中央高校基本科研业务费专项资金(DL13EA06-3)
- 作品数：5 被引量：30H指数：2
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- 苹果茎痘病毒基因变异及重组分析
- 2014年
- 苹果茎痘病毒(apple stem pitting virus,ASPV)是一种严重危害果树生产的潜隐性病毒,为了解ASPV的变异特点,基于已报道的ASPV外壳蛋白(coat protein,CP)基因核苷酸序列信息,结合RNA二级结构分析,对ASPV的变异进行分析。结果显示,不同分离物CP基因前半部分区域存在3个大段的空位区。中国分离物PR1在CP基因末端有12个核苷酸的序列插入,RNA二级结构预测显示,插入点附近能形成一个稳定的茎环结构,序列插入并未引起RNA二级结构的明显变化。重组分析显示,波兰分离物ST181为中国分离物WS和波兰分离物N1的重组体,系统进化分析支持该重组事件的发生。ASPV核苷酸序列变异复杂,并能够发生重组,因而有必要收集更多抗性资源,加强抗病育种。
- 李丽丽杨洪一来永才
- 关键词：苹果茎痘病毒RNA二级结构
- 嗜水气单胞菌的研究进展被引量：26
- 2015年
- 为有效预防嗜水气单胞菌引起传染病的发生,以减少对人畜的损害,通过回顾嗜水气单胞菌的分类地位(嗜温性和运动性的气单胞菌属的模式菌)、生物学性质,对其主要毒力因子(外毒素及胞外蛋白酶)和鉴定技术(生化鉴定、免疫血清技术和分子生物学技术)的研究成果进行了综述。
- 姜艳丽李丽丽
- 关键词：嗜水气单胞菌毒力因子
- 苹果茎痘病毒的IC-RT-PCR检测被引量：2
- 2014年
- 利用CTAB缓冲液提取苹果叶片粗提液,以苹果茎痘病毒(ASPV)的抗血清包被薄壁管,捕获感病叶片粗提液中的ASPV病毒粒子;最终进行RT-PCR反应扩增ASPV特异片段,建立了利用免疫捕获RT-PCR(IC-RTPCR)技术检测ASPV的技术体系。结果显示,IC-RT-PCR可有效检测ASPV,且对栽培苹果、海棠、杏、毛樱桃样品的检测皆有效。IC-RT-PCR无需提取RNA,只需叶片粗提液,步骤简单;IC-RT-PCR技术受叶片中杂质影响较小,可有效检测不同植物样品中的ASPV,具有重要应用价值。
- 李丽丽付耕云杨洪一
- 关键词：苹果茎痘病毒IC-RT-PCR
- 间接原位RT-PCR法检测辣椒叶组织中辣椒轻斑驳病毒的分布被引量：2
- 2015年
- 为了了解辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)在辣椒组织中的分布特点,探索利用间接原位RT-PCR技术对病毒在辣椒组织中进行定位。利用改进的CTAB法从辣椒叶片中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增出PMMoV的特异片段,并经克隆测序,证明其为PMMoV的特异片段。利用PCR技术,制备出了地高辛标记的特异cDNA探针。对原位RT-PCR反应体系进行优化,经过切片制备(切片厚度7μm、应用Superfrost plus正电荷防脱载玻片)、预处理(1 mg·L^(-1)蛋白酶K消化5 min)、RT-PCR(37℃反转录2.5h、PCR退火温度为58℃)、杂交检测,建立了应用间接原位RT-PCR技术检测PMMoV在辣椒组织中分布的方法。原位RT-PCR结果显示,叶片组织中PMMoV阳性信号主要分布于栅栏组织,其次是海绵组织,表皮组织中也有少量阳性信号。此外,叶柄中可见少量阳性信号,主要位于表皮组织。
- 杨洪一郭世辉李丽丽
- 关键词：辣椒辣椒轻斑驳病毒地高辛CDNA
- 苹果茎痘病毒种群遗传多样性分析
- 2014年
- 苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)是一种严重危害果树生产的潜隐性病毒。基于前期研究所获得的6个ASPV中国分离物CP基因的核苷酸序列,结合GenBank中报道的序列,对ASPV种群遗传多样性特点进行分析。应用MEGA 4.0软件分析了不同地理来源、不同寄主来源组内和组间的各分离物CP基因的遗传多样性,表明ASPV种群遗传变异与寄主来源、地理分布不存在明显的相关性。CP编码区仍处于净化选择中,亚洲的分离物、梨分离物承受着较高的选择压力。DnaSP软件分析显示,ASPV经历了明显的种群扩张,并有继续扩展蔓延之势。因而有必要进一步加强病毒检测及种苗脱毒,严格控制带毒种苗传播。
- 李丽丽杨洪一
- 关键词：苹果茎痘病毒种群
