国家自然科学基金(30572427)
- 作品数:6 被引量:31H指数:4
- 相关作者:江朝光何蕾宋光王彬张莉更多>>
- 相关机构:中国人民解放军总医院中国人民解放军海军总医院中国医学科学院阜外心血管医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 乳鼠心肌细胞的体外培养及生物学特性研究被引量:7
- 2007年
- 目的探讨乳鼠心肌细胞的体外培养方法并对其生物学特性进行观察。方法1~3日龄新生SD大鼠10只,用无酶消化法行含血清培养基原代心肌细胞培养,连续观察细胞生长及传代情况40天。α-横纹肌肌动蛋白抗体标记培养细胞,以流式细胞仪行心肌细胞纯度鉴定,Giemsa染色观察培养心肌细胞形态,吖啶橙-碘化丙啶(AO-PI)染色法检测培养细胞活性。记录培养心肌细胞总数,计算单个乳鼠心脏细胞产量。结果原代组织块和单个心肌细胞在接种后24~48h贴壁,其中部分出现搏动并持续至观察期末。培养细胞群鉴定心肌细胞纯度为94.1%,活细胞比例95.3%,95%可信区间(CI)为91.6%~99.0%。平均每个乳鼠心脏单细胞产量为3.3×106个,95%CI为2.1×106~4.5×106个。结论无酶消化法培养的乳鼠心肌细胞纯度、活力及产量能够满足心肌细胞研究的需要。
- 何蕾张莉黄靖香赵斌崔雪梅宋光江朝光
- 关键词:流式细胞术生物学鉴定法心肌细胞
- 黄芪注射液对培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤的保护作用被引量:6
- 2007年
- 目的研究黄芪注射液抗培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤的作用。方法采用培养的SD乳鼠心肌细胞缺氧复氧模型,实验分为六组:A正常对照组,B缺氧组,C黄芪20组,D黄芪100组,E黄芪200组,F黄芪400组。黄芪各组缺氧过程中给予不同浓度黄芪,缺氧4 h,复氧2 h。比较缺氧复氧前后心肌细胞存活率,培养液中心肌酶含量。结果各组缺氧前后谷草转氨酶(GOT)均有差异。复氧后2 h,B、C、D组培养液中心肌酶含量均有不同程度升高(P<0.05)。E、F组GOT值较基础值降低(P<0.05)。与正常组比较,各组细胞经过缺氧复氧后,存活数均有不同程度下降(P<0.01)。与缺氧复氧组比较,加入黄芪保护的黄芪20,黄芪100,黄芪200组均优于单纯缺氧复氧组。黄芪200组存活率最高(P<0.01)。结论黄芪能够减轻培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤。
- 宋光何蕾江朝光
- 关键词:再灌注损伤心肌保护流式细胞术细胞低氧
- 黄芪注射液抗体外兔心脏缺血再灌注损伤作用研究被引量:4
- 2007年
- 目的:研究黄芪注射液对体外兔心脏再灌注损伤的保护作用。方法:采用体外兔心共生支持系统模型。16只心脏随机分为黄芪组和对照组各8只,缺血期停跳液分别采用黄芪注射液加St.Thomas’液和St.Thomas’液进行心肌保护。常温缺血45 min,再灌注60 min,比较两组再灌注后5 min,30 min和60 min的冠脉回流液中心肌酶含量,组织标本采用HE染色和酸性复红光绿染色评价缺血区面积。结果:再灌注后黄芪组冠脉回流液中心肌酶含量低于对照组,缺血区面积小于对照组,有显著性差异(P<0.05)。结论:缺血过程中停跳液中加入黄芪注射液可以减轻体外心脏再灌注损伤。
- 何蕾王津赵明霞宋光江朝光
- 关键词:再灌注损伤心肌保护
- 黄芪注射液对正常乳鼠心肌细胞胞外信号调节激酶信号转导通路的影响
- 2008年
