安徽省农业科学院院长青年创新基金(11B0625)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 家蚕抗菌肽Cecropin D基因的原核表达、纯化及抑菌活性测定被引量：2
- 2011年
- 根据在家蚕品系菁松和菁松近等基因系添食家蚕浓核病病毒(BmDNV)前后差异表达的抗菌肽Cecropin D,构建重组表达载体pET-41b-CecD,将测序正确的载体转化到E.coli BL21菌株中进行诱导表达,并对诱导条件进行优化。诱导产物用蛋白质印迹(western blot)进行验证。可溶性分析发现谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合抗菌肽部分可溶,部分在表达过程中形成包涵体。GST亲和层析纯化后,分别检测重组抗菌肽的抗菌活性,结果表明:纯化后的重组抗菌肽可以很好地抑制并杀灭细菌,其效果与抗生素卡那霉素相似。
- 章玉萍牛晓利曹玉桥范涛代君君王储言吴传华刘健
- 关键词：家蚕抗菌肽原核表达
- 家蚕抗菌肽Cecropin D基因的原核表达、纯化及抑菌活性测定
- 针对在家蚕品系菁松和菁松近等基因系添食BmDNV病毒前后差异表达的抗菌肽Cecropin D,构建重组表达载体pET-41b-CecD,将测序正确的载体转化到E.coli(BL21)中,进行诱导表达,并对诱导条件进行优化...
- 章玉萍范涛代君君王储炎吴传华刘健
- 关键词：家蚕抗菌肽原核表达
- 文献传递
- 家蚕G蛋白α亚基基因BmGα73B原核表达及其表达条件优化
- 2012年
- 通过RT-PCR技术从家蚕中扩增出G蛋白α亚基基因BmGα73B的cDNA,克隆至原核表达载体pET-41b(+)中,所获得的重组质粒经酶切鉴定后,将其转化至E coli BL21诱导表达,用SDS-PAGE与Western blot对表达产物进行鉴定。结果表明,通过RT-PCR扩增获得长度为1 158 bp的蛋白基因,诱导表达重组质粒pET-41b(+)-Gα73B,经SDS-PAGE检测,IPTGr的终浓度为1 mmol/L时,诱导4 h时蛋白表达量最高,出现分子质量约为73 kD的目的蛋白带,与蛋白的理论值相符。经Western blot检测,表达产物可与GST发生特异性反应。
- 汤强方玲章玉萍
- 关键词：RT-PCR原核表达
