国家自然科学基金(30500537) 作品数:15 被引量:19 H指数:2 相关作者: 徐云升 欧荣英 李秉煦 张乾 郑飞云 更多>> 相关机构: 温州医学院附属第一医院 第三军医大学 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 温州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 语言文字 更多>>
外用5%咪喹莫特乳膏治疗女性尖锐湿疣患者疗效观察 被引量:2 2008年 我院皮肤科和妇产科门诊于2005年7月至2006年6月用5%咪喹莫特乳膏治疗女性尖锐湿疣患者,现将结果报道如下。 徐云升 邵笑红 欧荣英 李秉煦关键词:咪喹莫特乳膏 女性 尖锐湿疣患者 疗效观察 皮肤性病科临床技能操作培训实验室化的初步建设及效果评价 被引量:1 2009年 由于受到医疗环境、教学设施、教学方法、学生学习积极性等诸多因素的影响,提高实习医生的临床操作技能,一直是临床实习带教工作中的难点。有效避免紧张的医患关系和相关法律法规的限制因素,对教学设施和教学方法予以改进,探索一套较为完善的、强化实习医生操作技能的教学手段,是解决这一教学难点的关键环节。我院皮肤性病学教研室采用操作培训实验室化的途径,为本学科的实习教学作了有益的尝试。 徐云升 宣暄 欧荣英 张学奇关键词:皮肤性病学 HPV18E7抗原HLA-A2限制性CTL表位的初步筛选 被引量:9 2007年 目的:初步筛选人乳头瘤病毒18型E7抗原的HLA-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞(CytotoxicTlymphocyte,CTL)表位,为表位免疫原性鉴定提供靶肽。方法:采用超基序、多项式和量化基序方案相结合的方法,对靶抗原HPV18E7的HLA-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞表位进行预测,并应用固相合成法合成多肽,经RP-HPLC纯化及纯度分析,用质谱进行定性鉴定。结果:分别预测出5条、1条和6条九肽表位,综合三种预测方案确定其中1条为候选合成表位,合成肽的纯度大于95%,经质谱分析合成肽的分子量测定值与理论值相符。结论:超基序、多项式和量化基序方案联合应用提高预测效率,避免了在研究HPV18E7抗原表位时盲目合成多肽;所合成的多肽为高纯度靶肽,为后继的抗原表位的免疫原性的鉴定奠定了实验基础。 张乾 郑飞云 徐云升 欧荣英 余剑琴关键词:乳头瘤病毒 表位 E7抗原 基序 HPV18 E77-15免疫原性的实验研究 2012年 目的鉴定抗原肽HPV18E77-15能否诱导HLA—A2+健康供者的外周血淋巴细胞(PBL)产生抗原肽特异性细胞毒性T细胞(CTL),判断其是否具有免疫原性。方法通过体外细胞培养技术分为两组,实验组:负荷抗原肽为HPV18 E77-15,对照组:负荷的抗原肽为HBVc17-28,采用抗原肽负荷外周血单个核细胞(PBMC)及T2细胞作为抗原呈递细胞,重复刺激HLA—A2阳性健康供者的外周血淋巴细胞(PBLs),1周1次,共3次;分别在第1轮刺激后和第3轮刺激后,采用RPE标记的抗原肽特异性五聚体和FITC标记的CD8+抗体通过流式细胞仪检测抗原肽所诱导产生的抗原肽特异性CTL的频率。结果在流式细胞仪检测中,实验组第1轮刺激后所选淋巴细胞群中CD8+五聚体+双阳性的抗原肽特异性CTL为(1.87±001)%,第3轮刺激后抗原肽特异性CTL增至(15.73±2.47)%;而对照组中未检出抗原肽特异性的CTL细胞增殖。结论抗原肽HPV18E77-15能够诱导产生抗原肽特异性CTL增殖,具有良好的免疫原性,可能成为针对HPVl8感染的治疗性多肽疫苗的候选表位。 张乾 徐云升 朱雪洁 李晓林 杨孝军 欧荣英 郑飞云关键词:HPV18 抗原肽 细胞毒性T淋巴细胞 HLA-A2限制性CTL表位HPV18E7_(7-15)分子修饰的实验研究 被引量:1 2010年 目的对人类白细胞抗原A2分子(HLA-A2)限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位HPV18E77-15进行氨基酸置换修饰,并探讨修饰后多肽的免疫原性。方法根据量化模体方案,比较置换后的多肽与HLA-A2分子的结合系数,采用标准Fmoc方案合成并纯化多肽、细胞毒实验(51Cr释放法),观察多肽是否能够诱导特异性CTLs。结果修饰肽TLQDIVLHV符合HLA-A2分子限制性细胞毒性T细胞的表位要求,具有特异性细胞毒性T细胞诱导活性。结论修饰肽TLQDIVLHV具有更好的结合力和较强的抗原性,可以作为高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染治疗性肽疫苗分子设计的候选表位。 