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黑龙江省卫生厅科研项目(2006-253)
作品数:
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相关作者:
王燕
商庆龙
韩聪
邵迪
谷鸿喜
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相关机构:
哈尔滨医科大学
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发文基金:
黑龙江省卫生厅科研项目
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5’-RACE法扩增抗人乳头瘤病毒16型L1蛋白单克隆抗体轻链可变区基因及序列分析
2008年
目的获得抗人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白单克隆抗体的轻链可变区(VL)基因并分析序列。方法从分泌抗HPVl6L1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,逆转录形成CD-NA,用5’-RACE策略扩增抗体轻链可变区基因,经琼脂糖凝胶电泳鉴定,并测序及进行序列分析。结果VL基因全长336bp,编码112个氨基酸,基因测序结果符合小鼠抗体轻链可变区特征。结论5’-RACE法成功获得了抗HPV16L1蛋白的单克隆抗体轻链可变区基因的真实序列,为基因工程抗体研究奠定了良好基础。
王燕
商庆龙
陈思佳
邵迪
韩聪
李茉
谷鸿喜
关键词:
人乳头瘤病毒16型
轻链
可变区
单克隆抗体
人乳头瘤病毒16型L1蛋白表达及其单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
2007年
目的表达并纯化重组人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白,建立分泌抗HPV16 L1单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。方法以基因工程表达HPV16L1蛋白。用Ni—NTA技术进行纯化后免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经含次黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶(HAT)的选择培养基及有限稀释法进行克隆化,用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,对获得的杂交瘤细胞株染色体进行计数.同时测定细胞培养上清mAb的效价。结果筛选出2株可分泌抗HPV16 L1 mAb的杂交瘤细胞,命名为AE3和AG7,染色体数分别为130条和98条。2株杂交瘤细胞AE3和AG7培养上清的效价分别为1:5120和1:80。结论成功建立了2株可分泌抗HPV 16 L1 mAb的杂交瘤细胞,为进一步研制HPV感染检测试剂盒提供实验基础。
王燕
商庆龙
谷鸿喜
韩聪
邵迪
李茉
李承刚
关键词:
宫颈肿瘤
L1蛋白
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