- 目的研究黄芪注射液对正常心肌细胞胞外信号调节激酶(ERK)信号转导的影响。方法心肌细胞取材SpragueDawley大鼠。采用培养的原代正常心肌细胞进行研究。量效关系研究分为5组。细胞培养液DMEM中加入黄芪注射液,其终浓度分别为0、20、100、200、400ml/L培养液。37~C培养2h后取细胞进行ERK和一氧化氮合酶(NOS)蛋白表达检测。时效关系研究分为两组。A组为黄芪组,细胞培养液DMEM中加入黄芪注射液。B组为抑制剂组,细胞培养液DMEM中加入黄芪注射液和ERK抑制剂PD98059。37℃孵育,分别于0、5、15、30、60、120min时取细胞进行Western印迹检测ERK和NOS蛋白表达。结果量效关系研究显示黄芪注射液终浓度分别为0、20、100、200、400ml/L培养液时心肌细胞ERK表达没有明显的变化。但NOS表达随黄芪浓度增加有减弱的趋势。时效研究显示心肌细胞加入黄芪注射液培养后,ERK和NOS的表达随时间呈增加趋势。ERK抑制剂PD98059可减弱ERK和NOS的表达。结论黄芪注射液对心肌细胞ERK和NOS信号表达有调节作用,随时间增加呈增强趋势,但随浓度升高呈减弱趋势。
- 段伟东何蕾王津康红军宋青江朝光潘亮
- 关键词:一氧化氮合酶蛋白激酶类
- 黄芪激活ERK1/2信号转导通路抗心肌细胞再灌注损伤作用被引量:8
- 2008年
- 目的研究黄芪注射液调节ERK1/2信号转导通路抗培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤的作用。方法采用培养的SD乳鼠心肌细胞缺氧复氧模型,实验分为五组:A组为正常对照组,B、C、D、E组均为缺氧/复氧组,其中各组培养液组成为:B组缺氧液,C组缺氧液加黄芪,D组缺氧液加PD98059,E组缺氧液加黄芪和PD98059。缺氧4h,复氧2 h。比较缺氧/复氧前后培养液中心肌酶含量,并进行心肌细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白表达检测。结果缺氧/复氧后对各组细胞培养液中心肌酶含量进行比较,结果显示各缺氧组与正常对照组比较,心肌谷草转氨酶(GOT),乳酸脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK)均有升高(P<0.05)。黄芪缺氧组与缺氧对照组比较,GOT升高减轻(P<0.05)。ERK抑制剂PD98059对黄芪的保护作用有一定削弱,但没有统计学意义。黄芪可使缺氧/复氧引起的心肌细胞ERK表达增加,PD98059对黄芪引起的ERK表达增加没有明显抑制作用。结论黄芪能够减轻缺血再灌注损伤,其机制涉及了ERK1/2信号途径。
- 宋光何蕾王彬江朝光
- 关键词:信号转导心肌保护细胞低氧
- 黄芪注射液调节一氧化氮合酶抗再灌注损伤作用被引量:7
- 2008年
- 目的:研究黄芪注射液抗培养乳鼠心肌细胞再灌注损伤的作用与一氧化氮合酶(NOS)表达的关系。方法:采用培养的SD乳鼠心肌细胞缺氧复氧模型,实验分为5组:A组为正常对照组,B组、C组、D组、E组均为缺氧-复氧组。各组培养液组成:B组缺氧液,C组缺氧液加黄芪,D组缺氧液加NOS抑制剂L-NAME,E组缺氧液加黄芪加L-NAME。缺氧4 h,复氧2 h。比较缺氧-复氧后培养液中心肌酶含量,并进行心肌细胞NOS蛋白表达检测。结果:复氧2 h后,B组、C组、D组、E组与A组比较心肌酶谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)均有升高(P<0.05)。C组与B组比较GOT升高减轻(P<0.05),但无统计学意义。黄芪增强缺氧-复氧引起的心肌细胞NOS表达增加,L-NAME对黄芪引起的NOS表达增加有一定抑制作用。结论:黄芪能够减轻缺血再灌注损伤,其机制涉及了NOS信号转导途径。
- 何蕾王彬张莉黄靖香赵斌江朝光
- 关键词:心肌再灌注损伤一氧化氮合酶