR方法对雏鸡肝脏总RNA中鸡类胰岛素生长因子I基因cDNA进行扩增，然后将特异性片段连接到pMD18-T载体，测序结果表明，与已知序列同源性为100％。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达，经Tricine—SDS—PAGE分析，原核表达产物为7．6ku的重组蛋白，占菌体总蛋白的23％，Western印迹表明重组蛋白具有IGF—Ⅰ抗原活性。表达产物以包涵体形式存在，经7moL／L盐酸胍的变性液溶解及0．5moL／L精氨酸复性液处理，表达产物随后进行脱盐、凝胶层析纯化、MTT法分析其对NIH3T3和鸡胚成骨细胞的增殖效应，结果表明重组鸡IGF—Ⅰ具有较高的生物学活性。
- 张建峰
- 关键词：中鸡WESTERN印迹克隆基因CDNA
- OPG/RANKL/RANK系统的研究进展被引量：28
- 2006年
- OPG/RANKL/RANK系统是近年来骨科研究领域中的重大突破,研究发现许多激素、细胞因子等均通过直接或间接的调节骨保护素(osteoprotegerin,OPG),核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator ofNF-κB ligand,RANKL)的表达,调控OPG、RANKL和核因子-κB受体活化因子(recep-tor activator of NF-κB,RANK)之间的比例,从而介导破骨细胞的分化和功能而达到抗骨质疏松或致骨质疏松的作用。现就OPG/RANKL/RANK系统在骨质疏松中的作用做一综述。
- 姚静侯加法
- 关键词：骨保护素核因子-ΚB受体活化因子配体
- 鸡骨保护素(chOPG)编码区基因的克隆和序列分析
- 根据GenBank中收录预测的鸡OPG(Oseteoprotegerin)序列设计特异性引物,以体外培养至对数期的鸡胚成骨细胞总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆得到了鸡OPG的编码区基因(GenBank登录号,DQ0...
- 姚静邓益锋周振雷侯加法
- 关键词：骨保护素基因克隆
- 文献传递
- 骨疏康含药血清对鸡胚成骨细胞增殖和AKP活性的影响
- 2007年
- 研究骨疏康含药血清对鸡胚成骨细胞的增殖和AKP活性的影响。ISA蛋鸡口服骨疏康后1 h、3 h、5 h采血制备血清,分别加入到鸡胚成骨细胞中,培养24 h、48 h时分别用MTT法和PNPP法检测成骨细胞的增殖率和AKP活性。结果显示,与对照组(仅给生理盐水)比较,骨疏康含药血清可促进成骨细胞的增殖和AKP的分泌,给药5 h采集的骨疏康含药血清作用最佳。表明骨疏康有利于成骨细胞的增殖、分化并提高活性,促进骨形成。
- 周振雷侯加法陶庆树胡云峰胡丹
- 关键词：骨疏康成骨细胞增殖
- rcIGF-Ⅰ对鸡胚额骨成骨细胞骨相关基因mRNA表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的在成功培养、纯化体外鸡胚额骨成骨细胞的基础上,探讨不同剂量重组鸡IGFⅠ(rcIGFⅠ)对成骨细胞骨相关基因(COLⅠ、OPG、IGFⅠR)表达的影响。方法应用酶消化法(0.1%Ⅱ型胶原酶)获取鸡胚额骨成骨细胞群并鉴定。取培养2d的2代成骨细胞,在rcIGFⅠ为0ngml、50ngml、100ngml的浓度中进行培养,采用RTPCR方法检测基因COLⅠ、OPG、IGFⅠR的相对表达情况,并用βactin作为内参照予以矫正。结果rcIGFⅠ可以在转录水平上增加鸡胚额骨成骨细胞骨相关基因的表达,并呈明显的剂量依赖关系。结论IGFⅠ促进成骨细胞的增殖、分化的作用可能是通过增加骨相关基因的表达水平来实现的。
- 张建峰侯加法张皎姚静
- 关键词：成骨细胞基因表达
- 骨疏康对蛋鸡骨代谢的影响被引量：14
- 2006年
- 为研究中药骨疏康对蛋鸡骨代谢的影响,选择90只58周龄的蛋鸡,随机分为3组。对照组饲喂基础日粮,骨疏康组在基础日粮中添加1%的骨疏康,依普拉芬组在基础日粮中添加25 mg/kg的依普拉芬。试验为期90d。结果显示,与对照组比较,骨疏康组和依普拉芬组血清Ca、P、AKP、TRACP、BGP水平显著降低,肱骨、胫骨、股骨的骨指数、骨放射密度、皮质骨厚度、皮质骨面积、皮质骨面积比例以及血清中IGF-1水平显著升高,而骨疏康组与依普拉芬组之间无显著差异,表明骨疏康能显著抑制产蛋后期蛋鸡的骨吸收,促进骨形成,改善骨代谢。
- 周振雷邓益锋陈鹏峰陶庆树侯加法
- 关键词：骨疏康依普拉芬骨代谢蛋鸡
- 淫羊藿苷对鸡胚成骨细胞增殖和分化的影响被引量：6
- 2007年
- 【研究目的】本文研究了淫羊藿苷对鸡胚成骨细胞增殖和分化的影响。【方法】将不同浓度的淫羊藿苷加入第二代成骨细胞中,分别于培养24、48、72h时,使用MTT法和PNPP法检测成骨细胞的增殖率和碱性磷酸酶(ALP)活性。【结果】淫羊藿苷促进鸡胚成骨细胞增殖和分化,但增殖作用不显著。其中当淫羊藿苷浓度为20ng/ml时,对成骨细胞增殖分化作用最强。【结论】淫羊藿苷能够显著促进鸡胚成骨细胞分化,对成骨细胞增殖有一定作用。
- 胡云峰侯加法邓益锋周振雷姚静
- 关键词：淫羊藿苷成骨细胞增殖碱性磷酸酶
- 计算机X线片骨放射密度法在蛋鸡骨质疏松症研究中的应用被引量：2
- 2006年
- 应用灰度对比法的原理建立了计算机X线片蛋鸡骨放射密度法。结果表明,铝阶厚度与灰度之间呈显著的线性关系(P<0.01,r=0.997),铝阶厚度变化可准确反映蛋鸡骨骼骨量变化,不同曝光条件对骨量值无明显的影响(p>0.05)。该方法简便,精确,重复性好,经济,为研究蛋鸡骨质疏松症提供重要的检测手段。
- 陶庆树周振雷王艳胡丹侯加法
- 关键词：蛋鸡骨量
- 伊莎笼养蛋鸡胰岛素样生长因子I限制性片断多态性与骨矿的研究被引量：3
- 2006年
- 选择58周龄高产期伊莎笼养蛋鸡90羽,应用PCR扩增鸡IGF-I启动子上游7 kb处基因片段,用PstI消化产生限制性片段长度多态性,分析IGF-I多态性与胫骨、股骨、肱骨骨密度之间的关系。结果表明,伊莎蛋鸡PP、Pp、pp基因型频率分别为0.256、0.311、0.433,P和p等位基因频率分别为0.411 1和0.588 9。方差分析显示,肱骨的骨密度与IGF-I基因多态性相关,PP基因型组的骨密度和骨矿含量均显著大于pp基因型(P<0.05),股骨、胫骨基因型间无显著差异。PP基因型体质量显著大于Pp基因型。表明伊莎笼养蛋鸡IGF-I基因多态性和肱骨骨密度显著相关,P等位基因具有一定的优良骨质指针作用。
- 邓益锋张皎侯加法
- 关键词：多态性骨密度
