上海市重大科技攻关项目(044319223)
- 作品数:2 被引量:45H指数:2
- 相关作者:黄青山汪世龙陆海荣更多>>
- 相关机构:上海高科联合生物技术研发有限公司同济大学更多>>
- 发文基金:上海市重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域:化学工程生物学更多>>
- 一组人工合成抗菌肽的研究被引量:28
- 2006年
- Cecropin A1是一种从惜古比天蚕(Hyalophora cecropia)中提取的由37个氨基酸组成的一种α-螺旋抗菌肽,其杀菌活性较弱。本文采用了cecropin A1的N端1-8序列KWKLFKKI,另加一段标准的α-螺旋结构序列,然后用一个铰链结构GIG相连,合成了15条抗菌肽。经过试验证明部分含有核心标准螺旋结构的序列,对革兰氏阳性菌和阴性菌的最小抑菌浓度仅是原有cecropin A1抗菌肽的1/100左右。该类抗菌肽有希望进一步开发为新的抗感染药物。该类抗菌肽已经申请专利,专利号为PCT/CN 03/00522。
- 李国栋钱承军陆敏孙睿华黄青山黄芳
- 关键词:抗菌肽最小抑菌浓度多肽合成
- 抗菌肽GK1在大肠杆菌中的融合表达被引量:18
- 2008年
- 为高效表达抗菌肽GK1并避免GK1的高抗菌活性对大肠杆菌宿主菌的致命影响,将经改造后的人胰岛素原(mhPI)与GKJ的融合基因(mhPI-GKI)克隆到表达载体pET28a中,构建出表达质粒pET28a-mhPI-GK1,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。融合蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的20%。经CNBr裂解、阳离子交换层析和RP-HPLC纯化后,每升发酵液可获得5.7 mg纯度大于97%的重组GK1。质谱检测显示重组GK1的分子量为2794.0 D,抑菌活性实验表明纯化后的重组GK1和化学合成GK1具有相同的抗菌活性。为利用基因工程方法大规模生产GK1奠定了基础。
- 陆海荣李国栋吴宏宇黄晋江汪世龙黄青山
- 关键词:抗菌肽融合蛋白大肠杆菌