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4种ELISA检测奶牛O型口蹄疫免疫抗体的比较试验被引量：2: 2010年; 张润祥高明春李爽王君伟; 关键词：O型口蹄疫 ELISA检测免疫抗体奶牛世界动物卫生组织口蹄疫病毒

规模化奶牛场口蹄疫O-Asia 1型二价灭活苗不同免疫程序免疫抗体水平分析被引量：5: 2011年; 口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的以感染偶蹄动物为主的急性、热性、高度接触传染性和快速远距离传播的动物疫病，以传染性强、传播速度快、危害严重而著称。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须通报的多种动物共患传染病之一，我国将其列为一类动物传染病。根据OIE公布数据，2009年内地全年通报了16起口蹄疫疫情，感染动物主要为牛，其中的7起为我国过去未见的A型口蹄疫感染，其余均为Asial型感染。2010年又报道多起牛、羊A型FMDV猪O型FMDV。因此，口蹄疫的防控任务依然艰巨。; 张润祥高明春刘慧环曹永生王晓东王君伟; 关键词：规模化奶牛场免疫程序灭活苗世界动物卫生组织接触传染性动物传染病

规模化奶牛场口蹄疫灭活疫苗不同免疫程序免疫抗体水平分析: 我国家畜口蹄疫的防控,以预防免疫为核心,因此合理的免疫程序对于规模化牛场防控口蹄疫至关重要,我们对3个规模化牛场以每年抽检1-2次血清样本,每次40-80份检测血清免疫抗体,比较不同免疫程序下的免疫效果。经过系列研究,结...; 张润祥高明春曹永生王君伟; 关键词：口蹄疫规模化奶牛场免疫程序免疫抗体; 文献传递

应用口蹄疫病毒非结构蛋白鉴别自然感染和疫苗免疫动物被引量：2: 2011年; 口蹄疫（Foot and Mouth Disease,FMD）是由口蹄疫病毒引起的以感染牛、猪、羊等偶蹄动物为主的急性、热性、高度传染性疫病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须通报的多种动物共患传染病之一。; 张润祥高明春王君伟; 关键词：口蹄疫病毒免疫动物自然感染非结构蛋白世界动物卫生组织疫苗

口蹄疫病毒非结构蛋白3AB单克隆抗体的制备及其对应表位区分析被引量：1: 2011年; 为鉴定口蹄疫病毒(FMDV)的非结构蛋白3AB的抗原表位,本研究以原核表达并纯化的FMDV 3AB重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA进行筛选,获得6株能够稳定分泌抗3AB蛋白特异性单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞。这6株MAbs亚类鉴定均为IgG1型,轻链均为κ链。间接免疫荧光试验结果表明,这6株MAbs均能够识别FMDV 3AB蛋白。采用制备的MAb对分段表达的3AB蛋白进行western blot分析,结合位点分别位于3AB的第aa 55～aa 70、aa 64～aa 79、aa 130～aa 145区段。该结果为进一步探索3AB蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。; 刘丹丹高明春宋军宋鸽曹永生张润祥李爽于力王君伟; 关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体

IFN-γ真核质粒对口蹄疫病毒生长激素环多肽免疫小鼠的佐剂效应: 2010年; 葛兰云刘思莹李勐高明春刘湘涛王君伟; 关键词：IFN-Γ 佐剂效应口蹄疫病毒免疫小鼠素环

牛口蹄疫病毒VP2结构蛋白抗体间接ELISA方法的建立被引量：5: 2010年; 为建立牛口蹄疫(FMD)抗体的检测方法,本研究将口蹄疫病毒(FMDV)的VP2基因,通过pPROEXTM HTb表达载体在大肠杆菌DH5α中表达,获得大小为35ku的重组VP2蛋白(rVP2),western blot证实rVP2可与FMDV5种血清型的牛阳性血清发生特异性反应。以纯化复性的rVP2为抗原建立了FMDVrVP2间接ELISA方法。重复性试验证实批内、批间变异系数均小于10%。特异性交叉试验表明,该抗原不与常见的其他7种牛病阳性血清发生交叉反应。检测非免疫无口蹄疫国家牛阴性血清的特异性为100%;检测感染血清敏感性为97.3%;检测O-AsiaⅠ的二价苗免疫牛血清,与4种商品化试剂盒比较,其符合率分别为69.0%、95.0%、90.4%和86.8%。实验结果表明建立的ELISA方法可以用于口蹄疫感染和免疫抗体检测。; 张润祥高明春曲哲会李爽曹永生宋军宋鸽刘丹丹王君伟; 关键词：口蹄疫病毒 VP2蛋白间接ELISA

牛IFN-γ基因的原核表达及其产物卵黄抗体的制备: 2010年; 刘思莹葛兰云徐宗香王兆鹏李勐高明春马波王君伟; 关键词：IFN-Γ 卵黄抗体原核表达基因 Γ-干扰素

牛Asia 1型口蹄疫病毒感染性克隆的构建被引量：2: 2009年; 本研究在完成Asia1型口蹄疫病毒(FMDV)As01株全基因组测序的基础上,采用融合PCR扩增得到含有15个C碱基的5′端片段(约1800bp),并利用长片段PCR扩增得到基因组3′端片段(约6700bp)。再利用单一的酶切位点将2个片段克隆到pBluescript SK载体中,从而获得携带As01株基因组全长cDNA的重组质粒pBSAs。将该质粒线性化后作为模板体外转录并转染BHK-21细胞,可观察到典型的细胞病变。对收获的病毒采用RT-PCR、间接免疫荧光和电镜观察等检测及鉴定,结果表明,拯救出了具有感染性的Asia1型FMDV。拯救毒与亲本毒对乳鼠的致病力(LD50)差异不显著,具有相似的生物学特征。该感染性克隆的构建,为深入研究FMDV的致病机理及开发新型疫苗提供了有效的反向遗传操作平台。; 李爽张润祥宋鸽高明春刘湘涛王君伟; 关键词：口蹄疫病毒全长CDNA 感染性克隆病毒拯救体外转录

口蹄疫合成肽疫苗研究进展被引量：9: 2012年; 口蹄疫(FMD)是一种严重威胁世界畜牧业发展和国际进出口贸易的重大传染病。尽管FMD传统疫苗在免疫效力上具有一定优势,但其自身仍存在诸多弊端及隐患。随着分子生物学技术的飞速发展,及其在兽医领域不断取得的创新性应用,FMD合成肽疫苗作为新型基因工程疫苗的一种,以其具有更为广谱的特异性、更加安全稳定、经济实用等特点,现已成为FMD研究领域的主要热点及方向。论文从抗原位点的选择、空间构象的研究、疫苗载体的探索以及免疫佐剂的优化等多方面对FMD合成肽疫苗的发展过程及其研究进展进行了深入探讨,旨在为FMD合成肽疫苗的进一步发展以及其他病原微生物合成肽疫苗的深入研究提供借鉴。; 李婷婷王君伟; 关键词：口蹄疫合成肽疫苗抗原表位

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