国家科技攻关计划(2004BA717B)
- 作品数：5 被引量：33H指数：4
- 相关作者：陈华黄丽洁贾琳苟鹏刘亚千更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划国家自然科学基金国家社会公益研究专项计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 促减数分裂甾醇(MAS)对猪卵母细胞体外成熟及其胚胎发育能力的影响被引量：5
- 2007年
- 利用促减数分裂甾醇(MAS)合成代谢过程中的抑制剂AY9944累积FF-MAS的原理,在猪卵母细胞体外成熟过程中添加AY9944,间接地研究了内源性MAS对猪卵母细胞体外成熟质量的影响.猪卵丘卵母细胞复合体(cumulus oocyte complexes,COCs)培养在NCSU23成熟培养液中,并添加不同浓度(0,10,20,40μmol/L)的AY9944培养44h.培养结束后,成熟的卵母细胞进行孤雌激活和以胎儿成纤维细胞为核供体重构胚胎,分别于48和144h观察胚胎发育情况,统计卵裂率和囊胚率及囊胚/2-细胞胚比率.结果如下:(1)随着AY9944添加浓度的增加,退化的卵母细胞增多,40μmol/L AY9944处理的退化卵显著,卵母细胞成熟率显著下降.(2)成熟培养液添加20和40μmol/L AY9944处理的孤雌激活胚胎的囊胚形成率和2-细胞胚发育到囊胚的比率显著增加(P<0.05).(3)以对照组(0μmol/L AY9944)和20μmol/L AY9944处理的卵母细胞为胞质受体,发现20μmol/L AY9944处理的克隆胚的发育能力囊胚率和2-细胞胚发育到囊胚的比率有所提高,但无显著差异(P>0.05).以上结果表明,猪卵母细胞体外成熟过程中添加AY9944提高了猪卵母细胞体外成熟的胞质质量,胚胎的发育能力提高.
- 潘登科刘吉牟玉莲张莉冯书堂
- 关键词：卵母细胞体外成熟胚胎发育
- 开胸与微创方法制备小型猪急性心肌梗死模型的对比研究被引量：10
- 2008年
- 目的观察开胸结扎冠状动脉法(简称开胸法)与微创冠状动脉内球囊封堵法(简称微创法)制备心肌梗死(MI)模型的差异。方法选用贵州小型猪,分别应用开胸法与微创法,阻断冠状动脉左前降支中段血流,造成心肌梗死,比较观察两种方法建立心肌梗死模型的异同。结果两种方法均可以形成心肌梗死模型,病理检查无显著差异。开胸法造模后出现通气性呼吸功能障碍,心肌酶升高水平与临床患者心肌梗死衍变有差异。微创法应用造影剂可能会有一过性肾功能损伤。结论微创法对实验结果干扰小,与临床条件相近,是一种更好的造模方法。
- 谢忠忱尹明苟鹏黄丽洁贾琳彭享胜陈华
- 关键词：心肌梗死小型猪动物
- 三个品系小型猪静脉糖耐量试验及相关血清生化指标的比较被引量：8
- 2007年
- 目的比较三个品系小型猪静脉葡萄糖耐量及血糖相关指标的差异。方法实验用4月龄广西巴马小型猪和贵州小型猪,5月龄五指山猪,在相同饲养条件下进行实验。静脉注射50%葡萄糖进行静脉葡萄糖耐量试验;常规生化方法检测血清血糖;化学发光法检测血清胰岛素;放免法测定HbAlc。结果静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）中,注糖后10 min血糖达到峰值,贵州小型猪和广西巴马小型猪分别在60 min和90 min时恢复至实验前血糖值。五指山猪在120 min时恢复至注糖前水平,而且在30~90 min各时间点的血糖值高于广西巴马小型猪和贵州小型猪（P〈0.05）。三组动物中,贵州小型猪HbA1c含量较高（P〉0.05）,五指山猪胰岛素水平较低（P〈0.01）。三个品系小型猪的空腹血糖和胰岛素敏感指数差异不显著（P〉0.05）。结论在IVGTT实验中,三个品系小型猪的血糖下降趋势基本一致,五指山猪有一定特殊性;相关血清生化指标测定值接近。
