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国家自然科学基金(31170727)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
王华芹
刘宝琴
李超
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相关机构:
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李超
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刘宝琴
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王华芹
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中华肿瘤防治...
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1篇
2013
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BAG3(WT)与BAG3(ΔPXXP)真核表达载体的构建与鉴定
被引量:1
2013年
目的:构建重组人BAG3(WT)与BAG3(ΔPXXP)的真核表达载体,建立稳定表达EGFP-BAG3(WT)、EGFP-BAG3(ΔPXXP)的人甲状腺癌FRO细胞系。方法:基因克隆方法构建pcDNA3-N-EGFP-BAG3(WT)和pcDNA3-N-EGFP-BAG3(ΔPXXP)的真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将重组质粒导入FRO细胞,用G418筛选稳定表达的细胞系。FRO细胞中EGFP-BAG3(WT)、EGFP-BAG3(ΔPXXP)的表达用倒置荧光显微镜方法检测。结果:分别成功构建pcDNA3-N-EGFP-BAG3(WT)和pcDNA3-N-EGFP-BAG3(ΔPXXP)重组质粒,获得转染并经G418反复筛选的稳定表达EGFP-BAG3(WT)、EGFP-BAG3(ΔPXXP)的FRO细胞系。FRO细胞均能表达绿色荧光,EGFP-BAG3(WT)主要分布在细胞质内,而EGFP-BAG3(ΔPXXP)在细胞质和细胞核内均有分布。结论:成功构建了BAG3(WT)与BAG3(ΔPXXP)真核表达载体。
李超
刘宝琴
王华芹
关键词:
基因转染
自噬作用
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