邵笑红 欧荣英 徐云升 张学奇 蔡剑峰 李秉煦关键词:人乳头状瘤病毒 E7抗原 表位 分子修饰 β-catenin和Bcl-2、Bax蛋白在皮肤基底细胞癌中的表达和意义 被引量:1 2010年 目的:探讨皮肤基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)中β-catenin和Bcl-2、Bax蛋白的表达与BCC发生发展的关系。方法:采用免疫组化方法检测BCC组织切片中β-catenin和Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:48例BCC标本中β-catenin蛋白的异常表达率为91.67%,Bcl-2、Bax蛋白的表达率分别为89.58%、62.5%,且Bcl-2与Bax蛋白的表达呈负相关。结论:β-catenin和Bcl-2、Bax蛋白的异常表达在BCC的发生、发展中起重要作用。 黄卡特 吕明芬 徐云升 邹炳辉关键词:Β-CATENIN BCL-2 BAX 皮肤 免疫组织化学 APL提高H2-D^b限制性天然CTL表位HPV-16E749-57免疫效应 2009年 HPV-16E749-57是H2-D^b限制性免疫显性CTL表位,是治疗HPV-16相关病变的理想靶标,研制HPV-16多肽疫苗可以参考表位为基础。但天然表位HPV-16E749-57,的肿瘤免疫效果并不理想。对表位进行氨基酸置换修饰,筛选出免疫原性强的修饰多肽配体(APL),对构建HPV-16多肽疫苗有重要的意义。 徐云升 吴玉章 任发亮 倪兵 贾正才 欧荣英 林治华 张学奇 李秉煦关键词:CTL表位 免疫效应 APL HPV-16 多肽疫苗 相关病变 HPV18 E7抗原HLA-DRB1*0301限制性Th表位的预测与鉴定 被引量:2 2008年 目的:初步鉴定人乳头瘤病毒18型E7抗原的HLA-DRB1*0301限制性辅助T淋巴细胞(T-HelperCell)表位。方法:用SYFPEITHI软件预测HPV18E7抗原HLA-DRB1*0301限制性Th表位,候选表位分别命名为P1、P2、P3,以固相多肽合成技术合成,并运用HPLC进行纯化和质谱法(MS)鉴定。以密度梯度法分离HLA-DRB1*0301阳性健康人外周血单核细胞(PBMC),合成肽刺激PBMC,用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)检测淋巴细胞增殖活性,流式细胞仪分析细胞表型。结果:多肽P1(HPV18E780-94)在体外刺激PBMC后能够有效诱导CD4+T淋巴细胞增殖。结论:P1(HPV18 E780-94)可能为HPV18E7抗原HLA-DRB1*0301限制性Th细胞表位。 余剑琴 郑飞云 徐云升 欧荣英 张乾关键词:人乳头瘤病毒 E7抗原 淋巴细胞 TH表位 HPV16E711-20-HSP110复合物的构建及其免疫原性研究 被引量:1 2010年 宫颈癌是一种危害妇女健康的常见恶性肿瘤,发病率仅次于乳腺癌,其发生发展主要与高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16和18型感染密切相关。因此,针对HPV研究、开发宫颈癌治疗性疫苗具有重要的临床意义。目前对于细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位的多肽疫苗的研究日益深入。 丁珍珍 徐云升 欧荣英 蔡剑峰 任发亮 倪兵 贾正才 林治华 吴玉章关键词:高危型人乳头状瘤病毒 LYMPHOCYTE 复合物 细胞毒T淋巴细胞 治疗性疫苗 妇女健康 HPV16 CTL表位E749-57以HSP110为分子伴侣的免疫原性研究 被引量:1 2010年 目的 探讨以mHSP110为分子伴侣的HPV16 CTL表位E749-57的免疫原性.方法 将mHSP110基因克隆、原核表达和纯化,SDS-PAGE和Western blot鉴定.在热休克状态与E749-57结合形成复合物,高压液相色谱(HPLC)鉴定其结合程度.用mHSP1 10-E749-57复合物免疫小鼠,IFN-γ胞内染色、MTT法检测小鼠脾细胞中特异CTL.结果 克隆mHSP110片段经DNA序列测定与基因库中其CDS一致,长度为2577 bp 经SDS-PAGE和Western印迹证实mHSP110表达、纯化成功,HPLC分析E749-57能够与mHSP110形成复合物.复合物免疫小鼠的脾淋巴细胞中CD8+IFN-γ+T细胞的频率、脾淋巴细胞增殖活性明显高于E749-57组、HSP110组和PBS组.复合物免疫小鼠可明显抑制TC-1肿瘤的生长.结论 mHSP110-E749-57复合物能诱导产生特异性CTL并产生抗肿瘤效应. 任发亮 徐云升 欧荣英 倪兵 贾正才 吴玉章 林治华 李秉煦 郝飞关键词:人乳头状瘤病毒16 表位