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哈尔滨市科技攻关计划项目(2004AA3CS176-1)
作品数:
3
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相关作者:
王燕
谷鸿喜
商庆龙
韩聪
邵迪
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相关机构:
哈尔滨医科大学
哈尔滨市道里区疾病预防控制中心
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发文基金:
哈尔滨市科技攻关计划项目
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相关领域:
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作者
3篇
谷鸿喜
3篇
王燕
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李茉
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2篇
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魏兰兰
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刘雪梅
传媒
2篇
中国地方病学...
1篇
微生物学杂志
年份
1篇
2008
2篇
2007
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HPV16地方分离株E6基因的克隆与原核表达研究
2007年
目的克隆人乳头瘤病毒(HPV16E6)基因并在大肠埃希菌中表达,对表达产物进行鉴定。方法用PCR方法从克隆质粒pUC19-HPV16E6E7中扩增HPV16E6基因,采用定向克隆构建pQE30-HPV16E6原核表达质粒.利用酶切和序列测定鉴定重组质粒。将pQE30-HPV16E6转化大肠埃希菌BL21(DE3),建立重组工程菌pQE30-HPV16E6/BL21(DE3)。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS—PAGE分析蛋白表达情况,利用Western blot鉴定抗原特异性。结果PCR产物470bp,重组质粒经酶切和序列测定证实构建正确。SDS—PAGE分析在18×10^3处有蛋白条带出现,与预期一致。Western blot分析证实目的条带与HPV16E6抗体有特异性反应。结论成功构建了HPV16E6基因的基因工程菌株,能高效表达E6蛋白,表达蛋白具有良好的免疫反应性。
商庆龙
刘雪梅
王燕
李承刚
邵迪
陈思佳
韩聪
谷鸿喜
关键词:
大肠杆菌
粗提和纯化的HPV16L1重组蛋白为抗原的ELISA比较
2008年
为评价真核及原核细胞表达的HPV16L1粗提蛋白代替纯化的16L1蛋白作为ELISA检测抗原的可行性。实验分别用大肠埃希菌表达的HPV16L1纯化蛋白,表达16L1的大肠埃希菌破碎物及表达16L1的昆虫细胞破碎物作为抗原。在ELISA试验中与抗HPV16L1的单克隆抗体进行反应。结果证实3种包被抗原可以得出非常相近的OD值变化趋势。表明用表达16L1的大肠埃希菌破碎物和表达16L1的昆虫细胞破碎物可以代替纯化的HPV16L1蛋白作为抗原进行ELISA试验。
李茉
王燕
陈思佳
魏兰兰
谷鸿喜
关键词:
重组蛋白
ELISA
人乳头瘤病毒16型L1蛋白表达及其单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
2007年
目的表达并纯化重组人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白,建立分泌抗HPV16 L1单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。方法以基因工程表达HPV16L1蛋白。用Ni—NTA技术进行纯化后免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经含次黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶(HAT)的选择培养基及有限稀释法进行克隆化,用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,对获得的杂交瘤细胞株染色体进行计数.同时测定细胞培养上清mAb的效价。结果筛选出2株可分泌抗HPV16 L1 mAb的杂交瘤细胞,命名为AE3和AG7,染色体数分别为130条和98条。2株杂交瘤细胞AE3和AG7培养上清的效价分别为1:5120和1:80。结论成功建立了2株可分泌抗HPV 16 L1 mAb的杂交瘤细胞,为进一步研制HPV感染检测试剂盒提供实验基础。
王燕
商庆龙
谷鸿喜
韩聪
邵迪
李茉
李承刚
关键词:
宫颈肿瘤
L1蛋白
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