- 刘亚千李春海陈华
- 关键词：小型猪IVGTT胰岛素HBALC
- 三个品系小型猪正常心电图的比较被引量：9
- 2008年
- 目的建立清醒状态记录小型猪心电图的方法，并对3个品系小型猪6个导联心电图进行分析比较。方法选用4月龄广西巴马猪7头、5月龄五指山小型猪6头、中国农大小型猪10头，清醒状态下吊床保定，测定Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、aVR、aVL和aVF6个导联的心电图。结果3个品系小型猪心电图的波形与人相似，心率较快，在3个品系之间差别不明显，存在偶发性窦性心率不齐。广西巴马猪、五指山小型猪和中国农大小型猪的P-R间期分别介于0．08—0．10s、0．08—0．11s和0．08—0．11s；QRS波群分别介于0．04—0．06s,0．04—0．07s和0．04～0．05s。3个品系小型猪均有清晰的S-T段，偏移小于1mm。结论本研究获得了3个品系小型猪清醒状态时的心电图基本数据，经比较，3个品系之间无明显差异。
- 黄丽洁贾琳苟鹏刘亚千李春海陈华
- 关键词：小型猪心电图
- 不同类型的转基因细胞为核供体生产猪的转绿色荧光蛋白基因克隆胚胎被引量：1
- 2006年
- 2005年我国获得了体细胞克隆猪的成功,但是在体细胞转基因克隆猪方面还处于起步阶段。猪的转基因克隆在农业和医学方面有着巨大的应用前景,在农业上可以提高猪肉品质和培育抗病猪种等;医学上可以为人类异种器官移植、疾病模型和新药筛选提供理想材料。体细胞核移植结合基因组修饰技术,是目前生产转基因家畜的一种有效方式。供体细胞的类型是影响转基因克隆效率的一个关键因素,因为供体细胞的类型决定着体细胞转基因效率和重组胚的发育潜力。目前所知,较成功用于生产转基因克隆猪的供体细胞仅限于胎儿成纤维细胞,因为它易培养、增殖期限长、重构胚的发育能力高。此外骨髓间充质细胞,一种成体干细胞,作为转基因克隆猪的供体细胞有着巨大的潜力,国内外仅有个别报道。前脂肪细胞,一种易于获得的体细胞,有报道称利用成年猪前脂肪细胞为核供体构建的克隆胚发育能力和胎儿成纤维细胞相当,并且获得了克隆猪的后代。而利用猪前脂肪细胞生产转基因克隆胚胎,将为后续组织工程研究奠定基础。因此本研究选择猪胎儿成纤维细胞、骨髓间充质细胞和前脂肪细胞为转基因克隆的供体细胞,目的是比较不同类型转基因供体细胞对生产克隆胚胎效率的影响。本研究首先建立了近交系五指山小型猪(WZSP)胎儿成纤维细胞系(FF)、新生猪骨髓间充质细胞(MSCs)系和成年猪前脂肪细胞系(PreA)。采用组织块法建立胎儿(27日龄)成纤维细胞系;髓间充质细胞从新生猪后腿骨冲取骨髓,加入到Percoll分离液中离心,吸取中间界层面细胞,贴壁法培养骨髓间充质原代细胞,培养基为低糖DMEM。对间充质细胞向脂肪细胞进行诱导分化,油红O染色鉴定;前脂肪细胞从猪的皮下脂肪取样,用0.1%胶原酶消化法建立前脂肪细胞原代细胞,并对前脂肪细胞进行诱导分化为成�
- 潘登科牟玉莲潘求真万荣刘吉张莉冯书堂
- 关键词：核移植绿色荧光蛋白转基因囊胚
